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果蝇凋亡体蛋白Dark的结构与功能研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
主要符号对照表第8-9页
第1章 引言第9-35页
   ·细胞凋亡研究历史第11-13页
   ·天冬氨酸介导的半胱氨酸蛋白酶 (caspase)第13-18页
     ·caspase简介第13-14页
     ·caspase的分类第14-16页
     ·caspase的结构特点第16-17页
     ·效应caspase的激活第17页
     ·起始caspase的激活第17-18页
   ·线虫细胞凋亡通路第18-20页
   ·哺乳动物细胞凋亡通路第20-23页
   ·果蝇细胞凋亡通路第23-26页
   ·凋亡体蛋白研究进展第26-35页
     ·哺乳动物凋亡体第26-30页
     ·果蝇Dark凋亡体第30-31页
     ·线虫CED-4 凋亡体第31-32页
     ·凋亡体的工作模型第32-35页
第2章 Dark凋亡体结构的解析与分析第35-77页
   ·前言第35页
   ·材料与方法第35-48页
     ·实验材料与设备第35-36页
     ·分子克隆第36-40页
     ·昆虫细胞蛋白表达体系的建立第40-43页
     ·重组蛋白表达与纯化第43-45页
     ·蛋白结合核苷酸的检测第45-46页
     ·分析超速离心第46页
     ·蛋白质结晶条件的筛选第46-47页
     ·冷冻电镜数据收集第47-48页
   ·Dark凋亡体蛋白单体的纯化与结晶尝试第48-54页
     ·Dark的分子克隆第48-49页
     ·Dark截短体的表达尝试第49-51页
     ·Dark全长蛋白的表达与结晶尝试第51-54页
   ·Dark凋亡体的纯化和结构解析第54-67页
     ·Dark凋亡体的表达与纯化第54-56页
     ·Dark凋亡体结晶条件初筛第56-57页
     ·Dark凋亡体晶体优化第57-64页
     ·Dark凋亡体冷冻电镜结构的解析第64-67页
   ·Dark凋亡体结构分析第67-72页
     ·Dark凋亡体结构概述第67-69页
     ·Dark凋亡体结合dATP的方式第69-71页
     ·Dark单体分子间与分子内的相互作用第71-72页
   ·Dark凋亡体蛋白对Dronc的激活作用第72-75页
     ·Dronc酶原的表达与纯化第72页
     ·Dark凋亡体蛋白对Dronc酶原的活化第72-74页
     ·Dronc与Dark蛋白的相互作用第74-75页
   ·讨论第75-77页
第3章 Dark/Dronc-CARD寡聚复合体结构的解析与分析第77-90页
   ·前言第77页
   ·材料与方法第77页
   ·Dark/Dronc-CARD凋亡体的纯化和结构解析第77-84页
     ·Dark/Dronc-CARD寡聚复合体的组装与纯化第77-80页
     ·Dark/Dronc-CARD寡聚复合体结晶尝试第80页
     ·Dark/Dronc-CARD寡聚复合体结合核苷酸鉴定第80页
     ·Dark/Dronc-CARD寡聚复合体冷冻电镜结构的解析第80-84页
   ·Dark/Dronc-CARD寡聚复合体结构分析第84-89页
     ·Dark/Dronc-CARD寡聚复合体结构概述第84页
     ·Dark-CARD和Dronc-CARD间的相互作用第84-87页
     ·Dark-WD和Dronc-CARD间的相互作用第87-89页
   ·讨论第89-90页
第4章 Dark/Dronc酶原寡聚复合体的研究第90-96页
   ·前言第90页
   ·材料与方法第90页
   ·Dark/Dronc寡聚复合体的纯化和结构解析第90-95页
     ·Dark/Dronc寡聚复合体的组装与纯化第90-91页
     ·Dark/Dronc寡聚复合体结晶尝试第91-92页
     ·Dark/Dronc寡聚复合体的鉴定第92-95页
   ·讨论第95-96页
第5章 讨论与展望第96-102页
   ·研究总结第96-98页
   ·待解决问题第98-100页
   ·前景展望第100-102页
参考文献第102-108页
致谢第108-111页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第111页

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