| 致谢 | 第1-5页 |
| 目录 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第零部分 文献综述 | 第13-22页 |
| ·Fosl2 基因的研究进展及应用 | 第13-17页 |
| ·Fosl2 的基因定位与结构 | 第13-14页 |
| ·Fosl2 基因的组织表达分布 | 第14页 |
| ·Fosl2 的功能研究 | 第14-16页 |
| ·展望 | 第16-17页 |
| ·Fosl2 基因与 Leptin 基因在脂肪代谢中的联系 | 第17页 |
| ·Leptin 基因的研究进展 | 第17-19页 |
| ·Leptin 的发现 | 第17页 |
| ·Leptin 基因的结构与定位 | 第17页 |
| ·Leptin 的功能 | 第17-18页 |
| ·小结 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术 | 第19-22页 |
| ·实时荧光定量 PCR 原理 | 第19页 |
| ·荧光定量 PCR 的定量方法 | 第19-21页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第21-22页 |
| 第一部分 引言 | 第22-23页 |
| 第二部分 豫南黑猪 Fosl2基因的克隆、生物学信息分析与组织表达 | 第23-51页 |
| 第一章 豫南黑猪 Fosl2基因的克隆与生物信息分析 | 第23-40页 |
| ·基因克隆试验材料 | 第23-25页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第23页 |
| ·试验动物组织样 | 第23页 |
| ·主要仪器和设备 | 第23-24页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第24-25页 |
| ·试验方法和步骤 | 第25-31页 |
| ·PCR 引物设计和合成 | 第25页 |
| ·动物组织总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR 扩增 Fosl2 部分序列 | 第26-27页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| ·cDNA 的克隆及重组质粒的筛选鉴定 | 第27-31页 |
| ·结果 | 第31-40页 |
| ·总 RNA 的提取结果 | 第31页 |
| ·反转录反应中内参基因的扩增 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR 扩增结果 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR 产物的测序 | 第34-36页 |
| ·豫南黑猪 Fosl2 基因 CDS 序列的多物种比较 | 第36页 |
| ·豫南黑猪 Fosl2 基因 CDS 的生物信息学分析及其比较 | 第36-40页 |
| 第二章 豫南黑猪 Fosl2 基因在不同组织以及不同时期的表达分析 | 第40-51页 |
| ·材料与方法 | 第40-43页 |
| ·试验动物和样品准备 | 第40页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第40页 |
| ·RNA 提取和 cDNA 合成 | 第40-42页 |
| ·PCR 引物设计与扩增条件优化 | 第42页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的表达分析 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-48页 |
| ·RNA 的纯度与完整性 | 第43页 |
| ·荧光定量 PCR 扩增曲线和溶解曲线 | 第43-44页 |
| ·豫南黑猪不同发育时期 Fosl2 基因的组织表达研究 | 第44-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-51页 |
| 第三部分 豫南黑猪Leptin基因的克隆、生物学信息分析与组织表达 | 第51-66页 |
| 第一章 豫南黑猪Leptin基因的克隆与生物信息分析 | 第51-58页 |
| ·基因克隆实验材料 | 第51页 |
| ·材料与方法 | 第51-52页 |
| ·PCR引物设计和合成 | 第51页 |
| ·动物组织总RNA的提取 | 第51页 |
| ·RT-PCR扩增Leptin部分序列 | 第51页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第51页 |
| ·cDNA 的克隆及重组质粒的筛选鉴定 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-58页 |
| ·总RNA的提取结果 | 第52页 |
| ·反转录反应中内参基因的扩增 | 第52页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第52页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第52-53页 |
| ·RT-PCR产物的测序 | 第53页 |
| ·豫南黑猪Leptin基因CDS序列的多物种比较 | 第53-54页 |
| ·电子克隆豫南黑猪 Leptin 基因 CDS 序列的生物信息学分析 | 第54-58页 |
| 第二章 豫南黑猪 Leptin 基因在不同组织及不同时期的表达分析 | 第58-66页 |
| ·材料与方法 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-63页 |
| ·RNA 的纯度与完整性 | 第58页 |
| ·荧光定量 PCR 扩增曲线和溶解曲线 | 第58-59页 |
| ·不同组织不同时期 Leptin 基因 mRNA 水平的差异比较 | 第59-62页 |
| ·Fosl2 基因和 Leptin 基因在豫南黑猪不同发育时期的组织表达特点比较 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 第四部分 结论 | 第66-67页 |
| 第五部分 创新点及下一步的工作展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
