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5非编码区自然插入19nt对J亚群禽白血病病毒复制和致病力的影响

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文縮略表第12-13页
第一章 文献综述第13-18页
   ·ALV-J分子生物学研究进展第13-15页
     ·ALV的分类第13页
     ·ALV-J病原学及其理化特性第13-14页
     ·ALV-J病毒基因结构及其编码蛋白第14-15页
   ·ALV-J的流行病学研究概况第15-16页
     ·ALV-J的流行病学第15页
     ·ALV-J的诊断第15-16页
     ·ALV-J的防治第16页
   ·ALV-J的致瘤机理第16-17页
   ·本研究的目的及意义第17-18页
第二章 ALV-J SD1009/SD1009△19前病毒cDNA感染性克隆的构建及病毒拯救第18-28页
   ·材料第18页
     ·病毒、细胞、载体和菌种第18页
     ·试剂和仪器第18页
   ·SD1009株前病毒cDNA感染性克隆的构建第18-21页
     ·引物设计第19页
     ·模板制备与PCR扩增第19页
     ·SD1009株前病毒cDNA克隆的构建第19-20页
     ·pBlu-SD1009重组质粒序列分析第20-21页
   ·SD1009株前病毒cDNA 5'UTR缺失19nt感染性克隆的构建第21-22页
     ·引物设计第21页
     ·模板制备与PCR扩增第21页
     ·SD1009前病毒cDNA 5'UTR缺失19nt克隆的构建第21-22页
     ·pBlu-SD1009△19重组质粒序列分析第22页
   ·细胞转染及病毒拯救第22页
   ·拯救病毒检测第22-23页
     ·间接免疫荧光试验第22页
     ·电镜检测第22-23页
   ·结果第23-26页
     ·SD1009株前病毒cDNA感染性克隆pBlu-SD1009的构建第23-24页
     ·SD1009前病毒cDNA缺失19nt克隆感染性克隆pBlu-SD1009△19的构建第24-25页
     ·拯救病毒的鉴定结果第25-26页
   ·讨论第26-28页
第三章 蛋鸡ALV-J 5'UTR 19nt的插入对病毒体外复制影响的实验第28-36页
   ·实验材料第28页
     ·载体、菌株和细胞第28页
     ·主要试剂和仪器第28页
   ·报告基因检测rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒前导序列的增强子活性第28-31页
     ·引物设计第28-29页
     ·模板制备与PCR扩增第29页
     ·PCR扩增产物的纯化回收第29页
     ·连接第29页
     ·转化第29-30页
     ·阳性菌落的筛选及培养第30页
     ·重组子质粒DNA的提取第30页
     ·重组子质粒的测序鉴定第30页
     ·构建含rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒前导序列的荧光素酶表达载体第30页
     ·重组质粒的荧光素酶报告基因活性检测第30-31页
   ·rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒反转录酶活性的测定第31页
   ·rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒滴度的测定第31页
   ·结果第31-34页
     ·rSD1009、rSD1009A19和HRPS-103三株病毒前导序列DNA片段增强子活性的检测第31-33页
     ·rSD1009、rSD1009A 19和HRPS-103三株病毒的反转录酶活性第33页
     ·rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒的滴度第33-34页
   ·讨论第34-36页
第四章 蛋鸡ALV-J 5'UTR 19nt的插入对病毒体内复制和致病力影响的实验第36-40页
   ·病毒第36页
   ·实验设计第36页
   ·中和抗体的检测第36-37页
   ·临床症状及病理变化观察第37页
   ·结果第37-39页
     ·SPF蛋鸡ALV-J 5'UTR插入19nt对ALV-J体内复制能力没有影响第37页
     ·蛋鸡ALV-J 5'UTR插入19nt对ALV-J致病力没有影响第37-39页
   ·讨论第39-40页
第五章 全文结论第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
作者简历第46页

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