摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
英文縮略表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-18页 |
·ALV-J分子生物学研究进展 | 第13-15页 |
·ALV的分类 | 第13页 |
·ALV-J病原学及其理化特性 | 第13-14页 |
·ALV-J病毒基因结构及其编码蛋白 | 第14-15页 |
·ALV-J的流行病学研究概况 | 第15-16页 |
·ALV-J的流行病学 | 第15页 |
·ALV-J的诊断 | 第15-16页 |
·ALV-J的防治 | 第16页 |
·ALV-J的致瘤机理 | 第16-17页 |
·本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 ALV-J SD1009/SD1009△19前病毒cDNA感染性克隆的构建及病毒拯救 | 第18-28页 |
·材料 | 第18页 |
·病毒、细胞、载体和菌种 | 第18页 |
·试剂和仪器 | 第18页 |
·SD1009株前病毒cDNA感染性克隆的构建 | 第18-21页 |
·引物设计 | 第19页 |
·模板制备与PCR扩增 | 第19页 |
·SD1009株前病毒cDNA克隆的构建 | 第19-20页 |
·pBlu-SD1009重组质粒序列分析 | 第20-21页 |
·SD1009株前病毒cDNA 5'UTR缺失19nt感染性克隆的构建 | 第21-22页 |
·引物设计 | 第21页 |
·模板制备与PCR扩增 | 第21页 |
·SD1009前病毒cDNA 5'UTR缺失19nt克隆的构建 | 第21-22页 |
·pBlu-SD1009△19重组质粒序列分析 | 第22页 |
·细胞转染及病毒拯救 | 第22页 |
·拯救病毒检测 | 第22-23页 |
·间接免疫荧光试验 | 第22页 |
·电镜检测 | 第22-23页 |
·结果 | 第23-26页 |
·SD1009株前病毒cDNA感染性克隆pBlu-SD1009的构建 | 第23-24页 |
·SD1009前病毒cDNA缺失19nt克隆感染性克隆pBlu-SD1009△19的构建 | 第24-25页 |
·拯救病毒的鉴定结果 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26-28页 |
第三章 蛋鸡ALV-J 5'UTR 19nt的插入对病毒体外复制影响的实验 | 第28-36页 |
·实验材料 | 第28页 |
·载体、菌株和细胞 | 第28页 |
·主要试剂和仪器 | 第28页 |
·报告基因检测rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒前导序列的增强子活性 | 第28-31页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·模板制备与PCR扩增 | 第29页 |
·PCR扩增产物的纯化回收 | 第29页 |
·连接 | 第29页 |
·转化 | 第29-30页 |
·阳性菌落的筛选及培养 | 第30页 |
·重组子质粒DNA的提取 | 第30页 |
·重组子质粒的测序鉴定 | 第30页 |
·构建含rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒前导序列的荧光素酶表达载体 | 第30页 |
·重组质粒的荧光素酶报告基因活性检测 | 第30-31页 |
·rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒反转录酶活性的测定 | 第31页 |
·rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒滴度的测定 | 第31页 |
·结果 | 第31-34页 |
·rSD1009、rSD1009A19和HRPS-103三株病毒前导序列DNA片段增强子活性的检测 | 第31-33页 |
·rSD1009、rSD1009A 19和HRPS-103三株病毒的反转录酶活性 | 第33页 |
·rSD1009、rSD1009△19和HRPS-103三株病毒的滴度 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第四章 蛋鸡ALV-J 5'UTR 19nt的插入对病毒体内复制和致病力影响的实验 | 第36-40页 |
·病毒 | 第36页 |
·实验设计 | 第36页 |
·中和抗体的检测 | 第36-37页 |
·临床症状及病理变化观察 | 第37页 |
·结果 | 第37-39页 |
·SPF蛋鸡ALV-J 5'UTR插入19nt对ALV-J体内复制能力没有影响 | 第37页 |
·蛋鸡ALV-J 5'UTR插入19nt对ALV-J致病力没有影响 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
第五章 全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简历 | 第46页 |