| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 前言 | 第12-29页 |
| ·植物的逆境胁迫 | 第12-16页 |
| ·非生物胁迫的信号转导 | 第12-13页 |
| ·非生物胁迫的多层次调控模式 | 第13-15页 |
| ·干旱胁迫相关研究 | 第15页 |
| ·干旱胁迫的信号调控网络 | 第15-16页 |
| ·泛素蛋白酶体途径 | 第16-21页 |
| ·泛素化途径 | 第16-20页 |
| ·泛素蛋白酶体途径参与的细胞过程 | 第20-21页 |
| ·泛素蛋白酶体途径参与的植物干旱响应过程 | 第21-25页 |
| ·单Ub分子蛋白参与对植物干旱响应过程的调控 | 第21-22页 |
| ·E2蛋白参与对植物干旱响应过程的调控 | 第22页 |
| ·E3蛋白参与对植物干旱响应过程的调控 | 第22-25页 |
| ·SINA蛋白的功能研究 | 第25-26页 |
| ·SINA蛋白在动物中的研究 | 第25-26页 |
| ·SINA蛋白在植物中的研究 | 第26页 |
| ·论文选题和研究意义 | 第26-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-46页 |
| ·实验材料 | 第29-34页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第29页 |
| ·菌株和载体 | 第29-30页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第30-31页 |
| ·引物和探针片段 | 第31-34页 |
| ·基因号(Accession number) | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-46页 |
| ·载体构建 | 第34-35页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第35-37页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第37页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第38页 |
| ·反转录、RT-PCR和Real-time PCR | 第38页 |
| ·Northern杂交 | 第38-39页 |
| ·蛋白电泳和Western杂交 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的原核表达和纯化 | 第40-41页 |
| ·体外泛素化反应 | 第41页 |
| ·水稻原生质体表达蛋白 | 第41-42页 |
| ·烟草注射异源表达蛋白 | 第42页 |
| ·转基因植物干旱处理 | 第42页 |
| ·基因芯片 | 第42-43页 |
| ·酵母双杂交和X-gal染色 | 第43-44页 |
| ·体外翻译和GST Pull-down | 第44页 |
| ·免疫共沉淀 | 第44-45页 |
| ·体内降解实验和MG132处理 | 第45页 |
| ·水稻农杆菌转化 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-71页 |
| ·水稻OsDIS1的分子生物学鉴定 | 第46-51页 |
| ·水稻OsDIS1的结构特点及同源蛋白分析 | 第46-47页 |
| ·OsDIS1蛋白的原核表达及泛素化活性分析 | 第47-49页 |
| ·OsDIS1蛋白亚细胞定位研究 | 第49-51页 |
| ·水稻OsDIS1的生物学功能分析 | 第51-56页 |
| ·OsDIS1转基因水稻的鉴定 | 第51-52页 |
| ·OsDIS1转基因水稻对干旱的响应 | 第52-54页 |
| ·OsDIS1转基因水稻对盐胁迫的响应 | 第54-56页 |
| ·水稻OsDIS1参与的信号转导途径研究 | 第56-58页 |
| ·OsDIS1-OX转基因株系的干旱处理 | 第56页 |
| ·OsDIS1-OX转基因株系的芯片分析 | 第56-57页 |
| ·Real-time PCR验证芯片数据 | 第57-58页 |
| ·水稻OsDIS1相互作用蛋白的筛选及分析 | 第58-71页 |
| ·OsDIS1互作蛋白的筛选 | 第58-59页 |
| ·OsDIS1与OsNek6互作的验证分析 | 第59-61页 |
| ·OsNek6蛋白的亚细胞定位以及和OsDIS1的共定位研究 | 第61-63页 |
| ·OsNek6与OsDIS1的体内降解分析 | 第63-64页 |
| ·OsNek6的MG132处理分析 | 第64页 |
| ·OsNek6转基因载体构建以及转基因植物的表达检测 | 第64-66页 |
| ·OsDIS1与OsSKIPa的互作分析 | 第66-68页 |
| ·OsSKIPa与OsDIS1的体内降解分析 | 第68-69页 |
| ·OsSKIPa的MG132处理分析 | 第69-71页 |
| 4 讨论 | 第71-76页 |
| ·干旱诱导的OsDIS1编码SINA泛素连接酶 | 第71页 |
| ·OsDIS1负调控水稻对干旱的抗耐性 | 第71-72页 |
| ·OsDIS1通过调控一系列逆境相关基因的表达参与对水稻的干旱响应过程调控 | 第72-73页 |
| ·OsDIS1与OsNek6互作并在体内促进其降解 | 第73-74页 |
| ·OsDIS1与干旱正调节子OsSKIPa互作 | 第74-76页 |
| 结语 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 附录 | 第87-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 作者简介 | 第103页 |
