| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| ·小麦抗穗发芽研究进展 | 第9页 |
| ·小麦穗发芽现象及危害 | 第9页 |
| ·影响小麦穗发芽的因素 | 第9-12页 |
| ·环境条件对穗发芽的影响 | 第9-10页 |
| ·a-淀粉酶对穗发芽的影响 | 第10-11页 |
| ·种子休眠性对穗发芽的影响 | 第11页 |
| ·内源激素对穗发芽的影响 | 第11-12页 |
| ·小麦抗穗发芽遗传特性的研究 | 第12页 |
| ·小麦穗发芽抗性的分子生物学研究 | 第12-14页 |
| ·ABA 的生物合成 | 第14-15页 |
| ·ABA 信号转导 | 第15-16页 |
| ·泛素介导的蛋白降解途径 | 第16-20页 |
| ·RING 指蛋白 | 第17页 |
| ·RING 指蛋白的功能 | 第17-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-34页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·供试材料 | 第20页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第20页 |
| ·总 RNA 的提取及纯化 | 第20-23页 |
| ·萝卜幼苗和小麦叶片总 RNA 的提取 | 第20-22页 |
| ·RNA 的质量及纯度检测 | 第21页 |
| ·分光光度计 RNA 纯度检测 | 第21页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第21-22页 |
| ·小麦胚及胚乳总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第22-23页 |
| ·水稻总DNA 的提取 | 第23页 |
| ·RING finger 基因cDNA 克隆 | 第23-26页 |
| ·RsRHA2b 基因的cDNA 克隆 | 第23-26页 |
| ·基因片段的PCR 扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR 扩增产物的检测和回收纯化 | 第24页 |
| ·回收产物与PGM-T 载体的连接与转化 | 第24-26页 |
| ·TaRHA2b 基因的克隆 | 第26页 |
| ·水稻谷蛋白启动子 GluC 的克隆 | 第26页 |
| ·RsRHA2b 和TaRHA2b 组织特异性表达 | 第26页 |
| ·RsRHA2b 组织特异性表达 | 第26页 |
| ·TaRHA2b 组织特异性表达 | 第26页 |
| ·种子萌发期 TaRHA2b ABA 应答表达分析 | 第26-27页 |
| ·植物转化表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·组成型表达载体的构建 | 第27页 |
| ·种子特异性启动子驱动的植物表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·RsRHA2b 转化水稻及功能研究 | 第28-30页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备转化 | 第28页 |
| ·水稻基本培养基的配制 | 第28-29页 |
| ·根癌农杆菌介导水稻转化 | 第29-30页 |
| ·种子消毒和愈伤组织的诱导 | 第29页 |
| ·农杆菌介导水稻转化 | 第29-30页 |
| ·转基因植株的初步鉴定 | 第30页 |
| ·转基因水稻DNA 的提取 | 第30页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第30页 |
| ·外援目的基因 RsRHA2b 的表达分析 | 第30页 |
| ·种子萌发实验 | 第30页 |
| ·基因枪轰击法转小麦 | 第30-34页 |
| ·培养基的配制 | 第30-31页 |
| ·微弹的制备 | 第31页 |
| ·基因枪转化 | 第31-32页 |
| ·培养方法 | 第32页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第32-34页 |
| 3. 结果分析 | 第34-51页 |
| ·RING finger 基因cDNA 克隆及序列分析 | 第34-36页 |
| ·RsRHA2b 和TaRHA2 蛋白结构分析 | 第36-38页 |
| ·RsRHA2b 和TaRHA2 组织特异性表达 | 第38页 |
| ·种子萌发期及萌发后早期 TaRHA2b 基因的ABA 应答分析 | 第38-40页 |
| ·RsRHA2b 植物转化载体的构建 | 第40-42页 |
| ·组成型表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·种子特异性启动子驱动的植物表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·转RsRHA2b 水稻获得及功能验证 | 第42-48页 |
| ·成熟胚性愈伤的诱导 | 第42-43页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第43-44页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第44-45页 |
| ·过量表达转基因水稻不同组织部位表达特性分析 | 第45-46页 |
| ·转基因水稻种子种子萌发实验 | 第46-48页 |
| ·转RsRHA2b 基因抗穗发芽小麦的创制 | 第48-51页 |
| ·基因枪介导的遗传转化 | 第48-49页 |
| ·转基因小麦植株的 PCR 鉴定 | 第49-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 英文摘要 | 第61-63页 |
