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大螟中肠Bt受体蛋白APN和CAD基因的克隆及其序列分析

摘要第1-8页
1 文献综述第8-27页
   ·大螟的生物学特性、危害及防治第8-9页
     ·大螟的生物学特征第8页
     ·大螟的危害与防治第8-9页
   ·Bt 毒素及其作用机制第9-13页
     ·Bt 简介第9-10页
     ·Bt 毒素的作用机制第10-13页
   ·昆虫对Bt 毒素的抗性机制第13-15页
   ·受体蛋白研究进展第15-27页
     ·氨肽酶N(Aminopeptidase N,APN)第15-22页
       ·氨肽酶N 的结构特征第15-16页
       ·已知的鳞翅目昆虫的APN 基因全长第16-20页
       ·鳞翅目昆虫APN 与Cry 毒素的结合第20-21页
       ·APN 受体的变异与昆虫对Cry 毒素抗性的关系第21-22页
     ·类钙粘蛋白(Cadherin-like protein, CAD)第22-25页
       ·类钙粘蛋白结构特征第23页
       ·类钙粘蛋白的种类第23-24页
       ·类钙粘蛋白与毒素结合区第24页
       ·类钙粘蛋白与抗性第24-25页
     ·碱性磷酸酯酶(Alkaline phosphatase, ALP)第25页
     ·肌动蛋白(Actin)第25-26页
     ·V-ATP 合成酶亚基(V-ATP synthase subunit)第26页
     ·热激同源蛋白(heat shock cognate protein, HSCP)第26页
     ·糖脂(Glycolipid)第26-27页
2 引言第27-28页
3 材料与方法第28-39页
   ·材料第28-29页
     ·供试昆虫第28页
     ·主要试剂第28页
     ·培养基及常规试剂的配制第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
   ·主要方法第29-39页
     ·大螟中肠总RNA 的提取第29页
     ·反转录第29-32页
       ·普通PCR 的cDNA 模板制备第29-30页
       ·RACE-PCR 的cDNA 模板制备第30-32页
     ·引物的设计与合成第32-33页
       ·APN 基因的引物设计与合成第32-33页
       ·CAD 基因的引物设计与合成第33页
     ·PCR 反应体系和程序第33-35页
       ·普通PCR第33-35页
       ·RACE-PCR第35页
     ·PCR 产物的回收纯化第35-36页
     ·连接反应第36页
     ·转化第36-37页
     ·挑取单菌落第37页
     ·菌液PCR 鉴定第37页
     ·序列分析第37-39页
4 结果与分析第39-59页
   ·大螟中肠APN 基因的研究第39-48页
     ·大螟中肠APN 基因的克隆、鉴定第39-42页
       ·大螟中肠总RNA 的提取第39页
       ·APN 基因兼并引物PCR、测序第39-40页
       ·APN 基因3’RACE 引物PCR、测序第40页
       ·APN 基因5’RACE 引物PCR、测序第40-41页
       ·APN 基因end to end 引物PCR、测序第41-42页
     ·APN 基因序列结果与分析第42-48页
   ·大螟中肠CAD 基因的研究第48-57页
     ·大螟中肠CAD 基因的克隆、鉴定第48-50页
       ·CAD 基因兼并引物PCR、测序第48页
       ·CAD 基因5’端延伸引物PCR、测序第48-49页
       ·CAD 基因3’RACE 引物PCR、测序第49页
       ·CAD 基因5’RACE 引物PCR、测序第49-50页
       ·CAD 基因end to end 引物PCR、测序第50页
     ·CAD 基因序列结果与分析第50-57页
   ·结论第57页
     ·大螟中肠受体蛋白APN 基因的克隆、序列测定与分析第57页
     ·大螟中肠受体蛋白CAD 基因的克隆、序列测定与分析第57页
   ·讨论第57-59页
参考文献第59-70页
ABSTRACT第70-71页

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