摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-18页 |
单位符号缩写 | 第18-19页 |
引言 | 第19-21页 |
第一篇 文献综述 | 第21-43页 |
第一章 瘤胃甲烷生成与瘤胃微生物 | 第21-29页 |
·甲烷生物合成途径 | 第21-24页 |
·由H_2、CO_2生成甲烷途径 | 第21-22页 |
·由乙酸生成甲烷途径 | 第22页 |
·由甲基化合物形成甲烷途径 | 第22-24页 |
·瘤胃甲烷生成与瘤胃微生物 | 第24-29页 |
·瘤胃甲烷生成与产甲烷菌 | 第24-25页 |
·瘤胃甲烷生成与瘤胃原虫 | 第25-26页 |
·瘤胃甲烷生成与瘤胃细菌 | 第26-27页 |
·瘤胃甲烷生成与瘤胃真菌 | 第27-29页 |
第二章 瘤胃甲烷生成调控研究进展 | 第29-35页 |
·影响瘤胃甲烷生成的因素 | 第29-31页 |
·采食量 | 第29-30页 |
·底物内在的降解特性 | 第30页 |
·可发酵底物种类和日粮类型 | 第30页 |
·发酵速率和瘤胃液pH | 第30-31页 |
·小结 | 第31页 |
·调控瘤胃甲烷产生的措施 | 第31-34页 |
·粗料 | 第31页 |
·精料 | 第31-32页 |
·油脂类物质 | 第32页 |
·饲料添加剂 | 第32-34页 |
·有机酸 | 第32-33页 |
·植物次级代谢产物 | 第33-34页 |
·其它途径 | 第34页 |
·试图降低瘤胃甲烷产生可能带来的负效应 | 第34-35页 |
第三章 延胡索酸、延胡索酸还原菌、瘤胃甲烷生成之间的关系及本研究的目的和意义 | 第35-43页 |
·延胡索酸 | 第35页 |
·延胡索酸还原菌 | 第35-36页 |
·延胡索酸及其钠盐在降低反刍动物甲烷生成中的应用 | 第36-40页 |
·本研究的目的与意义 | 第40-41页 |
·本研究主要内容 | 第41-43页 |
第二篇 试验研究 | 第43-109页 |
第一章 建立高效液相色谱法检测瘤胃微生物代谢产物中的有机酸 | 第43-55页 |
摘要 | 第43-44页 |
1 材料与方法 | 第44页 |
·仪器与试剂 | 第44页 |
·色谱条件 | 第44页 |
·有机酸标准溶液的配制 | 第44页 |
·发酵样品的预处理 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-51页 |
·检测波长的确定 | 第44-45页 |
·缓冲液种类、浓度的选择 | 第45-46页 |
·柱温的选择 | 第46-47页 |
·缓冲盐pH的选择 | 第47-48页 |
·样品中有机酸的测定 | 第48-49页 |
·标准曲线、检出限、精密度和回收率 | 第49-50页 |
·发酵液中有机酸的定量分析结果 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
4 小结 | 第52-53页 |
Abstract | 第53-55页 |
第二章 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对山羊血清生化指标、甲烷生成、瘤胃发酵、微生物区系组成及重要微生物数量的影响 | 第55-79页 |
摘要 | 第55-57页 |
第一节 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对山羊血清生化指标的影响 | 第57-62页 |
1 材料与方法 | 第57-60页 |
·试验动物、日粮配方、试验设计 | 第57-58页 |
·血液样品采集及分析 | 第58页 |
·数据统计 | 第58-60页 |
2 结果与分析 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
第二节 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对山羊瘤胃甲烷生成的影响 | 第62-65页 |
1 材料与方法 | 第62-63页 |
·试验动物、日粮配方及试验设计 | 第62页 |
·采样及分析 | 第62-63页 |
·简易开放呼吸室的设计 | 第63页 |
·数据统计方法 | 第63页 |
2 结果与分析 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-65页 |
第三节 不同精粗比条件下添加添加延胡索酸二钠对瘤胃微生物发酵的影响 | 第65-69页 |
1 材料与方法 | 第65-66页 |
·试验动物、日粮组成及试验设计 | 第65页 |
·样品采样与预处理 | 第65-66页 |
·样品分析 | 第66页 |
·统计分析 | 第66页 |
2 结果与分析 | 第66-68页 |
3 讨论 | 第68-69页 |
第四节 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对瘤胃微生物区系组成及重要微生物数量的影响 | 第69-76页 |
1 材料与方法 | 第69-72页 |
·试验动物、日粮组成及试验设计 | 第69页 |
·采样及分析 | 第69页 |
·瘤胃内容物总DNA的提取 | 第69-70页 |
·PCR-DGGE与图谱分析 | 第70页 |
·Real-time PCR引物及操作 | 第70页 |
·数据统计方法 | 第70-72页 |
2 结果分析 | 第72-74页 |
·细菌和产甲烷菌DGGE图谱 | 第72-73页 |
·微生物数量的变化 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-75页 |
4 结论 | 第75-76页 |
Abstract | 第76-79页 |
第三章 利用frdA基因研究延胡索酸还原菌多样性 | 第79-89页 |
摘要 | 第79-80页 |
1 材料与方法 | 第80-82页 |
·试验动物、日粮配方及试验设计 | 第80页 |
·样品采集 | 第80-81页 |
·DNA提取 | 第81页 |
·frdA基因片段PCR扩增 | 第81页 |
·克隆库构建 | 第81-82页 |
·推导的氨基酸序列分析及进化树构建 | 第82页 |
·DNA序列登录号 | 第82页 |
2 结果分析 | 第82-86页 |
·FrdA基因片段的扩增 | 第82页 |
·阳性克隆检测及RFLP分析结果 | 第82-83页 |
·FrdA基因测序及系统进化树构建 | 第83-86页 |
3 讨论 | 第86-87页 |
4 小结 | 第87-88页 |
Abstract | 第88-89页 |
第四章 体外继代培养研究山羊瘤胃液中延胡索酸利用菌的变化规律 | 第89-101页 |
摘要 | 第89-90页 |
1 材料与方法 | 第90-92页 |
·试验动物及采样 | 第90页 |
·富集延胡索酸利用菌的FH培养基 | 第90-91页 |
·DNA提取 | 第91页 |
·PCR-DGGE | 第91页 |
·16SrRNA基因全序列的克隆和分析 | 第91-92页 |
·序列分析及进化树构建 | 第92页 |
·DNA序列登录号 | 第92页 |
2 结果与分析 | 第92-97页 |
·延胡索酸利用菌在连续传代过程中的区系变化 | 第92-94页 |
·可培养的瘤胃延胡索酸利用菌的菌群结构分析 | 第94-96页 |
·可培养的瘤胃延胡索酸利用菌系统进化树分析 | 第96-97页 |
·DGGE图谱中优势条带的分子鉴定 | 第97页 |
3 讨论 | 第97-98页 |
4 小结 | 第98-99页 |
Abstract | 第99-101页 |
第五章 山羊瘤胃内延胡索酸利用菌的分离、鉴定 | 第101-109页 |
摘要 | 第101-102页 |
1 材料与方法 | 第102-103页 |
·瘤胃内容物来源及取样 | 第102页 |
·延胡索酸利用菌的FH培养基 | 第102页 |
·延胡索酸还原菌的分离 | 第102页 |
·培养液中延胡索酸的测定 | 第102-103页 |
·延胡索酸还原菌的鉴定 | 第103页 |
2 结果与分析 | 第103-106页 |
·延胡索酸还原菌的分离 | 第103-104页 |
·延胡索酸利用菌的鉴定 | 第104-106页 |
·16SrRNA基因序列测定 | 第106页 |
3 讨论 | 第106-107页 |
4 小结 | 第107-108页 |
Abstract | 第108-109页 |
全文结论及创新点 | 第109-111页 |
全文结论 | 第109页 |
创新点 | 第109-111页 |
参考文献 | 第111-123页 |
致谢 | 第123-125页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第125-127页 |
附录 | 第127-128页 |