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延胡索酸二钠对山羊瘤胃甲烷生成的调控研究及相关瘤胃微生物菌群分析

摘要第1-14页
ABSTRACT第14-18页
单位符号缩写第18-19页
引言第19-21页
第一篇 文献综述第21-43页
 第一章 瘤胃甲烷生成与瘤胃微生物第21-29页
   ·甲烷生物合成途径第21-24页
     ·由H_2、CO_2生成甲烷途径第21-22页
     ·由乙酸生成甲烷途径第22页
     ·由甲基化合物形成甲烷途径第22-24页
   ·瘤胃甲烷生成与瘤胃微生物第24-29页
     ·瘤胃甲烷生成与产甲烷菌第24-25页
     ·瘤胃甲烷生成与瘤胃原虫第25-26页
     ·瘤胃甲烷生成与瘤胃细菌第26-27页
     ·瘤胃甲烷生成与瘤胃真菌第27-29页
 第二章 瘤胃甲烷生成调控研究进展第29-35页
   ·影响瘤胃甲烷生成的因素第29-31页
     ·采食量第29-30页
     ·底物内在的降解特性第30页
     ·可发酵底物种类和日粮类型第30页
     ·发酵速率和瘤胃液pH第30-31页
     ·小结第31页
   ·调控瘤胃甲烷产生的措施第31-34页
     ·粗料第31页
     ·精料第31-32页
     ·油脂类物质第32页
     ·饲料添加剂第32-34页
       ·有机酸第32-33页
       ·植物次级代谢产物第33-34页
     ·其它途径第34页
   ·试图降低瘤胃甲烷产生可能带来的负效应第34-35页
 第三章 延胡索酸、延胡索酸还原菌、瘤胃甲烷生成之间的关系及本研究的目的和意义第35-43页
   ·延胡索酸第35页
   ·延胡索酸还原菌第35-36页
   ·延胡索酸及其钠盐在降低反刍动物甲烷生成中的应用第36-40页
   ·本研究的目的与意义第40-41页
   ·本研究主要内容第41-43页
第二篇 试验研究第43-109页
 第一章 建立高效液相色谱法检测瘤胃微生物代谢产物中的有机酸第43-55页
  摘要第43-44页
  1 材料与方法第44页
   ·仪器与试剂第44页
   ·色谱条件第44页
   ·有机酸标准溶液的配制第44页
   ·发酵样品的预处理第44页
  2 结果与分析第44-51页
   ·检测波长的确定第44-45页
   ·缓冲液种类、浓度的选择第45-46页
   ·柱温的选择第46-47页
   ·缓冲盐pH的选择第47-48页
   ·样品中有机酸的测定第48-49页
   ·标准曲线、检出限、精密度和回收率第49-50页
   ·发酵液中有机酸的定量分析结果第50-51页
  3 讨论第51-52页
  4 小结第52-53页
  Abstract第53-55页
 第二章 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对山羊血清生化指标、甲烷生成、瘤胃发酵、微生物区系组成及重要微生物数量的影响第55-79页
  摘要第55-57页
  第一节 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对山羊血清生化指标的影响第57-62页
   1 材料与方法第57-60页
   ·试验动物、日粮配方、试验设计第57-58页
   ·血液样品采集及分析第58页
   ·数据统计第58-60页
   2 结果与分析第60-61页
   3 讨论第61-62页
  第二节 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对山羊瘤胃甲烷生成的影响第62-65页
   1 材料与方法第62-63页
   ·试验动物、日粮配方及试验设计第62页
   ·采样及分析第62-63页
   ·简易开放呼吸室的设计第63页
   ·数据统计方法第63页
   2 结果与分析第63-64页
   3 讨论第64-65页
  第三节 不同精粗比条件下添加添加延胡索酸二钠对瘤胃微生物发酵的影响第65-69页
   1 材料与方法第65-66页
   ·试验动物、日粮组成及试验设计第65页
   ·样品采样与预处理第65-66页
   ·样品分析第66页
   ·统计分析第66页
   2 结果与分析第66-68页
   3 讨论第68-69页
  第四节 不同精粗比条件下添加延胡索酸二钠对瘤胃微生物区系组成及重要微生物数量的影响第69-76页
   1 材料与方法第69-72页
   ·试验动物、日粮组成及试验设计第69页
   ·采样及分析第69页
   ·瘤胃内容物总DNA的提取第69-70页
   ·PCR-DGGE与图谱分析第70页
   ·Real-time PCR引物及操作第70页
   ·数据统计方法第70-72页
   2 结果分析第72-74页
   ·细菌和产甲烷菌DGGE图谱第72-73页
   ·微生物数量的变化第73-74页
   3 讨论第74-75页
   4 结论第75-76页
  Abstract第76-79页
 第三章 利用frdA基因研究延胡索酸还原菌多样性第79-89页
  摘要第79-80页
  1 材料与方法第80-82页
   ·试验动物、日粮配方及试验设计第80页
   ·样品采集第80-81页
   ·DNA提取第81页
   ·frdA基因片段PCR扩增第81页
   ·克隆库构建第81-82页
   ·推导的氨基酸序列分析及进化树构建第82页
   ·DNA序列登录号第82页
  2 结果分析第82-86页
   ·FrdA基因片段的扩增第82页
   ·阳性克隆检测及RFLP分析结果第82-83页
   ·FrdA基因测序及系统进化树构建第83-86页
  3 讨论第86-87页
  4 小结第87-88页
  Abstract第88-89页
 第四章 体外继代培养研究山羊瘤胃液中延胡索酸利用菌的变化规律第89-101页
  摘要第89-90页
  1 材料与方法第90-92页
   ·试验动物及采样第90页
   ·富集延胡索酸利用菌的FH培养基第90-91页
   ·DNA提取第91页
   ·PCR-DGGE第91页
   ·16SrRNA基因全序列的克隆和分析第91-92页
   ·序列分析及进化树构建第92页
   ·DNA序列登录号第92页
  2 结果与分析第92-97页
   ·延胡索酸利用菌在连续传代过程中的区系变化第92-94页
   ·可培养的瘤胃延胡索酸利用菌的菌群结构分析第94-96页
   ·可培养的瘤胃延胡索酸利用菌系统进化树分析第96-97页
   ·DGGE图谱中优势条带的分子鉴定第97页
  3 讨论第97-98页
  4 小结第98-99页
  Abstract第99-101页
 第五章 山羊瘤胃内延胡索酸利用菌的分离、鉴定第101-109页
  摘要第101-102页
  1 材料与方法第102-103页
   ·瘤胃内容物来源及取样第102页
   ·延胡索酸利用菌的FH培养基第102页
   ·延胡索酸还原菌的分离第102页
   ·培养液中延胡索酸的测定第102-103页
   ·延胡索酸还原菌的鉴定第103页
  2 结果与分析第103-106页
   ·延胡索酸还原菌的分离第103-104页
   ·延胡索酸利用菌的鉴定第104-106页
   ·16SrRNA基因序列测定第106页
  3 讨论第106-107页
  4 小结第107-108页
  Abstract第108-109页
全文结论及创新点第109-111页
 全文结论第109页
 创新点第109-111页
参考文献第111-123页
致谢第123-125页
攻读博士学位期间发表的学术论文第125-127页
附录第127-128页

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