中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
目录 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
·拟南芥开花调控网络研究进展 | 第12-18页 |
·光周期途径(Photoperiod Pathway) | 第14-15页 |
·春化作用途径(Vernalization Pathway) | 第15-16页 |
·自主途径(Autonomous Pathway) | 第16-17页 |
·赤霉素途径(Gibberellin pathway) | 第17页 |
·环境温度途径(Ambient Temperature Pathway) | 第17页 |
·年龄途径(Age Pathway) | 第17-18页 |
·植物脂质转移蛋白 | 第18-21页 |
·植物脂质转移蛋白的基本特征 | 第18-19页 |
·植物LTP基因的克隆鉴定 | 第19页 |
·植物脂质转移蛋白的亚细胞定位 | 第19页 |
·植物脂质转移蛋白的生物学功能 | 第19-21页 |
·EARLI1亚家族基因研究进展 | 第21-22页 |
·本研究的目的、内容和意义 | 第22-24页 |
第二章 AT4G12490过表达、RNA干扰、突变体株系的制备 | 第24-51页 |
·材料和主要试剂 | 第24-26页 |
·植物材料的培养及生长条件 | 第24页 |
·宿主菌和质粒载体 | 第24页 |
·主要试剂和溶液的配制 | 第24-26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·载体构建和遗传转化 | 第26-40页 |
·基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
·AT4G12490-PRD RNA干扰载体的构建 | 第27-33页 |
·AT4G12490-8CM RNA干扰载体的构建 | 第33页 |
·AT4G12490过表达载体的构建 | 第33-35页 |
·35S::AT4G12490-GFP融合表达载体的构建 | 第35-37页 |
·重组质粒的农杆菌转化 | 第37-38页 |
·拟南芥遗传转化 | 第38-39页 |
·转基因拟南芥植株的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
·纯合T-DNA插入突变体的筛选 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-50页 |
·AT4G12490-PRD和AT4G12490-8CM RNA干扰载体的构建 | 第41-45页 |
·AT4G12490过表达载体的构建 | 第45-46页 |
·35S::AT4G12490-GFP融合表达载体的构建 | 第46-48页 |
·转基因拟南芥植株的筛选与鉴定 | 第48-49页 |
·SK24076 T-DNA插入纯合突变体的鉴定 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第三章 拟南芥AT4G12490基因与开花诱导途径的关系 | 第51-78页 |
·材料 | 第51-53页 |
·植物材料的处理 | 第51页 |
·Northern-blotting相关试剂 | 第51-53页 |
·主要仪器与设备 | 第53页 |
·方法 | 第53-61页 |
·Northern印迹杂交 | 第53-56页 |
·sqRT-PCR分析 | 第56-60页 |
·赤霉素含量的高效液相色谱(HPLC)测定 | 第60-61页 |
·结果 | 第61-76页 |
·8CM RNA干扰植株具有早花表型 | 第61-62页 |
·不同组织中AT4G12490基因与开花基因的表达特征 | 第62-63页 |
·不同发育阶段AT4G12490基因与开花基因的表达特征 | 第63-66页 |
·不同光周期条件下野生型植株和8CM RNA干扰植株中开花基因的表达情况 | 第66-69页 |
·AT4G12490和开花基因在野生型植株和RNA干扰植株中的昼夜表达规律 | 第69-72页 |
·AT4G12490基因与春化作用途径的相关性分析 | 第72-74页 |
·AT4G12490基因与赤霉素途径的相关性分析 | 第74-76页 |
·讨论 | 第76-78页 |
·AT4G12490等EARLI1亚家族基因能够维持拟南芥营养生长 | 第76页 |
·AT4G12490基因与拟南芥开花途径的关系 | 第76-78页 |
第四章 AT4G12490基因表达产物的亚细胞定位 | 第78-87页 |
·材料与培养基 | 第78页 |
·实验材料 | 第78页 |
·培养基 | 第78页 |
·主要仪器与设备 | 第78页 |
·方法 | 第78-80页 |
·AT4G12490烟草转基因植株的再生 | 第78-79页 |
·转基因烟草的PCR检测 | 第79页 |
·转移基因表达的sqRT-PCR分析 | 第79-80页 |
·AT4G12490蛋白的亚细胞定位 | 第80页 |
·实验结果与分析 | 第80-86页 |
·转基因烟草植株的再生和分子鉴定 | 第80-81页 |
·转基因烟草的开花时间延迟 | 第81-82页 |
·转基因烟草植株的PCR鉴定 | 第82-83页 |
·转基因烟草的SqRT-PCR分析 | 第83页 |
·AT4G12490蛋白的亚细胞定位 | 第83-86页 |
·讨论 | 第86-87页 |
第五章 拟南芥AT4G12490基因编码蛋白的抑菌活性 | 第87-102页 |
·材料 | 第87-89页 |
·植物材料 | 第87页 |
·质粒和菌株 | 第87页 |
·主要试剂 | 第87-89页 |
·主要仪器 | 第89页 |
·方法 | 第89-95页 |
·引物的设计与合成 | 第89-90页 |
·拟南芥基因组DNA的提取 | 第90页 |
·AT4G12490基因的扩增 | 第90页 |
·原核表达载体的构建 | 第90-92页 |
·AT4G12490蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中的表达 | 第92-93页 |
·融合蛋白的纯化 | 第93页 |
·重组蛋白的抑菌活性分析 | 第93-94页 |
·AT4G12490蛋白的体内抑菌活性分析 | 第94-95页 |
·结果与分析 | 第95-100页 |
·AT4G12490基因的克隆 | 第95页 |
·重组质粒pHTb-90的鉴定 | 第95-96页 |
·重组蛋白的表达与纯化 | 第96-98页 |
·AT4G12490重组蛋白的抑菌活性 | 第98-99页 |
·在细胞内表达AT4G12490基因对酵母菌生长的抑制作用 | 第99-100页 |
·讨论 | 第100-102页 |
全文总结 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-119页 |
攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第119-120页 |
致谢 | 第120页 |