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家蚕30K蛋白的结构功能及五龄血浆蛋白质组学研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一部分 家蚕30K蛋白家族结构与功能研究第13-81页
 第一章 家蚕30K蛋白家族结构与功能研究第13-29页
   ·引言第13-16页
   ·家蚕血浆蛋白质的研究进展第16-18页
   ·家蚕30K蛋白家族研究进展第18-29页
     ·30K蛋白家族简介第18-19页
     ·30K蛋白性质第19-20页
     ·30K蛋白表达时空性第20-21页
     ·30K蛋白遗传多态性第21-22页
     ·30K蛋白基因组成第22-23页
     ·30K蛋白基因表达、调控第23-25页
     ·30K蛋白同源性第25-26页
     ·家蚕30K蛋白的生理功能第26-29页
 第二章 实验材料、相关仪器设备以及实验方法第29-55页
   ·实验材料第29-31页
     ·五龄家蚕血浆及脂肪体提取第29页
     ·菌株和质粒第29页
     ·化学试剂、酶及培养基等第29-30页
     ·实验试剂的配制第30-31页
   ·实验相关仪器设备第31页
   ·实验方法第31-55页
     ·天然30K蛋白的纯化第31-33页
     ·天然Bmlp7蛋白的鉴定第33-34页
     ·天然Bmlp7蛋白的结晶以及数据收集第34-38页
     ·家蚕脂肪体总RNA 的抽提及cDNA 的制备第38-40页
     ·重组Bmlp7蛋白质粒的构建第40-46页
     ·重组Bmlp7蛋白的表达与纯化第46-49页
     ·重组Bmlp7蛋白的结晶以及数据收集第49-50页
     ·重组Bmlp7蛋白晶体结构解析和精修第50页
     ·重组Bmlp7蛋白功能研究第50-51页
     ·其他30K蛋白质粒的构建第51-54页
     ·其他30K蛋白的表达与纯化第54页
     ·重组Bmlp2,Bmlp3蛋白的结晶、数据收集及晶体学研究第54-55页
 第三章 结果与讨论第55-81页
   ·天然 Bmlp7蛋白的纯化与鉴定第55-59页
     ·天然Bmlp7的纯化第55-58页
     ·天然Bmlp7的鉴定第58-59页
   ·天然 Bmlp7蛋白的晶体学研究第59-60页
     ·天然Bmlp7的晶体生长与优化第59页
     ·天然Bmlp7蛋白的数据收集及处理第59-60页
   ·重组 Bmlp7蛋白的表达与纯化第60-62页
     ·native Bmlp7蛋白的表达与纯化第60-61页
     ·硒代甲硫氨酸重组Bmlp7(Se-Met Bmlp7)蛋白的表达与纯化第61-62页
   ·重组 Bmlp7蛋白的晶体学研究第62-65页
     ·Native Bmlp7蛋白的晶体生长与优化第62页
     ·Se-Met Bmlp7蛋白的晶体生长与优化第62-63页
     ·Se-Met Bmlp7蛋白的数据收集、处理及结构解析第63页
     ·Native Bmlp7蛋白的数据收集、处理及结构精修第63-65页
   ·Bmlp7蛋白的晶体结构及活性位点预测第65-72页
     ·Bmlp7蛋白的整体结构第65-66页
     ·Bmlp7蛋白的NTD 结构及功能第66-68页
     ·Bmlp7蛋白的CTD 结构及功能第68-72页
   ·其他重组30K蛋白的表达、纯化、结晶及数据处理第72-77页
   ·30K蛋白家族的结构与功能分析第77-78页
     ·30K蛋白家族序列比较与分析第77页
     ·30K蛋白的结构与功能预测第77-78页
   ·本章小结第78-81页
第二部分 五龄家蚕血浆蛋白质组学研究第81-129页
 第四章 五龄家蚕血浆蛋白质组学概况第81-87页
   ·蛋白质组和蛋白质组学的概念第81-82页
   ·蛋白质组研究方法第82-83页
   ·家蚕蛋白质组研究进展第83-87页
     ·蛋白质表达概况分析第84页
     ·功能性蛋白质组分析第84-87页
 第五章 实验材料、相关仪器设备以及实验方法第87-97页
   ·实验材料第87-89页
     ·家蚕的饲养第87页
     ·家蚕各龄期的蚕体及血浆第87页
     ·Bmlp7蛋白的多克隆抗体第87-88页
     ·化学试剂、酶、抗体第88页
     ·实验试剂的配制第88-89页
   ·实验仪器第89页
   ·实验方法第89-97页
     ·蛋白质的定量(BCA 法)第89-90页
     ·一维电泳第90-92页
     ·蛋白质的LCMS鉴定第92-94页
     ·蛋白质的生物信息学分析第94页
     ·重组Bmlp7蛋白的表达及纯化第94页
     ·免疫印迹法(Western blot)第94-96页
     ·圆二色谱(Circular Dichroism,CD)第96-97页
 第六章 结果与讨论第97-129页
   ·家蚕血浆蛋白质组的一维电泳结果与讨论第97-99页
   ·家蚕血浆蛋白质组的LCMS鉴定结果与讨论第99-117页
   ·家蚕血浆蛋白质组的结果分析第117-123页
     ·血浆蛋白质的物理性质第117-120页
     ·血浆蛋白质的功能分类第120-122页
     ·小结第122-123页
   ·高丰度蛋白30K蛋白的研究第123-127页
     ·Western blot分析第123-124页
     ·部分酶解分析第124-125页
     ·圆二色谱(Circular Dichroism,CD)分析第125-127页
     ·小结第127页
   ·其他高丰度蛋白第127页
   ·本章小结第127-129页
参考文献第129-135页
附录第135-142页
致谢第142-144页
攻读博士学位期间发表的学术论文第144页
攻读博士学位期间参加的学术会议第144-145页
攻读博士学位期间参与的科研项目第145-146页

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