摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一部分 家蚕30K蛋白家族结构与功能研究 | 第13-81页 |
第一章 家蚕30K蛋白家族结构与功能研究 | 第13-29页 |
·引言 | 第13-16页 |
·家蚕血浆蛋白质的研究进展 | 第16-18页 |
·家蚕30K蛋白家族研究进展 | 第18-29页 |
·30K蛋白家族简介 | 第18-19页 |
·30K蛋白性质 | 第19-20页 |
·30K蛋白表达时空性 | 第20-21页 |
·30K蛋白遗传多态性 | 第21-22页 |
·30K蛋白基因组成 | 第22-23页 |
·30K蛋白基因表达、调控 | 第23-25页 |
·30K蛋白同源性 | 第25-26页 |
·家蚕30K蛋白的生理功能 | 第26-29页 |
第二章 实验材料、相关仪器设备以及实验方法 | 第29-55页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·五龄家蚕血浆及脂肪体提取 | 第29页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·化学试剂、酶及培养基等 | 第29-30页 |
·实验试剂的配制 | 第30-31页 |
·实验相关仪器设备 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-55页 |
·天然30K蛋白的纯化 | 第31-33页 |
·天然Bmlp7蛋白的鉴定 | 第33-34页 |
·天然Bmlp7蛋白的结晶以及数据收集 | 第34-38页 |
·家蚕脂肪体总RNA 的抽提及cDNA 的制备 | 第38-40页 |
·重组Bmlp7蛋白质粒的构建 | 第40-46页 |
·重组Bmlp7蛋白的表达与纯化 | 第46-49页 |
·重组Bmlp7蛋白的结晶以及数据收集 | 第49-50页 |
·重组Bmlp7蛋白晶体结构解析和精修 | 第50页 |
·重组Bmlp7蛋白功能研究 | 第50-51页 |
·其他30K蛋白质粒的构建 | 第51-54页 |
·其他30K蛋白的表达与纯化 | 第54页 |
·重组Bmlp2,Bmlp3蛋白的结晶、数据收集及晶体学研究 | 第54-55页 |
第三章 结果与讨论 | 第55-81页 |
·天然 Bmlp7蛋白的纯化与鉴定 | 第55-59页 |
·天然Bmlp7的纯化 | 第55-58页 |
·天然Bmlp7的鉴定 | 第58-59页 |
·天然 Bmlp7蛋白的晶体学研究 | 第59-60页 |
·天然Bmlp7的晶体生长与优化 | 第59页 |
·天然Bmlp7蛋白的数据收集及处理 | 第59-60页 |
·重组 Bmlp7蛋白的表达与纯化 | 第60-62页 |
·native Bmlp7蛋白的表达与纯化 | 第60-61页 |
·硒代甲硫氨酸重组Bmlp7(Se-Met Bmlp7)蛋白的表达与纯化 | 第61-62页 |
·重组 Bmlp7蛋白的晶体学研究 | 第62-65页 |
·Native Bmlp7蛋白的晶体生长与优化 | 第62页 |
·Se-Met Bmlp7蛋白的晶体生长与优化 | 第62-63页 |
·Se-Met Bmlp7蛋白的数据收集、处理及结构解析 | 第63页 |
·Native Bmlp7蛋白的数据收集、处理及结构精修 | 第63-65页 |
·Bmlp7蛋白的晶体结构及活性位点预测 | 第65-72页 |
·Bmlp7蛋白的整体结构 | 第65-66页 |
·Bmlp7蛋白的NTD 结构及功能 | 第66-68页 |
·Bmlp7蛋白的CTD 结构及功能 | 第68-72页 |
·其他重组30K蛋白的表达、纯化、结晶及数据处理 | 第72-77页 |
·30K蛋白家族的结构与功能分析 | 第77-78页 |
·30K蛋白家族序列比较与分析 | 第77页 |
·30K蛋白的结构与功能预测 | 第77-78页 |
·本章小结 | 第78-81页 |
第二部分 五龄家蚕血浆蛋白质组学研究 | 第81-129页 |
第四章 五龄家蚕血浆蛋白质组学概况 | 第81-87页 |
·蛋白质组和蛋白质组学的概念 | 第81-82页 |
·蛋白质组研究方法 | 第82-83页 |
·家蚕蛋白质组研究进展 | 第83-87页 |
·蛋白质表达概况分析 | 第84页 |
·功能性蛋白质组分析 | 第84-87页 |
第五章 实验材料、相关仪器设备以及实验方法 | 第87-97页 |
·实验材料 | 第87-89页 |
·家蚕的饲养 | 第87页 |
·家蚕各龄期的蚕体及血浆 | 第87页 |
·Bmlp7蛋白的多克隆抗体 | 第87-88页 |
·化学试剂、酶、抗体 | 第88页 |
·实验试剂的配制 | 第88-89页 |
·实验仪器 | 第89页 |
·实验方法 | 第89-97页 |
·蛋白质的定量(BCA 法) | 第89-90页 |
·一维电泳 | 第90-92页 |
·蛋白质的LCMS鉴定 | 第92-94页 |
·蛋白质的生物信息学分析 | 第94页 |
·重组Bmlp7蛋白的表达及纯化 | 第94页 |
·免疫印迹法(Western blot) | 第94-96页 |
·圆二色谱(Circular Dichroism,CD) | 第96-97页 |
第六章 结果与讨论 | 第97-129页 |
·家蚕血浆蛋白质组的一维电泳结果与讨论 | 第97-99页 |
·家蚕血浆蛋白质组的LCMS鉴定结果与讨论 | 第99-117页 |
·家蚕血浆蛋白质组的结果分析 | 第117-123页 |
·血浆蛋白质的物理性质 | 第117-120页 |
·血浆蛋白质的功能分类 | 第120-122页 |
·小结 | 第122-123页 |
·高丰度蛋白30K蛋白的研究 | 第123-127页 |
·Western blot分析 | 第123-124页 |
·部分酶解分析 | 第124-125页 |
·圆二色谱(Circular Dichroism,CD)分析 | 第125-127页 |
·小结 | 第127页 |
·其他高丰度蛋白 | 第127页 |
·本章小结 | 第127-129页 |
参考文献 | 第129-135页 |
附录 | 第135-142页 |
致谢 | 第142-144页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第144页 |
攻读博士学位期间参加的学术会议 | 第144-145页 |
攻读博士学位期间参与的科研项目 | 第145-146页 |