摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1 植物类病变突变体概述 | 第10-13页 |
·影响植物类病变的环境因子 | 第10页 |
·植物类病变基因的克隆 | 第10-12页 |
·植物类病变的分子机制与信号转导途径 | 第12-13页 |
·ROS的调节机制 | 第12页 |
·SA介导的抗病信号途径 | 第12-13页 |
·JA和ET介导的抗病信号途径 | 第13页 |
2 水稻类病变坏死突变体及基因的研究进展 | 第13-17页 |
·水稻类病变坏死突变体的研究进展 | 第13-15页 |
·水稻类病变基因的克隆 | 第15-17页 |
·spl7、spl11、sl、Spl28和OsRLIN1基因 | 第15-16页 |
·Spl18和attml基因 | 第16-17页 |
·oslsd1、OsNPR1和OsACDR1基因 | 第17页 |
3 水稻类病变突变体研究意义及展望 | 第17-19页 |
第二章 水稻类病变突变体spl5的抗病分析 | 第19-26页 |
1 材料与方法 | 第19-21页 |
·水稻材料及培养 | 第19-20页 |
·白叶枯病菌及接种 | 第20页 |
·RNA提取 | 第20页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第20-21页 |
·RT-PCR表达分析 | 第21页 |
2 结果分析 | 第21-24页 |
·突变体spl5的抗病分析 | 第21-23页 |
·抗病相关基因表达分析 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-26页 |
第三章 水稻类病变SPL5基因的图位克隆及表达分析 | 第26-39页 |
1 材料与方法 | 第26-31页 |
·实验材料 | 第26页 |
·水稻基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
·PCR扩增 | 第27页 |
·候选基因cDNA全长的克隆 | 第27页 |
·pCAMBIA1300S-2×35S::SPL5过表达载体的构建 | 第27-29页 |
·SPL5 cDNA的制备 | 第27-28页 |
·pCAMBIA1300S载体质粒的制备 | 第28页 |
·连接、转化和克隆的鉴定 | 第28-29页 |
·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第29-30页 |
·质粒转化农杆菌感EHA105 | 第29页 |
·愈伤诱导 | 第29页 |
·遗传转化 | 第29页 |
·抗性植株的再生 | 第29-30页 |
·转基因水稻的验证 | 第30页 |
·转基因水稻的PCR验证 | 第30页 |
·转基因水稻的表达分析 | 第30页 |
·转基因水稻表型分析 | 第30页 |
·SPL5基因的生物信息学分析 | 第30页 |
·SPL5基因的表达分析 | 第30-31页 |
·水稻RNA提取与第一链cDNA合成 | 第30页 |
·RT-PCR表达分析 | 第30页 |
·实时定量PCR | 第30-31页 |
2 结果分析 | 第31-36页 |
·spl5基因的精细定位 | 第31-33页 |
·候选基因cDNA全长的克隆 | 第33页 |
·pCAMBIA1300S-2×35S::SPL5过表达载体的构建 | 第33-34页 |
·转基因水稻的检测 | 第34-35页 |
·SPL5生物信启、学分析 | 第35页 |
·SPL5的表达分析 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-39页 |
参考文献 | 第39-47页 |
附录 | 第47-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第51-52页 |