| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-19页 |
| 第一章 精原细胞分子marker的筛选 | 第19-30页 |
| ·试剂和材料 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·仪器设备 | 第19-20页 |
| ·溶液配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-21页 |
| ·组织材料的收集和处理 | 第20页 |
| ·冰冻切片的制备 | 第20页 |
| ·vimentin和mvh免疫荧光单染步骤 | 第20页 |
| ·vimentin和mvh免疫荧光双染步骤 | 第20-21页 |
| ·实验结果及分析 | 第21-27页 |
| ·EGR2、RMBY、dvl-1基因在小鼠睾丸中的表达 | 第21-24页 |
| ·vimentin基因在小鼠睾丸中的表达 | 第24-25页 |
| ·mvh基因在小鼠睾丸中的表达 | 第25-26页 |
| ·vimentin和mvh在小鼠睾丸组织中的免疫荧光双染 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-30页 |
| 第二章 精原细胞的分离纯化与鉴定 | 第30-41页 |
| ·试剂和材料 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·溶液配制 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·精原细胞的分离 | 第31-32页 |
| ·精原细胞的纯化 | 第32页 |
| ·精原细胞涂片的免疫荧光鉴定 | 第32-33页 |
| ·精原细胞的流式细胞术鉴定 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-39页 |
| ·细胞酶消化后的光镜检查结果 | 第33-35页 |
| ·荧光倒置显微镜观察精原细胞涂片的免疫荧光染色结果 | 第35-36页 |
| ·流式细胞术鉴定精原细胞纯度 | 第36-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 初级精母细胞、圆形精子细胞和长形精子细胞的分离纯化与鉴定 | 第41-48页 |
| ·试剂与材料 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42页 |
| ·溶液配制 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·生精细胞混悬液的获得 | 第42页 |
| ·其他时期生精细胞的分离与纯化 | 第42-43页 |
| ·附睾中精子的获得 | 第43页 |
| ·PI染色 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-46页 |
| ·BSA密度梯度重力沉降后的镜检结果 | 第44-45页 |
| ·流式细胞仪检测结果 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 sp3111 RNAi转基因小鼠模型的评价以及sp3111下调表达对受精及早胚发育的影响 | 第48-57页 |
| ·试剂和材料 | 第48-50页 |
| ·主要试剂 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49页 |
| ·溶液配制 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·睾丸组织mRNA的提取及cDNA的合成 | 第50-51页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第51页 |
| ·精子采集 | 第51-52页 |
| ·超数排卵和培养皿的准备 | 第52页 |
| ·卵母细胞的采集 | 第52页 |
| ·体外受精 | 第52页 |
| ·统计学分析 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-55页 |
| ·sp3111 mRNA表达水平的Real-time PCR分析 | 第52-54页 |
| ·sp3111 mRNA敲低表达对体外授精和早胚发育的影响 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 结论及展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 硕士期间发表论文 | 第64页 |
