| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·恶性肿瘤发展趋势和治疗现状 | 第11页 |
| ·Survivin研究现状 | 第11-16页 |
| ·Survivn分子结构及分布 | 第12-13页 |
| ·Survivn的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·Survivin相互作用蛋白及结合位点 | 第14页 |
| ·Survivin与肿瘤发生及临床诊断 | 第14-15页 |
| ·Survivin与肿瘤化学耐药性 | 第15-16页 |
| ·Survivin与肿瘤血管生成 | 第16页 |
| ·以survivin为靶向的抗癌药物研究现状 | 第16-17页 |
| ·TAT蛋白转导技术与蛋白药物治疗 | 第17-19页 |
| ·本课题的主要内容和意义 | 第19-21页 |
| 第2章 TmSm融合蛋白的制备 | 第21-33页 |
| ·引言 | 第21-22页 |
| ·材料与方法 | 第22-27页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·药品与试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·培养基的配制 | 第24页 |
| ·TmSm纯化试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·SDS-PAGE蛋白电泳 | 第25页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第25页 |
| ·pRSET-B-TATm-survivin(T34A)质粒的转化和提取 | 第25-26页 |
| ·TmSm融合蛋白的表达 | 第26页 |
| ·TmSm包涵体蛋白的制备 | 第26-27页 |
| ·TmSm包涵体蛋白的纯化和复性 | 第27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-32页 |
| ·质粒pRSET-B-TATm-survivin(T34A)的鉴定 | 第27-28页 |
| ·TmSm包涵体的制备 | 第28-30页 |
| ·TmSm蛋白的复性和纯化 | 第30-32页 |
| ·本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 抗肿瘤候选药物TmSm粉针剂的制备工艺研究 | 第33-47页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·材料与方法 | 第33-36页 |
| ·药品、试剂、仪器设备 | 第33-34页 |
| ·冷冻干燥方法 | 第34页 |
| ·MTT实验方法 | 第34页 |
| ·TmSm融合蛋白冻干保护剂配方的优化 | 第34-35页 |
| ·TmSm融合蛋白冻干过程参数的优化 | 第35-36页 |
| ·TmSm融合蛋白冻干产品的残留水分检测 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-46页 |
| ·TmSm融合蛋白冻干制剂的配方研究 | 第36-42页 |
| ·TmSm融合蛋白冻干过程参数的优化 | 第42-45页 |
| ·TmSm融合蛋白冻干条件优化结果 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第4章 TmSm粉针剂的部分质量与活性评价 | 第47-66页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料和方法 | 第47-55页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·细胞培养方法 | 第48-50页 |
| ·Western Blot鉴定冻干粉针TmSm融合蛋白 | 第50页 |
| ·TmSm融合蛋白活性单位定义 | 第50-51页 |
| ·TmSm融合蛋白粉针剂的紫外吸收光谱 | 第51页 |
| ·TmSm粉针剂的外观及复溶性检测 | 第51-52页 |
| ·非还原SDS-PAGE检测粉针剂蛋白的纯度 | 第52页 |
| ·RP-HPLC法检测粉针剂的蛋白纯度 | 第52页 |
| ·TmSm粉针剂的内毒素检测 | 第52-53页 |
| ·TmSm粉针剂的残留水分检测 | 第53页 |
| ·TmSm粉针剂的溶血试验 | 第53页 |
| ·TmSm粉针剂的稳定性检查 | 第53页 |
| ·TmSm粉针剂的MTT实验 | 第53-54页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染法检测肿瘤细胞凋亡现象 | 第54页 |
| ·TmSm融合蛋白与化药联用实验 | 第54-55页 |
| ·结果和讨论 | 第55-65页 |
| ·Western Blot鉴定TmSm融合蛋白 | 第55页 |
| ·TmSm活性单位的定义及其冻干粉针剂体外抗肿瘤的活性的测定 | 第55-57页 |
| ·TmSm融合蛋白的紫外吸收光谱扫描 | 第57页 |
| ·TmSm融合蛋白冻干粉针剂的外观、复溶性及残留水分 | 第57-58页 |
| ·冻干粉针的TmSm蛋白纯度 | 第58-60页 |
| ·TmSm冻干粉针剂的内毒素检测 | 第60页 |
| ·TmSm冻干粉针剂的溶血性检测 | 第60页 |
| ·TmSm冻干粉针剂的稳定性检测 | 第60-61页 |
| ·TmSm冻干粉针剂体外抗肿瘤活性评价 | 第61-63页 |
| ·TmSm与化药联用抗肿瘤效果 | 第63-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 第5章 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-80页 |
| 硕士期间发表文章和专利情况 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
