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利用传统和分子生物学方法相结合探索生防菌对黄瓜根围土壤真菌群落的影响

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第1章 前言第13-27页
   ·真菌多样性及其功能第13-14页
     ·真菌多样性第13页
     ·真菌的主要功能第13-14页
   ·土壤微生态的影响因素第14-17页
     ·季节变化第14页
     ·土壤含水量第14-15页
     ·地表植物多样性第15页
     ·外来植物入侵第15页
     ·转基因植物第15-16页
     ·生防微生物第16页
     ·农业管理第16-17页
   ·土壤微生态的研究方法及其应用第17-24页
     ·土壤微生态的研究方法第17页
     ·土壤微生态研究方法的应用第17-20页
     ·几种主要方法的优缺点第20-24页
   ·微生物农药及其应用风险第24-25页
     ·微生物农药简介第24页
     ·微生物农药使用安全第24-25页
     ·引入细菌类微生物的影响第25页
   ·本课题研究目的、内容及技术路线第25-27页
     ·研究目的第25页
     ·研究内容第25-26页
     ·技术路线第26-27页
第2章 荧光假单胞菌2P24的绿色荧光蛋白标记第27-32页
   ·引言第27页
   ·实验仪器与材料第27-28页
     ·实验主要试剂材料第27-28页
     ·实验主要仪器与设备第28页
     ·供试菌株和质粒第28页
   ·实验方法与步骤第28-30页
     ·大肠杆菌感受态制备第28-29页
     ·质粒转化第29页
     ·SDS碱裂解法质粒大量制备第29页
     ·标记荧光假单胞菌2P24第29页
     ·质粒遗传稳定性检测第29页
     ·标记前后生防菌生长情况的变化第29-30页
   ·结果分析第30-31页
     ·质粒转化结果第30页
     ·质粒遗传稳定性检测结果第30页
     ·质粒转化对生防菌生长情况的影响第30-31页
   ·讨论第31-32页
第3章 传统生物学方法检测生防菌对黄瓜根围土壤真菌数量的影响第32-40页
   ·引言第32页
   ·供试生防菌第32页
   ·实验方法与步骤第32-35页
     ·试验地点第32页
     ·试验设计第32-33页
     ·土壤取样第33页
     ·土壤pH值的测定第33页
     ·土壤含水量的测定第33页
     ·土壤中真菌数量的测定第33-34页
     ·土壤中真菌的分离纯化第34页
     ·荧光假单胞菌2P24的回收与检测第34-35页
   ·结果分析第35-38页
     ·土壤pH值的变化第35页
     ·土壤含水量的变化第35-36页
     ·荧光假单胞菌2P24在黄瓜根围土壤中的存活第36-37页
     ·荧光假单胞菌2P24对黄瓜根围土壤可培养真菌数量的影响第37-38页
     ·枯草芽孢杆菌BS908对黄瓜根围土壤真菌数量的影响第38页
   ·讨论第38-40页
第4章 末端限制性片段长度多态性分析方法检测黄瓜根围土壤真菌群落的变化第40-55页
   ·引言第40页
   ·实验仪器与材料第40-41页
     ·主要实验材料第40-41页
     ·实验仪器与设备第41页
   ·试验方法第41-43页
     ·土壤总DNA提取第41-42页
     ·真菌DNA的提取第42页
     ·土壤DNA的纯度检测第42页
     ·土壤DNA的PCR扩增第42页
     ·PCR结果的电泳检测第42页
     ·PCR产物纯化回收第42-43页
     ·PCR产物酶切第43页
     ·酶切产物检测第43页
     ·数据处理第43页
   ·结果与分析第43-53页
     ·提取土壤DNA检测结果第43-44页
     ·DNA扩增结果第44-45页
     ·PCR过程优化第45-46页
     ·DNA纯化回收结果第46-47页
     ·荧光假单胞菌2P24对黄瓜根围土壤真菌群落的影响第47-49页
     ·枯草芽孢杆菌BS908对黄瓜根围土壤真菌群落的影响第49-51页
     ·剧烈变化菌群分析第51-52页
     ·Shannon-wiener指数分析第52-53页
   ·讨论第53-55页
第五章 变性梯度凝胶电泳方法检测黄瓜根围土壤真菌群落的变化第55-69页
   ·引言第55页
   ·材料与方法第55-58页
     ·实验材料第55-56页
     ·实验步骤第56-58页
   ·结果与分析第58-67页
     ·PCR扩增结果第58-59页
     ·引物浓度优化结果第59页
     ·不同PCR助剂对DGGE结果的影响第59-60页
     ·荧光假单胞菌2P24对黄瓜根围土壤真菌群落的影响第60-63页
     ·枯草芽孢杆菌BS908对黄瓜根围土壤真菌群落的影响第63-64页
     ·优势菌群分析第64-66页
     ·Shannon-wiener指数分析第66-67页
   ·讨论第67-69页
第6章 总结与展望第69-71页
   ·总结第69-70页
   ·展望第70-71页
参考文献第71-76页
攻读硕士学位期间论文及专利发表情况第76-77页
致谢第77页

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