| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一章 引言 | 第18-30页 |
| ·鸭病毒性肝炎概述 | 第18-19页 |
| ·分类与分布 | 第18-19页 |
| ·病原学 | 第19页 |
| ·流行病学 | 第19页 |
| ·Ⅰ型鸭病毒性肝炎概述 | 第19-27页 |
| ·病原学 | 第20-21页 |
| ·基因组结构 | 第21-23页 |
| ·DHV-1 的致病性及其流行 | 第23-24页 |
| ·诊断学 | 第24-25页 |
| ·预防与控制 | 第25-27页 |
| ·反遗传学概述 | 第27-28页 |
| ·正链RNA 病毒的反遗传学 | 第27页 |
| ·负链RNA 病毒的反遗传学 | 第27-28页 |
| ·双链RNA 病毒的反遗传学 | 第28页 |
| ·反遗传学在鸭肝炎病毒研究中的应用前景 | 第28页 |
| ·研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 中国Ⅰ 型鸭肝炎病毒的分离及其基因组分子特征 | 第30-65页 |
| ·材料和方法 | 第30-41页 |
| ·病料收集及毒株背景 | 第30页 |
| ·鸭胚及红细胞的制备 | 第30页 |
| ·载体及菌株 | 第30-31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·病料的处理 | 第31页 |
| ·病毒的增殖 | 第31页 |
| ·红细胞凝集试验 | 第31-32页 |
| ·引物 | 第32页 |
| ·病毒基因组RNA 的提取 | 第32页 |
| ·反转录聚合酶链式反应 | 第32页 |
| ·PCR 产物鉴定及其回收 | 第32-40页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·PCR 产物连接与转化 | 第40页 |
| ·重组质粒提取、鉴定及序列测定 | 第40-41页 |
| ·序列测定及基因序列的确定及分析 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-63页 |
| ·DHV-1 分离毒株致鸭胚病变情况 | 第41-42页 |
| ·各分离株尿囊液对鸡外周血红细胞的凝集活性 | 第42页 |
| ·DHV-1 分离株基因组序列的确定 | 第42页 |
| ·16 株分离株基因组分析 | 第42-54页 |
| ·各分离株编码的多聚蛋白切割位点预测 | 第54页 |
| ·各分离株编码的多聚蛋白功能性位点预测 | 第54-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第三章 Du/CH/LBJ/090809 病毒致病性研究及其血清学ELISA 检测方法的建立 | 第65-83页 |
| ·材料和方法 | 第65-70页 |
| ·病毒及实验动物 | 第65页 |
| ·菌株与载体 | 第65页 |
| ·酶类及主要生化试剂 | 第65页 |
| ·Du/CH/LBJ/090809 毒株EID_(50) 的测定 | 第65-66页 |
| ·攻毒试验 | 第66页 |
| ·攻毒后不同时间血清样品采集及收集 | 第66页 |
| ·鸭抗Du/CH/LBJ/090809 阳性血清的制备及其中和活性 | 第66页 |
| ·血清学检测方法的建立 | 第66-70页 |
| ·结果 | 第70-81页 |
| ·Du/CH/ LBJ/090809 EID_(500 的测定及其致病性 | 第70-72页 |
| ·鸭抗Du/CH/LBJ/090809 阳性血清的制备及其中和活性 | 第72页 |
| ·超离Du/CH/LBJ/090809 病毒ELISA 最佳工作浓度的确定 | 第72页 |
| ·Du/CH/ LBJ/090809 病毒部分结构和非结构基因的扩增 | 第72-73页 |
| ·Du/CH/ LBJ/090809 病毒部分结构和非结构基因重组表达质粒的鉴定 | 第73页 |
| ·Du/CH/ LBJ/090809 病毒重组部分结构和非结构蛋白的获得 | 第73-75页 |
| ·部分重组结构和非结构蛋白与鸭抗DHV-1 阳性和阴性血清的反应性 | 第75页 |
| ·Du/CH/LBJ/090809 攻毒后抗体水平的检测 | 第75-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 第四章 Du/CH/LBJ/090809 病毒鸡胚适应及基因组变化规律研究 | 第83-92页 |
| ·材料和方法 | 第83-85页 |
| ·病毒鸡胚传代 | 第83页 |
| ·鸡红细胞凝集试验 | 第83页 |
| ·不同代次病毒尿囊液RT-PCR 检测 | 第83页 |
| ·鸡胚适应毒P29 和P40 鸡胚稳定性试验 | 第83-84页 |
| ·鸡胚适应毒P29 和P40 EID_(50) 的测定 | 第84页 |
| ·鸡胚传代病毒对SPF 雏鸭的致病力 | 第84页 |
| ·P40 病毒的灭活及乳化 | 第84页 |
| ·P40 病毒免疫攻毒保护试验 | 第84页 |
| ·鸡胚传代过程中不同代次鸡胚适应毒基因组获得 | 第84-85页 |
| ·结果 | 第85-89页 |
| ·Du/CH/LBJ/090809 毒株鸡胚传代特征 | 第85页 |
| ·各代次尿囊液对鸡外周血红细胞的凝集活性 | 第85页 |
| ·不同代次病毒RT-PCR 检测 | 第85页 |
| ·鸡胚适应毒P29 和P40 鸡胚稳定性试验 | 第85页 |
| ·鸡胚适应毒P29 和P40 EID_(50) 的测定 | 第85-87页 |
| ·亲本毒及鸡胚适应毒病毒滴度比较 | 第87页 |
| ·鸡胚适应毒P29 和P40 对SPF 鸭的致病性 | 第87页 |
| ·P40 病毒免疫攻毒保护试验 | 第87-88页 |
| ·鸡胚传代过程中不同代次鸡胚适应毒基因组比较分析 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-92页 |
| 第五章 Du/CH/LBJ/090809 传代致弱毒P40 感染性分子克隆构建及病毒拯救 | 第92-104页 |
| ·材料和方法 | 第92-98页 |
| ·细胞和毒株 | 第92页 |
| ·载体与生化试剂 | 第92页 |
| ·培养基 | 第92页 |
| ·引物 | 第92-93页 |
| ·RT-PCR | 第93页 |
| ·pACYC- P40 低拷贝质粒的构建 | 第93-95页 |
| ·质粒的大量制备 | 第95页 |
| ·体外转录 | 第95-96页 |
| ·转染BHK 细胞 | 第96-98页 |
| ·病毒拯救 | 第98页 |
| ·结果 | 第98-102页 |
| ·F1、F2、F3 片段的获得 | 第98页 |
| ·pACYC-P40 低拷贝质粒的构建 | 第98-101页 |
| ·病毒拯救 | 第101-102页 |
| ·讨论 | 第102-104页 |
| 第六章 全文结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简历 | 第114页 |
