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胸膜肺炎放线杆菌菌影(Ghost)的制备及其免疫效力评价

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-29页
   ·猪传染性胸膜肺炎的流行与危害第11-21页
     ·病原学第11-13页
     ·流行病学第13-16页
     ·临床症状和病理变化第16-17页
     ·实验室诊断方法第17-21页
     ·预防第21页
   ·猪传染性胸膜肺炎疫苗研究进展第21-28页
     ·灭活疫苗第22页
     ·弱毒活疫苗第22-23页
     ·亚单位疫苗第23-25页
     ·Ghosts 疫苗第25-28页
   ·研究目的及意义第28-29页
2 材料与方法第29-43页
   ·材料第29-33页
     ·质粒与菌株第29页
     ·实验动物第29页
     ·主要试剂第29-32页
     ·主要仪器设备第32-33页
   ·试验方法第33-43页
     ·DH5α“Bacterial Ghost”的制备第33-37页
     ·胸膜肺炎放线杆菌菌影的制备第37-38页
     ·胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗的制备第38-40页
     ·猪的免疫及攻毒第40页
     ·血清特异性抗体的检测第40-41页
     ·攻毒后猪肺脏病理变化第41页
     ·间接免疫荧光进行肺脏的抗原定位试验第41-42页
     ·数据处理第42-43页
3 结果与分析第43-59页
   ·目的基因的克隆与序列测定结果第43-45页
     ·裂解基因E 的PCR 扩增第43页
     ·重组质粒pMD18-E 和溶菌质粒pBV-E 的鉴定第43页
     ·溶解盒基因(E-λP_L/P_R-c1857)的扩增第43-44页
     ·穿梭溶菌质粒pGZRS-Eλ的PCR 鉴定第44-45页
   ·APPE 的PCR 鉴定结果第45-46页
   ·溶菌质粒溶菌的最佳条件第46-47页
     ·菌液OD_(600nm)值和诱导时间对细菌裂解率的影响第46-47页
     ·氯霉素对宿主菌的影响第47页
   ·诱导后的细菌生长曲线第47-48页
   ·裂解率计算的结果第48页
     ·大肠杆菌工程菌株DH5α的裂解率第48页
     ·胸膜肺炎放线杆菌的裂解率第48页
   ·电镜观察结果第48-49页
     ·大肠杆菌菌影的电镜观察结果第48-49页
     ·胸膜肺炎放线杆菌菌影的电镜观察结果第49页
   ·猪血清特异性抗体的动态变化第49-52页
   ·猪攻毒后的保护情况第52-59页
     ·猪攻毒后的保护情况第52页
     ·猪攻毒后的体温检测第52-54页
     ·猪攻毒后的病理解剖学变化第54-55页
     ·猪攻毒后肺脏组织学病变第55-57页
     ·猪攻毒后肺脏间接免疫荧光结果第57-59页
4 讨论第59-63页
   ·溶菌质粒在氯霉素作用下的溶菌情况第59-60页
   ·诱导前菌液浓度对细菌裂解的影响第60页
   ·胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗刺激猪体内产生的抗体水平第60-61页
   ·胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗对猪的保护作用第61-63页
5 结论第63-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-77页
附录第77-78页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第78页

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