食品中五种主要的致病性弧菌的多重PCR检测方法研究
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-19页 |
| 1 弧菌简介 | 第10-15页 |
| ·霍乱弧菌 | 第11-12页 |
| ·副溶血弧菌 | 第12-13页 |
| ·创伤弧菌 | 第13-14页 |
| ·拟态弧菌 | 第14页 |
| ·溶藻弧菌 | 第14-15页 |
| 2 胶原酶 | 第15-16页 |
| 3 PCR原理及应用 | 第16页 |
| 4 弧菌检测方法现状 | 第16-17页 |
| 5 本实验研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 6 本实验的难点及需要解决的问题 | 第18-19页 |
| 第二章 材料及方法 | 第19-26页 |
| 1 菌株 | 第19页 |
| 2 试剂和药品 | 第19-20页 |
| 3 仪器设备 | 第20页 |
| 4 实验方法 | 第20-26页 |
| ·弧菌增菌液盐浓度的选择 | 第20-21页 |
| ·弧菌基因组DNA提取方法的选择 | 第21-22页 |
| ·多重PCR引物的设计 | 第22-23页 |
| ·Mg~(2+)浓度梯度实验 | 第23页 |
| ·退火温度梯度实验 | 第23页 |
| ·Taq酶浓度梯度实验 | 第23页 |
| ·dNTP浓度梯度实验 | 第23页 |
| ·ctx引物浓度梯度实验 | 第23页 |
| ·特异性检测 | 第23-24页 |
| ·灵敏度检测 | 第24页 |
| ·PCR方法检测弧菌 | 第24页 |
| ·传统微生物学方法检测弧菌 | 第24-26页 |
| 第三章 结果与分析 | 第26-42页 |
| 1 弧菌增菌液盐浓度的选择 | 第26-29页 |
| 2 弧菌基因组DNA提取方法的选择 | 第29-31页 |
| 3 Mg~(2+)浓度梯度实验 | 第31-32页 |
| 4 退火温度梯度实验 | 第32-33页 |
| 5 Taq酶浓度梯度实验 | 第33-35页 |
| 6 dNTP浓度梯度实验 | 第35-36页 |
| 7 ctx引物浓度梯度实验 | 第36页 |
| 8特异性检测实验的结果 | 第36-37页 |
| 9菌液灵敏度检测实验的结果 | 第37-38页 |
| 10 检测方法步骤与参数的确定 | 第38-40页 |
| 11 优化后的各反应的结果 | 第40-41页 |
| 12 PCR方法与传统微生物学方法检测弧菌的结果 | 第41-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-48页 |
| 1 弧菌增菌液盐浓度的讨论 | 第42页 |
| 2 DNA提取方法的讨论 | 第42-43页 |
| 3 关于引物设计的讨论 | 第43-44页 |
| 4 关于PCR反应的讨论 | 第44页 |
| 5 两种检测方法的比较 | 第44-45页 |
| 6 本方法主要特征 | 第45-48页 |
| 附录 | 第48-54页 |
| 附1 | 第48-51页 |
| 附2 | 第51-52页 |
| 附3 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
