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利用毛细管电泳技术检测猪亲本与其子代DNA甲基化差异及遗传背景研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
主要性状中英文对照表第11-12页
第一部分 文献综述第12-29页
 1 前言第12页
 2 DNA甲基化研究进展第12-19页
   ·DNA甲基化的机制第12-13页
   ·哺乳动物DNA甲基化特点第13-14页
   ·DNA甲基化的生物学功能第14-19页
     ·DNA甲基化与基因表达第14-15页
     ·DNA甲基化与胚胎发育第15页
     ·DNA甲基化与X染色体失活第15-16页
     ·DNA甲基化与基因印记第16页
     ·DNA甲基化与肿瘤第16-17页
     ·DNA甲基化与哺乳动物发育第17页
     ·DNA甲基化与杂种优势第17-19页
 3 DNA甲基化检测技术第19-22页
   ·甲基化敏感的限制性内切酶法第20页
   ·亚硫酸氢钠法第20-22页
 4 毛细管电泳技术概况第22-25页
   ·毛细管电泳分类第22-23页
   ·毛细管电泳与DNA分析第23-25页
 5 候选基因概况第25-29页
   ·胰岛素样生长因子-2(IGF2)的研究现状第25-27页
     ·IGF2基因的定位和结构特点第25页
     ·IGF2的生物学作用第25-26页
     ·IGF2基因启动子的研究第26-27页
   ·生肌因子-5(MYF5)的研究现状第27-29页
     ·MYF5基因的定位和结构特点第27-28页
     ·MYF5的生物学作用第28页
     ·MYF5基因启动子的研究第28-29页
第二部分 研究目的与意义第29-30页
第三部分 材料与方法第30-37页
 1 试验材料第30-33页
   ·试验动物DNA样第30页
   ·主要药品及试剂第30页
   ·缓冲液及常用试剂的配制第30-31页
   ·主要仪器和设备第31-32页
   ·引物第32-33页
     ·IGF2第二启动子巢式PCR引物第32页
     ·MYF5启动子巢式PCR引物第32-33页
 2 试验方法第33-37页
   ·猪IGF2与MYF5基因部分启动子片段的扩增和检测第33-34页
     ·猪基因组DNA的亚硫酸盐前处理第33页
     ·IGF2第二启动子PCR反应体系及条件第33页
     ·MYF5启动子PCR反应体系及条件第33-34页
     ·PCR产物的检测第34页
   ·猪IGF2与MYF5基因克隆和测序第34-36页
     ·PCR产物的回收第34-35页
     ·纯化的PCR扩增片段的克隆第35页
     ·阳性克隆子的鉴定及序列测定第35-36页
   ·毛细管凝胶电泳检测启动子甲基化状态第36页
   ·数据处理分析第36-37页
第四部分 结果与分析第37-52页
 1 启动子扩增及测序结果第37-40页
   ·IGF2第二启动子扩增及测序结果第37-38页
     ·IGF2扩增结果第37页
     ·IGF2测序结果第37-38页
     ·IGF2测序结果比对第38页
   ·MYF5启动子扩增及测序结果第38-40页
     ·MYF5扩增结果第38-39页
     ·MYF5测序结果第39-40页
     ·MYF5测序结果比对第40页
 2 毛细管电泳结果第40-43页
   ·IGF2第二启动子毛细管电泳检测结果第40-42页
   ·MYF5启动子毛细管电泳检测结果第42-43页
 3 肌肉组织不同品种IGF2第二启动子不同甲基化水平的分类第43-44页
 4 不同品种间IGF2第二启动子不同甲基化比率的多重比较第44-45页
 5 IGF2第二启动子不同甲基化水平的遗传效应分析第45-52页
   ·IGF2不同甲基化水平与性状的相关性分析第46-52页
     ·大白猪、长白猪及其杂种猪IGF2不同甲基化水平与性状的相关性分析第47-49页
     ·梅山猪和大梅、梅大杂交猪IGF2不同甲基化水平与性状的相关性分析第49-52页
第五部分 讨论第52-57页
 1 关于毛细管凝胶电泳第52-53页
   ·影响毛细管电泳分离效果的因素第52-53页
   ·毛细管电泳最佳分离条件的确定第53页
   ·毛细管电泳标样的确定第53页
 2 关于目的片断PCR扩增第53-54页
 3 亲子代间甲基化差异与遗传背景研究第54-55页
 4 IGF2不同甲基化水平的遗传效应分析第55-56页
 5 结论第56页
 6 下一步工作第56-57页
参考文献第57-64页
附录 1第64-66页
附录 2第66-67页
致谢第67页

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