摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
主要性状中英文对照表 | 第11-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-29页 |
1 前言 | 第12页 |
2 DNA甲基化研究进展 | 第12-19页 |
·DNA甲基化的机制 | 第12-13页 |
·哺乳动物DNA甲基化特点 | 第13-14页 |
·DNA甲基化的生物学功能 | 第14-19页 |
·DNA甲基化与基因表达 | 第14-15页 |
·DNA甲基化与胚胎发育 | 第15页 |
·DNA甲基化与X染色体失活 | 第15-16页 |
·DNA甲基化与基因印记 | 第16页 |
·DNA甲基化与肿瘤 | 第16-17页 |
·DNA甲基化与哺乳动物发育 | 第17页 |
·DNA甲基化与杂种优势 | 第17-19页 |
3 DNA甲基化检测技术 | 第19-22页 |
·甲基化敏感的限制性内切酶法 | 第20页 |
·亚硫酸氢钠法 | 第20-22页 |
4 毛细管电泳技术概况 | 第22-25页 |
·毛细管电泳分类 | 第22-23页 |
·毛细管电泳与DNA分析 | 第23-25页 |
5 候选基因概况 | 第25-29页 |
·胰岛素样生长因子-2(IGF2)的研究现状 | 第25-27页 |
·IGF2基因的定位和结构特点 | 第25页 |
·IGF2的生物学作用 | 第25-26页 |
·IGF2基因启动子的研究 | 第26-27页 |
·生肌因子-5(MYF5)的研究现状 | 第27-29页 |
·MYF5基因的定位和结构特点 | 第27-28页 |
·MYF5的生物学作用 | 第28页 |
·MYF5基因启动子的研究 | 第28-29页 |
第二部分 研究目的与意义 | 第29-30页 |
第三部分 材料与方法 | 第30-37页 |
1 试验材料 | 第30-33页 |
·试验动物DNA样 | 第30页 |
·主要药品及试剂 | 第30页 |
·缓冲液及常用试剂的配制 | 第30-31页 |
·主要仪器和设备 | 第31-32页 |
·引物 | 第32-33页 |
·IGF2第二启动子巢式PCR引物 | 第32页 |
·MYF5启动子巢式PCR引物 | 第32-33页 |
2 试验方法 | 第33-37页 |
·猪IGF2与MYF5基因部分启动子片段的扩增和检测 | 第33-34页 |
·猪基因组DNA的亚硫酸盐前处理 | 第33页 |
·IGF2第二启动子PCR反应体系及条件 | 第33页 |
·MYF5启动子PCR反应体系及条件 | 第33-34页 |
·PCR产物的检测 | 第34页 |
·猪IGF2与MYF5基因克隆和测序 | 第34-36页 |
·PCR产物的回收 | 第34-35页 |
·纯化的PCR扩增片段的克隆 | 第35页 |
·阳性克隆子的鉴定及序列测定 | 第35-36页 |
·毛细管凝胶电泳检测启动子甲基化状态 | 第36页 |
·数据处理分析 | 第36-37页 |
第四部分 结果与分析 | 第37-52页 |
1 启动子扩增及测序结果 | 第37-40页 |
·IGF2第二启动子扩增及测序结果 | 第37-38页 |
·IGF2扩增结果 | 第37页 |
·IGF2测序结果 | 第37-38页 |
·IGF2测序结果比对 | 第38页 |
·MYF5启动子扩增及测序结果 | 第38-40页 |
·MYF5扩增结果 | 第38-39页 |
·MYF5测序结果 | 第39-40页 |
·MYF5测序结果比对 | 第40页 |
2 毛细管电泳结果 | 第40-43页 |
·IGF2第二启动子毛细管电泳检测结果 | 第40-42页 |
·MYF5启动子毛细管电泳检测结果 | 第42-43页 |
3 肌肉组织不同品种IGF2第二启动子不同甲基化水平的分类 | 第43-44页 |
4 不同品种间IGF2第二启动子不同甲基化比率的多重比较 | 第44-45页 |
5 IGF2第二启动子不同甲基化水平的遗传效应分析 | 第45-52页 |
·IGF2不同甲基化水平与性状的相关性分析 | 第46-52页 |
·大白猪、长白猪及其杂种猪IGF2不同甲基化水平与性状的相关性分析 | 第47-49页 |
·梅山猪和大梅、梅大杂交猪IGF2不同甲基化水平与性状的相关性分析 | 第49-52页 |
第五部分 讨论 | 第52-57页 |
1 关于毛细管凝胶电泳 | 第52-53页 |
·影响毛细管电泳分离效果的因素 | 第52-53页 |
·毛细管电泳最佳分离条件的确定 | 第53页 |
·毛细管电泳标样的确定 | 第53页 |
2 关于目的片断PCR扩增 | 第53-54页 |
3 亲子代间甲基化差异与遗传背景研究 | 第54-55页 |
4 IGF2不同甲基化水平的遗传效应分析 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56页 |
6 下一步工作 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 1 | 第64-66页 |
附录 2 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |