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苹果周期蛋白依赖性蛋白激酶亚基基因MdCKS的克隆及表达

英文缩写符号及其中英文对照表第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1. 引言第13-25页
   ·苹果果实发育研究进展第13-16页
     ·苹果果实发育特点第13-14页
     ·影响果实大小的因素第14-16页
       ·气候条件第15页
       ·砧木类型第15页
       ·果枝类型第15页
       ·果实负载量第15-16页
       ·栽培管理第16页
       ·使用生长调节剂第16页
   ·周期蛋白依赖性蛋白激酶研究进展第16-22页
     ·细胞周期第16-17页
     ·周期蛋白和周期蛋白激酶第17页
     ·E2F 转录因子以及CKS第17-19页
     ·细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂第19页
     ·细胞周期各时相的调控第19-20页
     ·细胞周期中基因对细胞大小的影响第20页
     ·外界因素对细胞周期的调控第20-22页
   ·周期蛋白激酶调控果实大小的研究进展第22-23页
   ·基因定量检测的技术第23-25页
     ·Northern 印迹法第23页
     ·RT-PCR 法第23-24页
     ·其他方法第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25页
2. 材料与方法第25-40页
   ·实验材料第25-30页
     ·植物材料与处理第25-26页
     ·菌株与质粒第26页
     ·酶及生化试剂第26页
     ·PCR 引物第26-27页
     ·培养基第27-29页
     ·植物激素第29页
     ·抗生素第29-30页
   ·实验方法第30-40页
     ·果实生理指标的测定第30页
     ·植物材料总 RNA 的提取第30-31页
     ·反转录cDNA 第一链的合成(用于3’RACE)第31页
     ·cDNA 全长基因序列的获得第31-32页
       ·MdCKS 基因3’RACE 的克隆第31-32页
       ·MdCKS 基因全长获得第32页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第32-33页
     ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收第33页
     ·质粒 DNA 的提取第33-34页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第34-36页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第34-35页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第35页
       ·倒皿铺平板第35-36页
       ·生物信息学分析第36页
     ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化第36页
       ·感受态细胞的制备第36页
       ·冻融法农杆菌转化第36页
     ·荧光定量检测MdCKS 基因表达第36-37页
     ·植物表达载体的构建第37-39页
     ·农杆菌介导的番茄的转化第39-40页
     ·本研究使用的软件第40页
3 结果与分析第40-58页
   ·富士和国光果实单果重、纵横径的测定第40-48页
     ·富士和国光果实纵横径生长和果型指数变化规律第41-45页
     ·富士和国光果实单果重变化规律第45-47页
     ·富士和国光的纵横径与单果重变化规律第47-48页
   ·周期蛋白依赖性蛋白激酶亚基基因(MdCKS)分离第48-50页
     ·RNA 的提取及质量检测第48-49页
     ·RACE 扩增MdCKS 基因两端序列第49页
     ·MdCKS 基因全长序列扩增第49-50页
   ·MdCKS 核酸序列及氨基酸序列的分析第50-53页
   ·富士和国光CKS 基因的生物信息学分析第53-55页
   ·表达载体pBI121-MdCKS 的构建第55-56页
   ·荧光定量检测MdCKS 在国光和富士果实不同时期的表达第56-58页
     ·MdCKS 在国光果实发育过程中的表达第56-57页
     ·MdCKS 在富士果实发育过程中的表达第57页
     ·MdCKS 在国光和富士果实中的表达差异分析第57-58页
4. 讨论第58-63页
   ·果实生长发育规律第58-60页
   ·周期蛋白依赖性蛋白激酶调控亚基CKS 基因第60-61页
   ·表达载体pBI121-MdCKS 番茄转化第61页
   ·MdCKS 在苹果不同发育时期的表达情况第61-62页
   ·国光和富士果实CKS 表达量与果实大小第62-63页
   ·MdCKS 在逆境胁迫中的作用第63页
5. 结论第63-65页
6. 参考文献第65-73页
致谢第73-74页
硕士在读期间形成的论文第74-75页
硕士学位论文内容简介及自评第75页

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