| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-10页 |
| 正文图表目录 | 第10-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-40页 |
| 1 植物CPI的发现和分布 | 第16-18页 |
| 2 植物CPI的结构与功能研究进展 | 第18-31页 |
| ·植物CPI一级结构特点 | 第19-23页 |
| ·植物CPI的保守序列 | 第19-21页 |
| ·植物CPI的一级结构特点 | 第21-22页 |
| ·植物CPI的分类 | 第22-23页 |
| ·植物CPI二、三级结构及与功能的关系 | 第23-26页 |
| ·植物CPI的功能 | 第26-31页 |
| ·参与植物生长和发育过程中内源蛋白酶的调控 | 第26页 |
| ·保护植物免受害虫和病原菌的侵染 | 第26-31页 |
| 3 植物CPI基因分离和功能的研究方法 | 第31-34页 |
| ·植物CPI基因分离和克隆的研究方法 | 第31-34页 |
| ·植物CPI基因功能的研究方法 | 第34页 |
| 4 植物CPI基因在植物抗病虫基因工程中的应用研究 | 第34-37页 |
| ·植物CPI在植物抗病虫基因工程中的应用现状 | 第34-36页 |
| ·植物CPI在林木抗病虫基因工程中的应用现状 | 第36页 |
| ·植物CPI在森林生物灾害控制中的应用前景 | 第36-37页 |
| ·林木蛀干害虫幼虫消化系统的生理生化研究 | 第36-37页 |
| ·植物CPI的作用和调控机制,特别是CPI与害虫体内蛋白酶酶系统的互作机制需要深入研究 | 第37页 |
| 5 本论文的立项依据、研究内容、研究方法和技术路线 | 第37-40页 |
| ·立项依据与研究意义 | 第37-39页 |
| ·研究内容和研究方法 | 第39页 |
| ·研究的技术路线 | 第39-40页 |
| 第二章 河北杨CPI CDNA基因的分离、克隆和氨基酸特性分析 | 第40-63页 |
| 1 材料 | 第40-48页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·试剂与仪器设备 | 第40-41页 |
| ·研究方法 | 第41-48页 |
| ·材料的采集 | 第41页 |
| ·总RNA提取和质量检测 | 第41-42页 |
| ·编码区的引物设计 | 第42页 |
| ·3'端全长cDNA引物的设计 | 第42页 |
| ·cDNA编码区基因的RT-PCR扩增和电泳分析 | 第42-44页 |
| ·3'端全长cDNA基因的RT-PCR扩增和电泳分析 | 第44页 |
| ·编码区段和3'端全长cDNA PCR产物的克隆和鉴定 | 第44-46页 |
| ·序列鉴定 | 第46-47页 |
| ·河北杨cDNA编码区和3'端全长序列分析 | 第47页 |
| ·河北杨CPI蛋白的基本特性的预测分析 | 第47-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-59页 |
| ·总RNA的提取和质量鉴定 | 第48页 |
| ·河北杨CPI基因cDNA编码区的克隆、鉴定和序列分析 | 第48-52页 |
| ·河北杨CPI基因cDNA编码区段的克隆和鉴定 | 第48-51页 |
| ·河北杨CPI基因cDNA编码区的序列分析 | 第51-52页 |
| ·河北杨与欧洲山杨CPI基因cDNA编码区段的核苷酸序列分析 | 第52-53页 |
| ·河北杨与欧洲山杨CPI基因cDNA编码区的所推测的氨基酸序列分析 | 第53-54页 |
| ·河北杨CPI基因cDNA 3'端序列的获得 | 第54-57页 |
| ·河北杨CPI蛋白的特性预测 | 第57-59页 |
| ·河北杨CPI蛋白的氨基酸组成分析 | 第57页 |
| ·河北杨CPI蛋白的分子质量和等电点分析 | 第57页 |
| ·河北杨CPI蛋白亲／疏水性分析 | 第57-58页 |
| ·河北杨CPI蛋白信号肽分析 | 第58页 |
| ·河北杨CPI蛋白功能位点的分析 | 第58页 |
| ·河北杨CPI蛋白的亚细胞定位分析 | 第58页 |
| ·河北杨CPI蛋白跨膜区分析 | 第58-59页 |
| ·河北杨CPI蛋白的结构功能域分析 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| ·关于总RNA提取的问题 | 第59-60页 |
| ·关于杨树中的植物CPI基因多样性问题 | 第60-62页 |
| 4 小结 | 第62-63页 |
| 第三章 河北杨CPI基因的分离、克隆、序列及基因结构分析 | 第63-74页 |
| 1 材料与方法 | 第63-66页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·植物材料 | 第63页 |
| ·菌株、载体、生化试剂及主要仪器 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-66页 |
| ·河北杨形成层基因组DNA的提取 | 第63-64页 |
| ·扩增引物设计 | 第64页 |
| ·河北杨CPI基因的PCR扩增和电泳分析 | 第64-65页 |
| ·河北杨CPI基因片断的回收、克隆、鉴定和序列分析 | 第65-66页 |
| ·河北杨CPI基因的结构及启动子序列分析 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-71页 |
| ·DNA的提取 | 第66-67页 |
| ·河北杨CPI基因的克隆、鉴定和序列分析 | 第67-68页 |
| ·河北杨CPI基因的基因结构及相关特性的分析 | 第68-71页 |
| ·河北杨CPI基因的基因结构分析 | 第68-71页 |
| ·河北杨CPI基因的启动子分析 | 第71页 |
| 3.讨论 | 第71-72页 |
| 4 小结 | 第72-74页 |
| 第四章 河北杨CPI的系统发育分析 | 第74-79页 |
| 1 材料与方法 | 第74-75页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·研究方法 | 第75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-78页 |
| ·河北杨与其它植物CPI序列的保守性分析 | 第75-76页 |
| ·河北杨CPI的系统发育分析 | 第76-78页 |
| 3 讨论 | 第78页 |
| 4 小结 | 第78-79页 |
| 第五章 河北杨CPI基因表达载体的构建和诱导表达 | 第79-88页 |
| 1 材料与方法 | 第79-83页 |
| ·植物材料 | 第79页 |
| ·试剂与仪器 | 第79-80页 |
| ·试剂 | 第79页 |
| ·培养基、菌株和质粒载体 | 第79页 |
| ·酶和试剂盒 | 第79页 |
| ·仪器及其它 | 第79-80页 |
| ·研究方法 | 第80-83页 |
| ·河北杨CPI真核表达载体的构建 | 第80-82页 |
| ·河北杨CPI基因的诱导表达、重组蛋白的纯化和检测 | 第82-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-86页 |
| ·河北杨CPI真核表达载体的构建 | 第83-85页 |
| ·河北杨CPI真核表达目的片段的获得 | 第83-85页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第85页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第85页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第85-86页 |
| ·重组蛋白的Western检测 | 第86页 |
| 3 讨论 | 第86-87页 |
| ·关于原核表达载体和真核表达载体的构建和诱导表达的问题 | 第86-87页 |
| ·关于Western的检测问题 | 第87页 |
| 4.小结 | 第87-88页 |
| 第六章 河北杨CPI基因的功能鉴定 | 第88-97页 |
| 1 材料与方法 | 第88页 |
| ·材料与仪器设备 | 第88页 |
| ·方法 | 第88页 |
| ·重组蛋白的处理 | 第88页 |
| ·重组蛋白的含量的测定 | 第88页 |
| ·河北杨CPI重组蛋白对松墨天牛生长发育的影响 | 第88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-95页 |
| ·重组蛋白含量的测定 | 第88-89页 |
| ·重组蛋白对松墨天牛生长发育的影响 | 第89-95页 |
| ·不同含量的重组蛋白与松墨天牛死亡时间和死亡率的关系。 | 第89-91页 |
| ·不同含量的重组蛋白对存活松墨天牛体重的影响 | 第91-93页 |
| ·不同含量的重组蛋白对松墨天牛活动能力的影响和幼虫死亡特征的观察 | 第93-95页 |
| 3 讨论 | 第95-96页 |
| ·关于植物CPI功能鉴定的方法学评价 | 第95-96页 |
| ·河北杨CPI的抗虫效果的评价 | 第96页 |
| 4 小结 | 第96-97页 |
| 第七章 结论 | 第97-99页 |
| 后记 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 附录 | 第123-133页 |
