兔肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醛还原酶的分离纯化、性质鉴定及全长cDNA的克隆
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-6页 |
| 缩略语 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 材料与方法 | 第12-36页 |
| 1 材料 | 第12-15页 |
| ·动物组织来源 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12-14页 |
| ·主要仪器 | 第14-15页 |
| 2 方法 | 第15-36页 |
| ·NRDR全长cDNA的克隆 | 第15-22页 |
| ·全长cDNA的验证 | 第22-23页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第23-24页 |
| ·样本中酶活性的测定 | 第24-25页 |
| ·酶活性的计算 | 第25-26页 |
| ·蛋白质的不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第26-27页 |
| ·肝细胞质溶胶的制备 | 第27页 |
| ·柱层析纯化目的蛋白 | 第27-30页 |
| ·分子量的测定 | 第30-31页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第31-34页 |
| ·目的蛋白对9,10菲醌的作用 | 第34-36页 |
| 结果和讨论 | 第36-59页 |
| 1 全长cDNA的克隆 | 第36-38页 |
| ·5'末端的克隆 | 第36页 |
| ·全长cDNA的验证 | 第36-37页 |
| ·序列分析 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38页 |
| 2 兔肝中目的蛋白的纯化 | 第38-46页 |
| ·检测方法的确定 | 第39页 |
| ·目的蛋白定位的分析 | 第39-40页 |
| ·纯化过程的总结 | 第40-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 3 目的蛋白分子量的测定 | 第46-49页 |
| ·SDS-PAGE确定表观分子量 | 第46-47页 |
| ·分子筛层析法测蛋白分子量 | 第47页 |
| ·质谱测定分子量 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 4 目的蛋白的鉴定 | 第49-55页 |
| ·PMF | 第49-51页 |
| ·串连质谱 | 第51-54页 |
| ·N-端测序 | 第54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 5 目的蛋白对9,10菲醌的作用 | 第55-56页 |
| 6 讨论 | 第56-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
