渗透胁迫下白花柽柳SSH文库构建及质膜水孔蛋白基因克隆
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第7-14页 |
| 1 绪论 | 第14-27页 |
| ·柽柳属植物水分特性研究进展 | 第14-15页 |
| ·柽柳属植物抗旱生理指标的研究 | 第15-16页 |
| ·植物水分胁迫的分子生物学研究进展 | 第16-19页 |
| ·植物水分胁迫响应中所表达的基因 | 第16-18页 |
| ·植物水分胁迫响应中基因表达的调节 | 第18-19页 |
| ·怪柳属植物抗逆性分子机理的研究 | 第19页 |
| ·生物信息学与表达序列标签 | 第19-20页 |
| ·生物信息学 | 第19-20页 |
| ·表达序列标签 | 第20页 |
| ·研究基因表达差异的方法比较 | 第20-22页 |
| ·SSH技术 | 第20-21页 |
| ·SSH技术的优缺点 | 第21-22页 |
| ·cDNA末端快速扩增技术(RACE) | 第22-24页 |
| ·植物水孔蛋白的研究概况 | 第24-26页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 渗透胁迫下白花柽柳抑制性消减文库构建 | 第27-57页 |
| ·材料、试剂和设备 | 第27-28页 |
| ·试验材料 | 第27页 |
| ·酶及化学试剂 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·消减杂交的引物序列 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-37页 |
| ·SDS法提取白花柽柳总RNA | 第29页 |
| ·白花柽柳mRNA的分离 | 第29-30页 |
| ·白花柽柳SSH文库的构建 | 第30-35页 |
| ·测序模板制备 | 第35-37页 |
| ·EST数据处理 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-55页 |
| ·提取总RNA和分离mRNA质量检测 | 第37-38页 |
| ·反转录及酶切效果检测 | 第38页 |
| ·SSH文库消减效率检测 | 第38-39页 |
| ·SSH文库的质量分析 | 第39页 |
| ·序列结果分析 | 第39-49页 |
| ·讨论 | 第49-55页 |
| ·本章小结 | 第55-57页 |
| 3 质膜水孔蛋白基因克隆 | 第57-80页 |
| ·材料和试剂 | 第57-58页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57-58页 |
| ·试验方法 | 第58-61页 |
| ·引物合成 | 第58页 |
| ·总 RNA提取 | 第58页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第58-59页 |
| ·5′RACE反应 | 第59-60页 |
| ·电泳检测 | 第60页 |
| ·胶回收、T-载体连接,细菌转化 | 第60页 |
| ·PCR检测连接效果 | 第60页 |
| ·测序 | 第60页 |
| ·拼接、比较、全长基因克隆及分析 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-78页 |
| ·总RNA的DNA酶消化检测 | 第61页 |
| ·测序、拼接及TaAQP克隆 | 第61-67页 |
| ·白花柽柳TaAQP基因序列 | 第67-68页 |
| ·白花柽柳TaAQP基因的氨基酸序列特征 | 第68-71页 |
| ·TaAQP其它结构域预测 | 第71页 |
| ·蛋白疏水性预测 | 第71-72页 |
| ·跨膜区预测 | 第72-73页 |
| ·15种植物MIP蛋白的同源性分析 | 第73-77页 |
| ·氨基酸序列三级结构预测 | 第77页 |
| ·信号肽预测 | 第77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-80页 |
| 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 附录1 | 第92-97页 |
| 附录2 | 第97-102页 |
| 附录3 | 第102-103页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 独创性声明 | 第105页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第105页 |