| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| ·LMO的分布与危害 | 第10-11页 |
| ·LMO的生物学特性 | 第11-12页 |
| ·LMO的分类学研究进展 | 第12-13页 |
| ·LMO的分类地位 | 第12页 |
| ·LMO的亚分型研究进展 | 第12-13页 |
| ·LMO的主要毒力基因 | 第13-14页 |
| ·prfA基因产物协同调节的毒力基因 | 第13-14页 |
| ·不为prfA基因产物协同调节的毒力基因 | 第14页 |
| ·李氏溶血素研究进展 | 第14-15页 |
| ·LMO检测技术研究进展 | 第15-18页 |
| ·本课题研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·主要试剂与材料 | 第19页 |
| ·主要溶液配制方法 | 第19-21页 |
| ·培养液与培养基 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·重组菌的活化 | 第21页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE的分析 | 第21-22页 |
| ·重组李斯特氏溶血素的优化表达 | 第22页 |
| ·重组李斯特氏菌溶血素的纯化 | 第22-24页 |
| ·阻断ELISA检测LMO的初步探索 | 第24-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-37页 |
| ·李氏溶血素优化表达结果 | 第27-30页 |
| ·重组大肠杆菌生长曲线 | 第27页 |
| ·不同诱导时间对表达的影响 | 第27-28页 |
| ·不同IPTG浓度对表达的影响 | 第28-29页 |
| ·不同诱导温度对表达的影响 | 第29页 |
| ·不同培养基对表达的影响 | 第29-30页 |
| ·重组李氏溶血素纯化结果 | 第30-33页 |
| ·包涵体提取方法的优化 | 第30-31页 |
| ·表达产物的可溶性分析 | 第31-32页 |
| ·谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化蛋白 | 第32页 |
| ·纯化重组LLO浓度测定 | 第32页 |
| ·Western-blot检测纯化后的蛋白 | 第32-33页 |
| ·ELISA检测LMO的初步探索 | 第33-37页 |
| ·LMO-0586天然LLO的表达的SDS-PAGE分析 | 第33-34页 |
| ·抗原最佳工作浓度的测定 | 第34-35页 |
| ·诊断抗体最佳工作浓度的测定 | 第35页 |
| ·特异性测定 | 第35-36页 |
| ·最低检测数确定 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录 | 第46-48页 |
| 中英文缩略词 | 第48-49页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |