摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
1 绪论 | 第9-18页 |
·盐胁迫对植物的伤害 | 第9-10页 |
·渗透胁迫伤害 | 第9-10页 |
·离子伤害 | 第10页 |
·活性氧伤害 | 第10页 |
·植物的耐盐机制 | 第10-12页 |
·渗透调节机制 | 第10-11页 |
·蛋白类保护剂 | 第11-12页 |
·活性氧清除机制 | 第12页 |
·甜菜碱作为渗透剂的特点及合成途径 | 第12-13页 |
·耐盐转基因植物及codA转基因植物研究 | 第13-14页 |
·杨树简述 | 第14-16页 |
·杨树的分类及地理分布 | 第14-15页 |
·杨树的经济价值及转基因研究的意义 | 第15页 |
·杨树基因工程研究现状 | 第15-16页 |
·本项研究的目的及意义 | 第16-18页 |
2 耐盐codA基因对小黑杨单倍体植株的遗传转化 | 第18-36页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·植物材料 | 第18页 |
·菌株与质粒 | 第18-19页 |
·实验仪器 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要培养基 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-24页 |
·植物材料的准备 | 第20页 |
·菌种的活化保存 | 第20-21页 |
·三亲交配法将中间表达载体(含codA基因)转入根癌农杆菌EHA-105 | 第21页 |
·大肠杆菌质粒pGAH的小量制备(碱裂解法) | 第21-22页 |
·抗生素浓度的确定 | 第22-23页 |
·工程菌液的制备 | 第23页 |
·根癌农杆菌介导的外源基因转化程序 | 第23页 |
·影响转化率的若干因素的优化实验 | 第23-24页 |
·转基因植株的移栽 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-32页 |
·抗生素最佳使用浓度的确定 | 第24-27页 |
·影响转化率的若干因素的优化实验 | 第27-32页 |
·转基因植株的移栽 | 第32页 |
·结论与讨论 | 第32-36页 |
·抗生素的使用 | 第32-33页 |
·农杆菌介导的小黑杨遗传转化体系的优化 | 第33-34页 |
·外植体培养过程中的玻璃化现象 | 第34-35页 |
·农杆菌介导的小黑杨最优遗传转化体系 | 第35-36页 |
3 转基因小黑杨单倍体植株的检测 | 第36-51页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-44页 |
·利用选择标记基因进行检测 | 第36-37页 |
·DNA水平的检测 | 第37-41页 |
·RNA水平的检测 | 第41-44页 |
·结果与分析 | 第44-50页 |
·转化植株的叶片再分化实验 | 第44-45页 |
·转化植株的生根实验 | 第45页 |
·转化植株的PCR检测 | 第45-46页 |
·转基因植株的PCR-Southern印迹杂交 | 第46页 |
·转化植株Southern斑点杂交 | 第46-47页 |
·转化植株Southern印迹杂交 | 第47页 |
·RT-PCR检测 | 第47-48页 |
·实时荧光定量PCR检测 | 第48-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
4 转基因小黑杨的耐盐性分析 | 第51-56页 |
·实验材料 | 第51页 |
·实验方法 | 第51页 |
·NaCl耐盐实验 | 第51页 |
·NaHC0_3耐盐实验 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-55页 |
·NaCl耐盐实验 | 第51-54页 |
·NaHC0_3耐盐实验 | 第54-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
5 结论与讨论 | 第56-61页 |
·结论 | 第56页 |
·讨论 | 第56-61页 |
·转基因植株的耐盐性与相对定量结果的相关性分析 | 第56-58页 |
·单倍体在育种中的应用 | 第58-59页 |
·林木转基因方法的改进 | 第59-60页 |
·植物体抗性机制之间的交叉性 | 第60-61页 |
6 展望 | 第61-62页 |
·双价耐盐基因的遗传转化 | 第61页 |
·利用诱导法加快单倍体植株染色体加倍进程 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
附录 | 第68-70页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |