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小黑杨(Populus simonii×P.nigra)单倍体植株转化胆碱氧化酶基因(codA)的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 绪论第9-18页
   ·盐胁迫对植物的伤害第9-10页
     ·渗透胁迫伤害第9-10页
     ·离子伤害第10页
     ·活性氧伤害第10页
   ·植物的耐盐机制第10-12页
     ·渗透调节机制第10-11页
     ·蛋白类保护剂第11-12页
     ·活性氧清除机制第12页
   ·甜菜碱作为渗透剂的特点及合成途径第12-13页
   ·耐盐转基因植物及codA转基因植物研究第13-14页
   ·杨树简述第14-16页
     ·杨树的分类及地理分布第14-15页
     ·杨树的经济价值及转基因研究的意义第15页
     ·杨树基因工程研究现状第15-16页
   ·本项研究的目的及意义第16-18页
2 耐盐codA基因对小黑杨单倍体植株的遗传转化第18-36页
   ·实验材料第18-20页
     ·植物材料第18页
     ·菌株与质粒第18-19页
     ·实验仪器第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要培养基第19-20页
   ·实验方法第20-24页
     ·植物材料的准备第20页
     ·菌种的活化保存第20-21页
     ·三亲交配法将中间表达载体(含codA基因)转入根癌农杆菌EHA-105第21页
     ·大肠杆菌质粒pGAH的小量制备(碱裂解法)第21-22页
     ·抗生素浓度的确定第22-23页
     ·工程菌液的制备第23页
     ·根癌农杆菌介导的外源基因转化程序第23页
     ·影响转化率的若干因素的优化实验第23-24页
     ·转基因植株的移栽第24页
   ·结果与分析第24-32页
     ·抗生素最佳使用浓度的确定第24-27页
     ·影响转化率的若干因素的优化实验第27-32页
     ·转基因植株的移栽第32页
   ·结论与讨论第32-36页
     ·抗生素的使用第32-33页
     ·农杆菌介导的小黑杨遗传转化体系的优化第33-34页
     ·外植体培养过程中的玻璃化现象第34-35页
     ·农杆菌介导的小黑杨最优遗传转化体系第35-36页
3 转基因小黑杨单倍体植株的检测第36-51页
   ·实验材料第36页
   ·实验方法第36-44页
     ·利用选择标记基因进行检测第36-37页
     ·DNA水平的检测第37-41页
     ·RNA水平的检测第41-44页
   ·结果与分析第44-50页
     ·转化植株的叶片再分化实验第44-45页
     ·转化植株的生根实验第45页
     ·转化植株的PCR检测第45-46页
     ·转基因植株的PCR-Southern印迹杂交第46页
     ·转化植株Southern斑点杂交第46-47页
     ·转化植株Southern印迹杂交第47页
     ·RT-PCR检测第47-48页
     ·实时荧光定量PCR检测第48-50页
   ·小结第50-51页
4 转基因小黑杨的耐盐性分析第51-56页
   ·实验材料第51页
   ·实验方法第51页
     ·NaCl耐盐实验第51页
     ·NaHC0_3耐盐实验第51页
   ·结果与分析第51-55页
     ·NaCl耐盐实验第51-54页
     ·NaHC0_3耐盐实验第54-55页
   ·小结第55-56页
5 结论与讨论第56-61页
   ·结论第56页
   ·讨论第56-61页
     ·转基因植株的耐盐性与相对定量结果的相关性分析第56-58页
     ·单倍体在育种中的应用第58-59页
     ·林木转基因方法的改进第59-60页
     ·植物体抗性机制之间的交叉性第60-61页
6 展望第61-62页
     ·双价耐盐基因的遗传转化第61页
     ·利用诱导法加快单倍体植株染色体加倍进程第61-62页
参考文献第62-68页
附录第68-70页
攻读学位期间发表的学术论文第70-71页
致谢第71页

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