中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
第一章 产尿酸酶菌种筛选 | 第12-19页 |
前言 | 第12页 |
1 材料与方法 | 第12-15页 |
·材料 | 第12-14页 |
·菌种 | 第13页 |
·培养基 | 第13页 |
·试剂 | 第13-14页 |
·仪器 | 第14页 |
·实验方法 | 第14-15页 |
·菌体培养 | 第14页 |
·菌体破碎 | 第14-15页 |
·尿酸酶活性测定 | 第15页 |
2 结果与分析 | 第15-17页 |
3 讨论 | 第17页 |
参考文献 | 第17-19页 |
第二章 产朊圆酵母2.281产尿酸酶发酵条件的优化 | 第19-29页 |
前言 | 第19页 |
1 材料与方法 | 第19-21页 |
·材料 | 第19页 |
·菌种 | 第19页 |
·培养基 | 第19页 |
·试剂 | 第19页 |
·仪器 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-21页 |
·产酶发酵曲线的确定 | 第19-20页 |
·碳源对产酶的影响 | 第20页 |
·碳源比例确定 | 第20页 |
·氮源的对产酶的影响 | 第20页 |
·碳源,氮源配比的探索 | 第20页 |
·尿酸含量对产酶的影响 | 第20页 |
·尿酸及其类似物诱导作用的对比 | 第20页 |
·部分金属离子对产酶的影响 | 第20页 |
·发酵温度对产酶的影响 | 第20-21页 |
·发酵液初始pH对产酶的影响 | 第21页 |
·接种量对产酶的影响 | 第21页 |
2 结果与分析 | 第21-28页 |
·产朊圆酵母2.281产尿酸酶的发酵曲线 | 第21-22页 |
·碳源对产酶的影响 | 第22页 |
·碳源比例确定 | 第22-23页 |
·氮源对产酶的影响 | 第23-24页 |
·氮源配比的探索 | 第24页 |
·尿酸含量对产酶的影响 | 第24-25页 |
·尿酸及其类似物的诱导作用对比 | 第25页 |
·部分金属离子对产酶的影响 | 第25-26页 |
·发酵温度对产酶的影响 | 第26-27页 |
·发酵液初始pH对产酶的影响 | 第27页 |
·接种量对产酶的影响 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28页 |
参考文献 | 第28-29页 |
第三章 尿酸酶提取方法研究 | 第29-34页 |
前言 | 第29页 |
1 材料与方法 | 第29-31页 |
·材料 | 第29页 |
·菌种 | 第29页 |
·培养基 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·仪器 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-31页 |
·菌体培养 | 第30页 |
·超声波破碎法 | 第30页 |
·Triton X-100处理法 | 第30页 |
·Triton X-100,巯基乙醇法结合法 | 第30页 |
·Triton X-100,巯基乙醇,超声波综合法 | 第30-31页 |
2 结果与分析 | 第31-33页 |
·超声波破碎法 | 第31页 |
·Triton X-100处理法 | 第31-32页 |
·Triton X-100,巯基乙醇法结合法 | 第32页 |
·Triton X-100,巯基乙醇,超声波综合法 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33页 |
参考文献 | 第33-34页 |
第四章 尿酸酶的分离纯化及性质研究 | 第34-58页 |
前言 | 第34页 |
1 材料与方法 | 第34-43页 |
·材料 | 第34-35页 |
·菌种 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·仪器 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-43页 |
·尿酸酶的分离纯化 | 第35-40页 |
·蛋白质浓度测定(Bradford法) | 第35-36页 |
·硫酸铵粗级分离 | 第36-37页 |
·Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析 | 第37页 |
·Xanthine-agarose亲和层析 | 第37页 |
·酶的纯度及分子量测定 | 第37-39页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第37-38页 |
·HPLC | 第38-39页 |
·酶的等电点测定(IEF-PAGE) | 第39-40页 |
·尿酸酶的酶学性质研究 | 第40-43页 |
·酶的pH稳定性 | 第40页 |
·酶的最适pH | 第40-41页 |
·酶的热稳定性 | 第41-42页 |
·酶的最适反应温度 | 第42页 |
·尿酸酶米氏常数Km的测定 | 第42页 |
·尿酸酶在不同pH条件下的米氏常数Km的测定 | 第42页 |
·尿酸酶在不同温度条件下的米氏常数Km的测定 | 第42-43页 |
·部分试剂对酶活性的影响 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-54页 |
·分离纯化结果 | 第43-49页 |
·硫酸铵沉淀结果 | 第43页 |
·疏水层析结果 | 第43-44页 |
·亲和层析结果 | 第44-45页 |
·尿酸酶纯度鉴定及分子量测定 | 第45-48页 |
·尿酸酶等电点测定 | 第48-49页 |
·尿酸酶酶学性质研究结果 | 第49-54页 |
·酶的pH稳定性 | 第49页 |
·酶的最适pH | 第49-50页 |
·酶的热稳定性 | 第50-51页 |
·酶的最适反应温度 | 第51-52页 |
·尿酸酶米氏常数Km的测定 | 第52页 |
·尿酸酶在不同pH条件下的米氏常数Km的测定 | 第52-53页 |
·尿酸酶在不同温度条件下的米氏常数Km的测定 | 第53-54页 |
·部分试剂对酶活性的影响 | 第54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
文献综述:尿酸酶研究进展 | 第58-78页 |
1 尿酸酶概论 | 第58-60页 |
2 尿酸酶反应机制 | 第60-61页 |
3 尿酸酶与嘌呤代谢 | 第61-62页 |
4 灵长动物中尿酸酶分子进化 | 第62-63页 |
5 尿酸酶的修饰 | 第63-64页 |
6 尿酸酶的基因研究 | 第64-68页 |
7 尿酸酶在临床检测和治疗上的应用 | 第68-70页 |
·尿酸酶在临床检测上的应用 | 第68-69页 |
·尿酸酶在临床治疗上的应用 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
发表文章目录 | 第79-80页 |
声明 | 第80页 |