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J亚型禽白血病JL-2株病毒的分离鉴定及gp85基因的克隆与表达

摘    要第1-9页
Abstract第9-10页
1 引言第10-22页
   ·禽白血病病毒研究进展第10-13页
     ·禽白血病病毒及其亚群第10-11页
     ·病毒囊膜基因及受体第11页
     ·病毒的致肿瘤能力第11-12页
     ·内源性白血病病毒第12-13页
   ·J亚群禽白血病(ALV-J)的历史回顾第13页
   ·J亚群禽白血病的研究进展第13-20页
     ·ALV-J病毒结构及特性第14页
     ·ALV-J核酸和基因组结构第14-15页
     ·病毒蛋白及其抗原性第15-16页
     ·ALV-J的抗原变化第16页
     ·ALV-J的骨髓嗜性第16页
     ·ALV-J的流行病学研究进展第16-17页
     ·ALV-J的病理学症状第17-18页
     ·ALV-J的诊断第18-19页
     ·ALV-J的防制第19-20页
   ·本课题研究的目的和意义第20-22页
2 材料第22-25页
   ·病料与细胞第22页
   ·菌种与质粒第22页
   ·抗原与血清第22页
   ·引物的设计与合成第22-23页
   ·酶及生化试剂第23页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳所用的主要试剂第23-24页
   ·蛋白质印迹所用的主要试剂第24页
   ·主要实验仪器设备第24-25页
3 方法第25-33页
   ·J亚群禽白血病JL-2株病毒的分离鉴定第25-26页
     ·流行病学及症状调查第25页
     ·ALV-J的RT-PCR检测第25-26页
     ·ALV-J的 PCR检测第26页
     ·动物实验第26页
   ·JL-2株病毒囊膜基因gp85的克隆与序列分析第26-29页
     ·病毒的培养与增殖第26页
     ·提取前病毒DNA第26页
     ·PCR反应扩增目的基因片断第26-27页
     ·PCR产物电泳检测第27页
     ·PCR产物的胶回收第27页
     ·PCR产物酶切鉴定第27页
     ·构建重组质粒pMD18-T-JL-2/env第27-29页
     ·序列测定与结果分析第29页
   ·J亚群禽白血病JL-2株gp85基因的原核表达第29-33页
     ·病毒培养及病毒cDNA 的提取第29页
     ·目的片段的扩增第29页
     ·PCR产物电泳检测及回收第29页
     ·gp85基因原核表达载体PGEX-6P-1/gp85的构建第29-30页
     ·目的基因在大肠杆菌中的表达第30-31页
     ·表达产物的SDS-PAGE分析第31页
     ·融合蛋白表达效率分析第31页
     ·表达产物的Western-blot检测第31-33页
4 结果第33-41页
   ·J亚群禽白血病JL-2株的分离与鉴定结果第33-34页
     ·流行病学和症状第33页
     ·RT-PCR与PCR鉴定结果第33页
     ·动物实验结果第33-34页
   ·JL-2株病毒gp85基因的克隆与序列测定第34-38页
     ·PCR产物扩增结果鉴定第34页
     ·PCR产物酶切鉴定第34页
     ·重组质粒PMD18-T-JL-2/env酶切鉴定结果第34-35页
     ·测序结果及序列分析第35-38页
   ·ALV-J JL-2株病毒gp85基因的原核表达第38-41页
     ·gp85基因PCR扩增结果第38页
     ·表达载体PGEX-6P-1/gp85的鉴定第38页
     ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达第38-39页
     ·融合蛋白Western-blot检测结果第39-41页
5 讨论第41-44页
6 结论第44-45页
参  考  文  献第45-52页
附    录第52-58页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第58-59页
致谢第59页

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