摘 要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-22页 |
·禽白血病病毒研究进展 | 第10-13页 |
·禽白血病病毒及其亚群 | 第10-11页 |
·病毒囊膜基因及受体 | 第11页 |
·病毒的致肿瘤能力 | 第11-12页 |
·内源性白血病病毒 | 第12-13页 |
·J亚群禽白血病(ALV-J)的历史回顾 | 第13页 |
·J亚群禽白血病的研究进展 | 第13-20页 |
·ALV-J病毒结构及特性 | 第14页 |
·ALV-J核酸和基因组结构 | 第14-15页 |
·病毒蛋白及其抗原性 | 第15-16页 |
·ALV-J的抗原变化 | 第16页 |
·ALV-J的骨髓嗜性 | 第16页 |
·ALV-J的流行病学研究进展 | 第16-17页 |
·ALV-J的病理学症状 | 第17-18页 |
·ALV-J的诊断 | 第18-19页 |
·ALV-J的防制 | 第19-20页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第20-22页 |
2 材料 | 第22-25页 |
·病料与细胞 | 第22页 |
·菌种与质粒 | 第22页 |
·抗原与血清 | 第22页 |
·引物的设计与合成 | 第22-23页 |
·酶及生化试剂 | 第23页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳所用的主要试剂 | 第23-24页 |
·蛋白质印迹所用的主要试剂 | 第24页 |
·主要实验仪器设备 | 第24-25页 |
3 方法 | 第25-33页 |
·J亚群禽白血病JL-2株病毒的分离鉴定 | 第25-26页 |
·流行病学及症状调查 | 第25页 |
·ALV-J的RT-PCR检测 | 第25-26页 |
·ALV-J的 PCR检测 | 第26页 |
·动物实验 | 第26页 |
·JL-2株病毒囊膜基因gp85的克隆与序列分析 | 第26-29页 |
·病毒的培养与增殖 | 第26页 |
·提取前病毒DNA | 第26页 |
·PCR反应扩增目的基因片断 | 第26-27页 |
·PCR产物电泳检测 | 第27页 |
·PCR产物的胶回收 | 第27页 |
·PCR产物酶切鉴定 | 第27页 |
·构建重组质粒pMD18-T-JL-2/env | 第27-29页 |
·序列测定与结果分析 | 第29页 |
·J亚群禽白血病JL-2株gp85基因的原核表达 | 第29-33页 |
·病毒培养及病毒cDNA 的提取 | 第29页 |
·目的片段的扩增 | 第29页 |
·PCR产物电泳检测及回收 | 第29页 |
·gp85基因原核表达载体PGEX-6P-1/gp85的构建 | 第29-30页 |
·目的基因在大肠杆菌中的表达 | 第30-31页 |
·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第31页 |
·融合蛋白表达效率分析 | 第31页 |
·表达产物的Western-blot检测 | 第31-33页 |
4 结果 | 第33-41页 |
·J亚群禽白血病JL-2株的分离与鉴定结果 | 第33-34页 |
·流行病学和症状 | 第33页 |
·RT-PCR与PCR鉴定结果 | 第33页 |
·动物实验结果 | 第33-34页 |
·JL-2株病毒gp85基因的克隆与序列测定 | 第34-38页 |
·PCR产物扩增结果鉴定 | 第34页 |
·PCR产物酶切鉴定 | 第34页 |
·重组质粒PMD18-T-JL-2/env酶切鉴定结果 | 第34-35页 |
·测序结果及序列分析 | 第35-38页 |
·ALV-J JL-2株病毒gp85基因的原核表达 | 第38-41页 |
·gp85基因PCR扩增结果 | 第38页 |
·表达载体PGEX-6P-1/gp85的鉴定 | 第38页 |
·融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第38-39页 |
·融合蛋白Western-blot检测结果 | 第39-41页 |
5 讨论 | 第41-44页 |
6 结论 | 第44-45页 |
参 考 文 献 | 第45-52页 |
附 录 | 第52-58页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |