组织工程人工角膜胶原支架材料的制备及其性能研究
第一章 绪论 | 第1-18页 |
1 组织工程人工角膜的研究 | 第9-14页 |
1.1 组织工程人工角膜的重建 | 第10-11页 |
1.1.1 角膜细胞的分离及培养 | 第10-11页 |
1.1.2 角膜的重建 | 第11页 |
1.2 组织工程人工角膜与天然角膜的比较 | 第11-12页 |
1.3 重建角膜的应用 | 第12-14页 |
1.3.1 在实验方面的应用 | 第12-13页 |
1.3.2 临床应用 | 第13-14页 |
2 组织工程支架材料的研究 | 第14-16页 |
3 研究方案 | 第16-17页 |
4 研究意义 | 第17-18页 |
第二章 实验部分 | 第18-29页 |
1 主要试剂 | 第18页 |
2 主要仪器、设备 | 第18-19页 |
3 实验内容 | 第19-29页 |
3.1 胶原的提取 | 第19-20页 |
3.2 胶原的鉴定 | 第20-21页 |
3.2.1 磷酸缓冲盐检测 | 第20页 |
3.2.2 紫外分光光度计分析 | 第20页 |
3.2.3 红外光谱分析 | 第20页 |
3.2.4 氨基酸组成分析 | 第20-21页 |
3.3 胶原海绵的冻干 | 第21页 |
3.4 胶原的交联 | 第21-22页 |
3.4.1 化学方法:EDC交联法 | 第21-22页 |
3.4.2 物理方法:DHT交联法 | 第22页 |
3.4.3 物理/化学方法:DHT/EDC交联法 | 第22页 |
3.5 胶原海绵的电镜观察 | 第22-23页 |
3.6 胶原海绵物理性能的测定 | 第23页 |
3.6.1 厚度测量 | 第23页 |
3.6.2 强度测试 | 第23页 |
3.6.3 吸液性测试 | 第23页 |
3.6.4 孔隙率测定 | 第23页 |
3.7 降解实验 | 第23-24页 |
3.7.1 降解速率的测定 | 第23-24页 |
3.7.2 pH值的变化 | 第24页 |
3.8 生物学评价试验 | 第24-27页 |
3.8.1 皮肤刺激试验 | 第24-25页 |
3.8.2 皮内刺激试验 | 第25-26页 |
3.8.3 热原试验 | 第26-27页 |
3.8.4 全身急性毒性试验 | 第27页 |
3.9 细胞培养 | 第27-29页 |
3.9.1 细胞培养液的制备 | 第27页 |
3.9.2 上皮细胞的分离 | 第27-28页 |
3.9.3 上皮细胞在材料上的培养 | 第28页 |
3.9.4 细胞培养后的材料扫描样品的制备 | 第28-29页 |
第三章 结果与讨论 | 第29-50页 |
1 胶原的提取 | 第29-30页 |
1.1 提取原料的选择 | 第29页 |
1.2 胶原纯度的提高 | 第29页 |
1.3 提高胶原提取率的因素 | 第29-30页 |
1.4 各种提取体系提取效果的比较 | 第30页 |
2 胶原的鉴定 | 第30-33页 |
2.1 磷酸缓冲盐溶解检测 | 第30-31页 |
2.2 紫外分光光度计分析 | 第31页 |
2.3 红外光谱分析 | 第31-32页 |
2.4 胶原蛋白的氨基酸分析 | 第32-33页 |
2.4.1 胶原的氨基酸组成 | 第32页 |
2.4.2 羟脯氨酸的测定 | 第32-33页 |
3 胶原海绵的电镜观察 | 第33-34页 |
4 胶原海绵的交联 | 第34-42页 |
4.1 EDC交联法 | 第34-38页 |
4.1.1 反应机理 | 第34-35页 |
4.1.2 反应条件的选择 | 第35-36页 |
4.1.3 反应时间对胶原强度的影响 | 第36-37页 |
4.1.4 EDC交联胶原的红外谱图分析 | 第37-38页 |
4.2 DHT交联法 | 第38-41页 |
4.2.1 反应机理 | 第38-39页 |
4.2.2 DHT交联法对胶原性能的影响 | 第39-41页 |
4.2.3 DHT交联胶原的红外谱图分析 | 第41页 |
4.3 DHT/EDC交联法 | 第41-42页 |
5 吸液性测试 | 第42页 |
6 孔隙率测定 | 第42-43页 |
7 降解实验 | 第43-46页 |
7.1 降解失重百分率 | 第43-45页 |
7.2 降解过程pH值的变化情况 | 第45页 |
7.3 降解后的胶原的电镜观察 | 第45-46页 |
8 生物相容性实验 | 第46-47页 |
8.1 皮肤刺激试验 | 第46页 |
8.2 皮内刺激试验 | 第46-47页 |
8.3 热源试验 | 第47页 |
8.4 全身急性毒性试验 | 第47页 |
9 角膜细胞培养 | 第47-50页 |
第四章 结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |