中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-26页 |
·植物核质转运及转运蛋白的底物筛选 | 第9-24页 |
·蛋白质的核质转运 | 第10-12页 |
·植物核质转运蛋白 | 第12-20页 |
·植物RNA结合蛋白 | 第20-23页 |
·酵母双杂交系统及TRN1相关底物蛋白的筛选 | 第23-24页 |
·论文目的与意义 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-42页 |
·实验材料 | 第26-31页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌株和质粒 | 第26页 |
·菌株和质粒说明 | 第26-30页 |
·酶和试剂 | 第30页 |
·培养基 | 第30-31页 |
·所用引物列表 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-42页 |
·大肠杆菌热击感受态细胞的制备和转化 | 第31-32页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第32-33页 |
·酵母质粒的提取 | 第33页 |
·Trizol法提取RNA | 第33-34页 |
·去除基因组DNA | 第34页 |
·反转录 | 第34页 |
·PCR扩增及基因片段的回收 | 第34-35页 |
·酵母双杂交载体的构建 | 第35页 |
·酵母感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第35-36页 |
·BD SMART技术构建特定组织的cDNA文库 | 第36-37页 |
·mating法筛选拟南芥cDNA的酵母文库 | 第37-40页 |
·对BLAST比对所得的基因通过酵母双杂交实验验证 | 第40-42页 |
第三章 实验结果 | 第42-54页 |
·相关诱饵质粒的构建 | 第42-44页 |
·拟南芥cDNA酵母双杂文库的构建及质量鉴定 | 第44-45页 |
·文库筛选及阳性克隆的分析 | 第45-50页 |
·TRN1-FL和TRN1-344与三个底物及所筛选基因之间互作的验证 | 第50-54页 |
第四章 讨论 | 第54-59页 |
·核质转运对机体具有重要意义 | 第54页 |
·TRN1可能参与到各种生物学途径当中 | 第54-55页 |
·TRN1和TRN1-344具有不同的筛选底物 | 第55-56页 |
·TRN1-344和GRP7/8及RNP1之间是否的确存在相互作用 | 第56-57页 |
·TRN1和TRN1-344与其他候选底物蛋白之间相互作用的验证 | 第57页 |
·TRN1是否具有除了核质转运之外其他的功能 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63-64页 |