| 摘要 | 第1-6页 |
| SUMMARY | 第6-7页 |
| 英文缩略词 | 第7-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 弓形虫表面抗原1(SAG1)的研究进展 | 第12-22页 |
| 1 SAG1(P30)基因和蛋白结构 | 第12-13页 |
| 2 SAG1(P30)与弓形虫侵入细胞的关系 | 第13-14页 |
| 3 SAG1(P30)蛋白诱导的免疫作用 | 第14-15页 |
| 4 SAG1(P30)在弓形虫病诊断方面的应用 | 第15-16页 |
| 5 SAG1(P30)在弓形虫疫苗研制中的应用 | 第16-20页 |
| 6 结语 | 第20-22页 |
| 第二章 弓形虫GJS 株表面蛋白1（SAG1）基因的克隆、表达 | 第22-39页 |
| 1 实验材料 | 第22-23页 |
| ·弓形虫GJS 株速殖子 | 第22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·质粒和菌株 | 第22页 |
| ·主要实验试剂 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-32页 |
| ·弓形虫基因组 DNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·目的基因 SAG1 的扩增 | 第24-25页 |
| ·克隆载体的构建 | 第25-28页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
| ·表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第30页 |
| ·表达产物的SDS－PAGE 电泳检测 | 第30-32页 |
| 3 结果 | 第32-37页 |
| ·目的片断的扩增 | 第32页 |
| ·pMD-SAG1 重组质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的测序鉴定及序列分析 | 第33-35页 |
| ·物理化学特性分析 | 第35页 |
| ·弓形虫SAG1 蛋白分子的结构预测 | 第35-36页 |
| ·pET-SAG1 重组质粒的鉴定 | 第36页 |
| ·SAG1 基因表达产物SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 重组蛋白的纯化及功能分析 | 第39-47页 |
| 1 材料 | 第39页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·主要实验试剂 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-43页 |
| ·SAG1 基因的大量表达 | 第39-40页 |
| ·包涵体的提取 | 第40页 |
| ·包涵体的纯化 | 第40页 |
| ·重组蛋白rSAG1 的Western Blot 鉴定 | 第40-41页 |
| ·动物试验及攻击感染 | 第41-42页 |
| ·ELISA 检测抗融合蛋白血清 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-45页 |
| ·表达产物的定性分析 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白包涵体的纯化 | 第44页 |
| ·重组蛋白rSAG1 抗原性分析 | 第44-45页 |
| ·弓形虫GJS 株速殖子攻击感染后免疫小鼠存活时间 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 弓形虫GJS 株表面抗原1 基因的真核表达质粒的构建 | 第47-52页 |
| 1 材料 | 第47页 |
| ·弓形虫GJS 株速殖子 | 第47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·质粒和菌株 | 第47页 |
| ·酶和试剂 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-49页 |
| ·弓形虫基因组DNA 的提取 | 第47页 |
| ·引物设计 | 第47-48页 |
| ·目的片段的扩增 | 第48页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第48页 |
| ·目的片段与pCDNA3.1 载体的酶切回收 | 第48页 |
| ·目的片段与表达载体的连接转化 | 第48页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第48页 |
| ·序列测定 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-50页 |
| ·SAG1 基因获得结果 | 第49页 |
| ·pcDNA3.1- SAG1 重组质粒的PCR 及酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·pcDNA3.1- SAG1 重组质粒的测序结果及分析 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 研究结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
