| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词表 | 第8-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 文献综述微线体蛋白3 的研究进展 | 第14-23页 |
| 1. 微线体蛋白的产生与种类 | 第15-16页 |
| 2. 微线体蛋白的作用机制 | 第16-17页 |
| 3. 微线体蛋白3 的结构与功能 | 第17-18页 |
| 4. 微线体蛋白3 与虫体入侵宿主细胞的关系 | 第18-20页 |
| 5. 微线体蛋白3 与虫体毒力的关系 | 第20-21页 |
| 6. 微线体蛋白3 诱导的虫体免疫作用 | 第21-22页 |
| 7. 小结 | 第22-23页 |
| 实验部分 | 第23-53页 |
| 第一章 弓形虫GJS 株微线体蛋白3 基因真核表达质粒的构建及表达 | 第23-52页 |
| 1 实验材料 | 第23-24页 |
| ·虫株与细胞 | 第23-24页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·载体与菌株 | 第24页 |
| ·酶和试剂 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-40页 |
| ·弓形虫基因组 DNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第25-26页 |
| ·目的基因 MIC3 的扩增 | 第26页 |
| ·克隆载体的构建 | 第26-30页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第26-27页 |
| ·克隆载体的连接 | 第27页 |
| ·连接产物的转化 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第28-30页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第28-29页 |
| ·PCR 扩增鉴定 | 第29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的测序 | 第30页 |
| ·目的片段的序列分析及结构预测 | 第30页 |
| ·表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·目的片段与pcDNA3.1(+)载体的酶切回收 | 第30-31页 |
| ·目的片段与载体的连接转化 | 第31页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·pcDNA3-MIC3 在BHK 细胞中的表达 | 第32-38页 |
| ·细胞的培养 | 第32-33页 |
| ·细胞复苏 | 第32页 |
| ·细胞传代 | 第32-33页 |
| ·G418 抗性浓度测定 | 第33页 |
| ·重组质粒pcDNA3-MIC3 提取﹑纯化 | 第33-34页 |
| ·重组质粒浓度和纯度的测定 | 第34页 |
| ·重组质粒转染BHK 细胞 | 第34-35页 |
| ·表达产物的检测 | 第35-38页 |
| ·转染细胞在荧光显微镜下观察 | 第35页 |
| ·SDS－PAGE 电泳 | 第35-37页 |
| ·Western-blot 分析 | 第37-38页 |
| ·pcDNA3-MIC3 重组质粒免疫效果观察 | 第38-40页 |
| ·弓形虫代谢分泌抗原（ESA）的制备 | 第38页 |
| ·动物免疫实验 | 第38-39页 |
| ·ELISA 检测抗融合蛋白血清 | 第39-40页 |
| 3. 结果 | 第40-47页 |
| ·MIC3 基因的扩增 | 第40页 |
| ·pMD18-T-MIC3 质粒的构建和鉴定 | 第40-44页 |
| ·酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的测序鉴定及序列分析 | 第41-43页 |
| ·MIC3 基因及其编码蛋白的结构预测 | 第43页 |
| ·理学特性分析 | 第43-44页 |
| ·pcDNA3-MIC3 真核表达质粒的构建和鉴定 | 第44页 |
| ·pcDNA3-MIC3 在BHK-21 细胞内的表达 | 第44-45页 |
| ·表达产物的Western blot 检测 | 第45-46页 |
| ·pcDNA3-MIC3 重组质粒免疫效果 | 第46-47页 |
| ·免疫小鼠血清抗体检测 | 第46页 |
| ·免疫小鼠保护性试验结果 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-52页 |
| 第二章 研究结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
