| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-6页 |
| 英文缩略词 | 第6-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 双启动子载体pBudCE4.1-U6 的构建 | 第12-27页 |
| 1 材料与方法 | 第13-22页 |
| ·材料 | 第13-14页 |
| ·病毒、菌株与质粒 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13页 |
| ·主要仪器与设备 | 第13-14页 |
| ·方法 | 第14-22页 |
| ·U6 启动子基因的获得 | 第14-17页 |
| ·双表达载体pBudCE4.1-U6 载体的构建 | 第17-18页 |
| ·U6 启动子启动效果的鉴定 | 第18-20页 |
| ·检测启动子 EF-1α的效率是否受影响? | 第20-22页 |
| 2 结果 | 第22-26页 |
| ·U6 启动子、EGFP 基因的扩增 | 第22页 |
| ·载体pBudCE4.1-U6 的PCR 鉴定、双酶切鉴定 | 第22-23页 |
| ·载体序列的测定 | 第23页 |
| ·载体pBudCE4.1-U6 中 U6 启动子效率鉴定 | 第23-24页 |
| ·EF-1α的功效变化 | 第24-26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| 第二章 以改造载体为基础之Asia I 型FMDV 双功能疫苗质粒的构建 | 第27-38页 |
| 1 材料与方法 | 第28-33页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·双功能疫苗质粒的构建 | 第28-32页 |
| ·人工合成基因 | 第28页 |
| ·目的基因的获得 | 第28-31页 |
| ·免疫基因与载体的连接 | 第31-32页 |
| ·双功能疫苗质粒pBudCE4.1-U6-RNAi-P12A3C | 第32-33页 |
| ·病毒抑制试验 | 第32页 |
| ·间接免疫荧光检测免疫基因的表达 | 第32-33页 |
| 2 结果 | 第33-36页 |
| ·免疫基因的获得 | 第33页 |
| ·重组质粒pBudCE4.1-RNAi-P12A3C / / 酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·间接免疫荧光检测免疫基因的表达 | 第34-35页 |
| ·病毒抑制实验检测 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 第三章 文献综述 | 第39-58页 |
| 1 RNAi 研究进展 | 第39-42页 |
| ·RNAi 的定义 | 第39-40页 |
| ·RNA 干扰的作用机制 | 第40页 |
| ·RNA 干扰现象的特征 | 第40-41页 |
| ·RNA 干扰的应用 | 第41-42页 |
| 2 绿色荧光蛋白研究进展 | 第42-47页 |
| ·GFP 基础理论研究进展 | 第42-44页 |
| ·发展历史 | 第42页 |
| ·GFP 结构 | 第42-43页 |
| ·GFP 发光特性及机制 | 第43页 |
| ·GFP 生化特性 | 第43页 |
| ·GFP 的改进 | 第43-44页 |
| ·GFP 应用研究进展 | 第44-47页 |
| ·GFP 的优点 | 第44-45页 |
| ·GFP 应用现状 | 第45-47页 |
| ·GFP 基因存在的问题与展望 | 第47页 |
| 3 FMDV 分子生物学特性研究 | 第47-55页 |
| ·FMDV 基因组结构特点 | 第47-48页 |
| ·FMDV 5'非翻译区 | 第48-51页 |
| ·蛋白质帽状结构(cap) | 第48-49页 |
| ·FMDV S 片段、poly (C)区、假结(PKs)和顺式复制元件(cre) | 第49-50页 |
| ·FMDV 内部核糖体进入位点(IRES) | 第50-51页 |
| ·FMDV L 区 | 第51页 |
| ·FMDV 结构蛋白和非结构蛋白 | 第51-55页 |
| ·FMDV 结构蛋白 | 第51-52页 |
| ·FMDV 非结构蛋白 | 第52-55页 |
| ·FMDV 5'非翻译区 | 第55页 |
| 4 口蹄疫病疫苗研究进展 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 导师简历 | 第65页 |