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捻转血矛线虫H15 ES抗原基因的原核表达及重组蛋白间接ELISA方法的建立

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
1 引言第13-21页
   ·捻转血矛线虫病的流行状况第13-14页
   ·捻转血矛线虫抗原的研究进展第14-17页
   ·捻转血矛线虫ES 抗原的研究进展第17-19页
     ·捻转血矛线虫ES 抗原的功能第17页
     ·捻转血矛线虫ES 抗原的研究第17-19页
   ·捻转血矛线虫检测方法的研究进展第19页
   ·捻转血矛线虫疫苗的研究进展第19页
   ·本研究的目的和意义第19-21页
2 材料和方法第21-35页
   ·材料第21-25页
     ·实验动物第21页
     ·工具酶与试剂第21页
     ·实验所用主要溶液第21-24页
     ·菌种与质粒第24页
     ·引物第24页
     ·主要实验仪器与设备第24-25页
   ·方法第25-35页
     ·H15 ES 抗原基因的克隆和鉴定第25-29页
     ·H15 ES 抗原蛋白的生物信息学分析第29页
     ·重组原核表达载体的构建第29-30页
     ·pET-32a-H15 ES 的原核表达第30-33页
     ·兔子免疫第33页
     ·重组蛋白间接 ELISA 方法的建立第33页
     ·H15 ES 间接 ELISA 反应参数的确定第33-35页
3 实验结果第35-47页
   ·H15 ES 抗原基因的RT-PCR 扩增第35页
   ·H15 ES 抗原基因的克隆和鉴定第35-36页
   ·PMD18-T-H15 ES 的测序结果及序列分析第36-38页
   ·H15 ES 抗原蛋白的生物信息学分析第38-41页
     ·H15 ES 抗原蛋白的理化性质第38-39页
     ·H15 ES 抗原蛋白二级结构预测和亲水性分析第39-40页
     ·H15 ES 抗原蛋白的柔韧性及表面可能性分析第40页
     ·H15 ES 抗原蛋白的B 细胞表位预测第40页
     ·H15 ES 抗原亚细胞定位和蛋白质功能分类第40-41页
   ·重组原核表达载体的鉴定第41-42页
   ·H15 ES 抗原基因的原核表达第42-44页
     ·诱导表达蛋白的SDS-PAGE 分析第42-43页
     ·纯化的重组蛋白SDS-PAGE 分析及浓度测定第43页
     ·重组蛋白的Western-blot 分析第43-44页
   ·H15 ES 重组蛋白间接ELISA 方法的建立第44-47页
     ·重组蛋白包被浓度和血清稀释度的确定第44-45页
     ·重组蛋白一抗和二抗最适作用时间的确定第45-46页
     ·重组蛋白间接ELISA 阴阳性临界值的确定第46-47页
4 讨论第47-51页
   ·捻转血矛线虫H15 ES 抗原基因的克隆及序列分析第47页
   ·捻转血矛线虫H15 ES 抗原基因的生物信息学分析第47-48页
   ·重组原核表达载体的构建第48-49页
   ·捻转血矛线虫H15 ES 抗原基因的原核表达第49-50页
   ·间接 ELISA 包被抗原的浓度和阴阳血清稀释度的选择第50-51页
5 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-59页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第59页

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