| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一部分 预知子提取物对人HepG2肝癌细胞黏附、迁移和侵袭能力的影响 | 第15-30页 |
| 1.材料和方法 | 第15-22页 |
| 1.1 材料 | 第15-16页 |
| 1.1.1 主要仪器、设备 | 第15页 |
| 1.1.2 实验耗材 | 第15-16页 |
| 1.1.3 实验药品与试剂 | 第16页 |
| 1.2 方法 | 第16-22页 |
| 1.2.1 细胞增殖和活性检测(MTT) | 第16-19页 |
| 1.2.2 细胞-基质黏附实验(Cell-Matrigel Adhesion Assay) | 第19-20页 |
| 1.2.3 划痕实验(Wounded Healing Assay) | 第20-21页 |
| 1.2.4 侵袭实验(Matrigel Invasion Assay) | 第21-22页 |
| 1.2.5 统计方法 | 第22页 |
| 2.结果 | 第22-27页 |
| 2.1 对人HepG2肝癌细胞形态的影响(光镜) | 第22-24页 |
| 2.1.1 不同浓度预知子提取物(ATKSE)对人HepG2 肝癌细胞形态的影响(72h) | 第23页 |
| 2.1.2 不同浓度Cilengitide对人HepG2 肝癌细胞形态的影响(72h) | 第23-24页 |
| 2.2 对人HepG2肝癌细胞增殖的影响 | 第24-25页 |
| 2.2.1 ATKSE对人HepG2 肝癌细胞增殖的抑制作用 | 第24页 |
| 2.2.2 Cilengitide对人HepG2 肝癌细胞增殖的抑制作用 | 第24-25页 |
| 2.3 对人HepG2肝癌细胞-基质黏附能力的影响(24h) | 第25-26页 |
| 2.4 对人HepG2肝癌细胞迁移能力的影响(24h) | 第26页 |
| 2.5 对人HepG2肝癌细胞侵袭能力的影响(48h) | 第26-27页 |
| 3.讨论 | 第27-30页 |
| 第二部分 预知子提取物对人HepG2肝癌细胞表面超微结构的影响 | 第30-33页 |
| 1.材料和方法 | 第30-31页 |
| 1.1 材料 | 第30页 |
| 1.1.1 主要仪器、设备 | 第30页 |
| 1.1.2 实验耗材 | 第30页 |
| 1.1.3 实验药品与试剂 | 第30页 |
| 1.2 方法 | 第30-31页 |
| 1.2.1 细胞铺板 | 第30-31页 |
| 1.2.2 细胞给药 | 第31页 |
| 1.2.3 扫描电镜标本处理和读片 | 第31页 |
| 2.结果 | 第31-32页 |
| 3.讨论 | 第32-33页 |
| 第三部分 预知子提取物对人HepG2肝癌细胞Integrin/Focal Adhesion通路相关分子和基质金属蛋白酶表达的影响 | 第33-43页 |
| 1.材料和方法 | 第33-39页 |
| 1.1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1.1 主要仪器、设备 | 第33页 |
| 1.1.2 实验耗材 | 第33页 |
| 1.1.3 实验药品与试剂 | 第33-34页 |
| 1.2 方法 | 第34-39页 |
| 1.2.1 细胞铺板 | 第34-35页 |
| 1.2.2 细胞给药 | 第35页 |
| 1.2.3 收获蛋白及蛋白样品制备 | 第35-36页 |
| 1.2.4 常用缓冲液配制 | 第36页 |
| 1.2.5 灌胶 | 第36-37页 |
| 1.2.6 电泳 | 第37页 |
| 1.2.7 转膜 | 第37-38页 |
| 1.2.8 封闭 | 第38页 |
| 1.2.9 抗原抗体反应 | 第38页 |
| 1.2.10 显色反应(ECL)曝光 | 第38页 |
| 1.2.11 统计方法 | 第38-39页 |
| 2.结果 | 第39-41页 |
| 2.1 对相关Integrins分子表达的影响 | 第39页 |
| 2.2 对FAK及其磷酸化蛋白表达的影响 | 第39页 |
| 2.3 对通路上其他相关分子如ERK1/2等表达的影响 | 第39页 |
| 2.4 对黏附分子E-cad和 N-cad表达的影响 | 第39页 |
| 2.5 对基质金属蛋白酶MMP2和MMP9 表达的影响 | 第39-41页 |
| 3.讨论 | 第41-43页 |
| 第四部分 FAK抑制在预知子提取物影响人HepG2 肝癌细胞迁移和侵袭能力中的作用 | 第43-50页 |
| 1.材料和方法 | 第43-47页 |
| 1.1 材料 | 第43页 |
| 1.1.1 主要仪器、设备 | 第43页 |
| 1.1.2 实验耗材 | 第43页 |
| 1.1.3 实验药品与试剂 | 第43页 |
| 1.2 方法 | 第43-47页 |
| 1.2.1 FAK抑制剂对人HepG2 肝癌细胞增殖能力的影响(MTT) | 第43-44页 |
| 1.2.2 FAK抑制剂对人HepG2 肝癌细胞FAK及其磷酸化蛋白表达的影响(WB) | 第44-45页 |
| 1.2.3 FAK抑制在预知子提取物影响人HepG2肝癌细胞迁移能力中的作用 | 第45页 |
| 1.2.4 FAK抑制在预知子提取物影响人HepG2 肝癌细胞侵袭能力中的作用(侵袭实验) | 第45-46页 |
| 1.2.5 统计学方法 | 第46-47页 |
| 2.结果 | 第47-48页 |
| 2.1 FAK抑制剂对人HepG2肝癌细胞增殖能力的影响 | 第47页 |
| 2.2 FAK抑制剂对人HepG2 肝癌细胞FAK及其磷酸化蛋白表达的影响 | 第47页 |
| 2.3 FAK抑制在预知子提取物影响人HepG2 肝癌细胞迁移能力中的作用 | 第47页 |
| 2.4 FAK抑制在预知子提取物影响人HepG2肝癌细胞侵袭能力中的作用 | 第47-48页 |
| 3.讨论 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录一 文献综述 中医药抑制肝癌侵袭转移的分子机制及其研究进展 | 第56-66页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录二 攻读硕士期间发表文章情况 | 第66-67页 |
| 附录三 已发表论文 | 第67-76页 |
