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拟南芥RNAi文库的构建及其突变体库的初步创制

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 绪论第11-31页
   ·文献综述第11-27页
     ·RNAi 的发现第11-12页
     ·RNAi 的组分第12-14页
     ·RNA 沉默的机理第14-17页
     ·RNAi 能够保持基因组的完整和它的防御作用第17页
     ·siRNA 生成途径的差异第17-18页
     ·small RNA 对染色体DNA 的影响第18-19页
     ·RNAi 的应用第19-20页
     ·RNAi 文库研究进展第20-27页
   ·研究背景、目的和意义第27-29页
   ·试验设计第29-31页
第二章 拟南芥RNAi 文库的构建第31-53页
   ·试验材料第31页
   ·试验方法第31-34页
     ·大肠杆菌电击感受态细胞的制备及转化第31页
     ·酶连体系的转化第31页
     ·碱裂解法提取质粒DNA第31-32页
     ·cDNA 文库的酶切消化处理第32页
     ·cDNA 片段克隆到中间载体第32-33页
     ·DNA 片段连接成单链环状DNA第33页
     ·单链环状DNA 经Phi29 DNA 聚合酶扩增第33-34页
     ·植物RNAi 表达载体的构建第34页
     ·拟南芥RNAi 文库的形成第34页
     ·拟南芥质粒型cDNA 文库的获得第34页
   ·结果与分析第34-50页
     ·拟南芥cDNA 文库的鉴定分析第34-35页
     ·拟南芥cDNA 文库片段化第35-37页
     ·cDNA 片段克隆到中间载体第37-39页
     ·cDNA 片段连接形成单链环状DNA第39-40页
     ·单链环状DNA 的滚环扩增第40-43页
     ·拟南芥RNAi 表达文库的形成第43-50页
   ·讨论第50-53页
第三章 拟南芥RNAi 突变体库的初步创制第53-75页
   ·试验材料第53页
   ·试验方法第53-56页
     ·农杆菌电击感受态细胞的制备第53页
     ·拟南芥大规模遗传转化,筛选和鉴定第53-54页
     ·植物基因组DNA 提取第54-55页
     ·植物材料总RNA 的提取第55页
     ·反转录第55页
     ·Northern blotting第55页
     ·转基因植株的GUS 染色第55-56页
   ·结果与分析第56-73页
     ·农杆菌的鉴定第56页
     ·转基因拟南芥的潮霉素筛选第56-57页
     ·部分转基因拟南芥表型分析第57-61页
     ·转基因拟南芥的鉴定和靶基因分析第61-65页
     ·RNAi 对基因家族靶基因表达的影响第65-68页
     ·RNAi 对功能不同的靶基因表达的影响第68-73页
   ·讨论第73-75页
第四章 全文结论与工作创新点第75-77页
   ·主要结论第75页
   ·工作创新点及研究意义第75-77页
参考文献第77-84页
致谢第84-85页
作者简历第85页

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