| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-30页 |
| ·中生菌素研究进展 | 第16-21页 |
| ·中生菌素简介 | 第16-17页 |
| ·中生菌素的作用机制 | 第17页 |
| ·中生菌素菌种选育 | 第17-18页 |
| ·中生菌素发酵条件的优化 | 第18-19页 |
| ·生菌素剂型的研究 | 第19-20页 |
| ·中生菌素安全性评价 | 第20页 |
| ·中生菌素生物合成基因研究进展 | 第20-21页 |
| ·链丝菌素类抗生素的研究进展 | 第21-29页 |
| ·链丝菌素类抗生素简介 | 第21页 |
| ·链丝菌素生物合成研究进展 | 第21-26页 |
| ·链丝菌素生物合成基因的研究进展 | 第26-29页 |
| ·立题的依据和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 中生菌素产生菌基因组粘粒文库的构建 | 第30-46页 |
| ·材料、仪器和试剂 | 第30-33页 |
| ·菌株及质粒 | 第30页 |
| ·培养基及试剂 | 第30-33页 |
| ·主要设备及耗材 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-41页 |
| ·淡紫灰链霉菌海南变种B-7 菌株菌体培养与收集 | 第33-34页 |
| ·链霉菌基因组DNA 提取 | 第34页 |
| ·基因组DNA 的脉冲场凝胶电泳分析 | 第34页 |
| ·链霉菌基因组DNA 的部分酶切消化及回收 | 第34-35页 |
| ·基因组酶切片段的去磷酸化处理 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA 小量提取（碱裂解法） | 第36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的CaC12 法制备与转化 | 第36-37页 |
| ·粘粒载体的扩增及酶切处理 | 第37-39页 |
| ·处理后的基因组片段及粘粒pOJ446 片段的连接与包装 | 第39页 |
| ·宿主细胞的活化、制备及保存 | 第39-40页 |
| ·测定粘粒包装反应物的效价 | 第40页 |
| ·文库阳性率检测 | 第40页 |
| ·文库的独立保存 | 第40页 |
| ·粘粒文库的扩增与混合保存 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-45页 |
| ·文库构建过程 | 第41-44页 |
| ·文库质量的检测 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 基于PCR 的中生菌素生物合成基因簇筛选 | 第46-53页 |
| ·材料、仪器和试剂 | 第46-47页 |
| ·菌株及质粒 | 第46页 |
| ·用于PCR 筛选的引物 | 第46-47页 |
| ·培养基及试剂 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·zpsA 基因片段的扩增及验证 | 第47-48页 |
| ·混合文库中zpsA 基因丰度的确定 | 第48页 |
| ·基于PCR 的中生菌素生物合成基因的筛选 | 第48页 |
| ·其它实验操作方法 | 第48-49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-51页 |
| ·zpsA 基因片段的扩增及验证 | 第49页 |
| ·混合文库中zpsA 基因丰度的确定 | 第49页 |
| ·基于PCR 的中生菌素生物合成基因的筛选. | 第49-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 中生菌素生物合成基因簇序列和生物信息学分析 | 第53-89页 |
| ·材料、仪器和试剂. | 第53-54页 |
| ·菌株及质粒 | 第53页 |
| ·培养基及试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·Cosmid68 中插入片段的亚克隆测序及拼接 | 第54-56页 |
| ·插入片段序列的生物信息学分析以及使用的数据库 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-88页 |
| ·Cosmid68 中插入片段的测序. | 第56页 |
| ·插入片段DNA 序列的分析 | 第56-88页 |
| ·本章小结 | 第88-89页 |
| 第五章 全文结论 | 第89-92页 |
| ·结论 | 第89-90页 |
| ·创新点 | 第90页 |
| ·展望 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 作者简历 | 第104页 |