| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-41页 |
| ·核糖体参与的蛋白质合成过程 | 第12-23页 |
| ·核糖体结构 | 第12-18页 |
| ·蛋白质合成过程 | 第18-23页 |
| ·起始 (Initiation) | 第18-19页 |
| ·延伸 (Elongation) | 第19-22页 |
| ·终止 (Termination) | 第22-23页 |
| ·参与翻译过程的GTP酶 | 第23-33页 |
| ·起始因子IF212 | 第23-25页 |
| ·延伸因子EF-Tu | 第25-27页 |
| ·延伸因子EF-G | 第27-29页 |
| ·延伸因子LepA/EF418 | 第29-31页 |
| ·解离因子RF320 | 第31-33页 |
| ·核糖体蛋白翻译因子结合区域 | 第33-36页 |
| ·翻译因子结合区域的结构组成 | 第33-36页 |
| ·翻译因子结合区域的柔性 | 第36页 |
| ·L11蛋白参与的翻译调控 | 第36-40页 |
| ·L11-NTD在核糖体上的运动 | 第36-38页 |
| ·分子开关L1127 | 第38-40页 |
| ·本课题的研究内容和意义 | 第40-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-66页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·基因克隆 | 第41-52页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第41-44页 |
| ·表达质粒的构建 | 第44-45页 |
| ·构建点突变载体 | 第45-46页 |
| ·蛋白的表达纯化 | 第46-51页 |
| ·LepA蛋白的表达纯化 | 第46-48页 |
| ·L11蛋白的表达纯化 | 第48-50页 |
| ·其他翻译因子的表达纯化 | 第50-51页 |
| ·蛋白性质分析 | 第51-52页 |
| ·RNA相关的实验操作 | 第52-57页 |
| ·体外T7聚合酶体系制备mRNA | 第52-54页 |
| ·T7聚合酶转录体系 | 第52页 |
| ·反应体系中DNA模板的去除 | 第52页 |
| ·柱纯化去除核苷酸 | 第52-53页 |
| ·RNA样品的定量 | 第53页 |
| ·PAGE检测纯化后的RNA样品 | 第53-54页 |
| ·tRNA操作 | 第54-57页 |
| ·小量分析tRNA氨基酸接受臂的活性效率 | 第54页 |
| ·分析氨酰-tRNA去氨酰反应条件 | 第54页 |
| ·大量制备氨酰-tRNA和乙酰化修饰 | 第54-55页 |
| ·去氨酰化去除N-acetyl-aminoacyl-tRNA中的氨酰tRNA成份 | 第55-56页 |
| ·反相HPLC纯化氨酰-tRNA和去氨酰tRNA | 第56-57页 |
| ·核糖体的大量制备 | 第57-61页 |
| ·大规模菌的制备 | 第57页 |
| ·70S核糖体的分离 | 第57-59页 |
| ·制备粗70S核糖体 | 第58页 |
| ·核糖体的解聚制备30S和50S | 第58-59页 |
| ·重新聚合得到纯化后的70S | 第59页 |
| ·PRE,POST态核糖体复合物的制备 | 第59页 |
| ·缺失L11蛋白核糖体的制备 | 第59-60页 |
| ·缺失L11蛋白核糖体的重构 | 第60-61页 |
| ·缺失L11的核糖体的重构过程 | 第60页 |
| ·重构后核糖体L11的western blot检测 | 第60-61页 |
| ·核糖体活性检测实验方法 | 第61-62页 |
| ·GTPase酶活检测 | 第61-62页 |
| ·以Poly U为模板合成Poly Phe | 第62页 |
| ·蛋白-蛋白相互作用检测 | 第62-64页 |
| ·非特异的化学交联 | 第62-63页 |
| ·NMR | 第63-64页 |
| ·蛋白折叠动力学相关 | 第64-65页 |
| ·GFP的折叠动力学 | 第64页 |
| ·BCAII的复性动力学 | 第64-65页 |
| ·PPIase四肽水解反应 | 第65-66页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第66-89页 |
| ·LepA新的脯氨酰异构酶活性的确定 | 第66-73页 |
| ·LepA可以帮助绿色荧光蛋白折叠 | 第66-70页 |
| ·LepA可以帮助碳酸酐酶复性 | 第70-72页 |
| ·脯氨酰异构酶四肽检测体系 | 第72-73页 |
| ·LepA蛋白上脯氨酰键异构酶活性中心的确定 | 第73-75页 |
| ·LepA蛋白在核糖体上的天然底物 | 第75-84页 |
| ·crosslingking实验 | 第75-79页 |
| ·NMR证实L11蛋白和LepA蛋白之间的相互作用 | 第79-84页 |
| ·L11蛋白的脯氨酰键的异构 | 第84-87页 |
| ·Pro21-22位点的顺反异构对蛋白合成的影响 | 第87-89页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第89-92页 |
| ·PPIase活性是LepA独有的，还是普遍存在的 | 第89-91页 |
| ·GTP酶的PPIase活性参与的调控过程 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 在读期间发表的学术论文与其他研究成果 | 第108-109页 |
