结核杆菌Taqman PCR检测方法的建立及评估
| 前言 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩写词 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-13页 |
| 第2章 综述 结核杆菌的研究进展 | 第13-21页 |
| ·病原学研究 | 第13-14页 |
| ·结核病的发病机制 | 第14-15页 |
| ·结核分支杆菌的防御机制 | 第15-17页 |
| ·活性氮自由基(RNI)的合成 | 第15页 |
| ·吞噬体的成熟终止 | 第15-16页 |
| ·细胞质转移 | 第16页 |
| ·自噬——分枝杆菌感染的免疫反应 | 第16页 |
| ·宿主细胞死亡和分枝杆菌的持续存在 | 第16-17页 |
| ·结核杆菌的诊断技术 | 第17-19页 |
| ·病原学检查 | 第18页 |
| ·血清学检测技术 | 第18-19页 |
| ·分子生物学检测技术—PCR 技术 | 第19页 |
| ·我国流行现状和控制策略 | 第19-20页 |
| ·结束语 | 第20-21页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第21-27页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·实验菌株 | 第21页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第21-22页 |
| ·实验试剂及培养基配制 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·标准品的制备 | 第23页 |
| ·核酸提取验证 | 第23页 |
| ·特异引物及探针的设计 | 第23-24页 |
| ·普通 PCR 反应体系 | 第24页 |
| ·实时荧光 PCR 反应体系 | 第24-25页 |
| ·实时荧光 PCR 反应退火温度优化 | 第25页 |
| ·引物与探针最佳浓度的优化 | 第25页 |
| ·双重实时荧光 PCR 检测方法的建立 | 第25-26页 |
| ·特异性试验 | 第26页 |
| ·敏感性试验 | 第26页 |
| ·临床样品检测试验及数据分析 | 第26-27页 |
| 第4章 实验结果 | 第27-39页 |
| ·实验菌株核酸提取验证 | 第27页 |
| ·特异引物及探针的设计 | 第27-28页 |
| ·普通 PCR 反应体系 | 第28页 |
| ·实时荧光 PCR 反应条件优化 | 第28-29页 |
| ·Taqman PCR 引物与探针浓度的优化 | 第29页 |
| ·实时荧光 PCR 方法建立 | 第29-30页 |
| ·双重实时荧光 PCR 反应体系的建立 | 第30-31页 |
| ·实时荧光 PCR 特异性试验 | 第31-33页 |
| ·实时荧光 PCR 敏感性试验 | 第33-36页 |
| ·结核杆菌复合群检测敏感性试验 | 第33-34页 |
| ·人型结核杆菌检测敏感性试验 | 第34-35页 |
| ·双重实时荧光 PCR 灵敏性的试验 | 第35-36页 |
| ·临床样品检测试验 | 第36-38页 |
| ·检测数据分析 | 第38-39页 |
| 第5章 讨论 | 第39-42页 |
| ·引物与探针的选择 | 第39-40页 |
| ·阳性结果的判断 | 第40页 |
| ·本研究建立方法的建立及优点 | 第40-42页 |
| 第6章 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研的成果 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |