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环境胁迫对长春花TIAs生物合成的调控及相关基因表达分析

摘要第1-5页
Abstract第5-15页
1 绪论第15-30页
   ·植物次生代谢产物第15-16页
   ·长春花萜类吲哚生物碱概述第16-18页
   ·长春花TIAs生物合成途径第18-19页
   ·TIAs生物合成途径中的关键酶及基因第19-22页
     ·色氨酸脱羧酶第20页
     ·香叶醇-10-羟化酶第20-21页
     ·异胡豆苷合成酶第21页
     ·脱乙酰文多灵-4-羟化酶第21页
     ·脱乙酰文多灵-4-O-乙酰转移酶第21-22页
   ·TIAs生物合成诱导和调控第22-26页
     ·光照第22-23页
     ·水分和盐分第23-24页
     ·植物生长调节物质第24-25页
     ·信号分子第25页
     ·生物诱导子第25-26页
   ·结论和展望第26页
   ·半定量RT-PCR技术在基因分析中的利用第26-29页
     ·引物的设计及选择第27页
     ·内参的选择第27页
     ·同管扩增或异管扩增的选择第27-28页
     ·PCR循环数的确定第28页
     ·其他因素第28-29页
   ·本课题研究的目的和意义第29-30页
2 红色滤光膜对长春花无菌苗叶片长春碱含量和相关合成基因表达的影响第30-46页
   ·前言第30页
   ·实验材料、试剂与仪器和实验方法第30-38页
     ·长春花无菌苗的栽培第30-31页
     ·长春花的红色滤光膜的遮光处理第31-32页
     ·长春花叶片中叶绿素含量的测定方法第32页
     ·总RNA的抽提和半定量RT-PCR(SQ-RT-PCR)第32-35页
     ·长春花叶片中生物碱含量测定方法第35-38页
   ·结果与分析第38-43页
     ·红色滤光膜下的波长和辐射能量分析第38页
     ·无菌苗叶片中色素含量的分析第38-39页
     ·无菌苗叶片中相关基因的表达分析第39-41页
     ·生物碱含量分析第41-43页
   ·讨论第43-44页
   ·本章小结第44-46页
3 红色滤光膜对长春花实生苗叶片生物碱含量的影响第46-55页
   ·前言第46页
   ·实验材料、试剂与仪器和实验方法第46-48页
     ·长春花实生苗的栽培第46-47页
     ·长春花实生苗叶片中色素含量的测定方法第47页
     ·总RNA的抽提和半定量RT-PCR第47页
     ·长春花实生苗叶片中生物碱含量测定方法第47-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·红色滤光膜下的波长和辐射能量分析第48页
     ·红色滤光膜对长春花实生苗的色素含量变化的影响第48-50页
     ·红色滤光膜对实生苗叶片中生物碱合成相关基因表达的影响第50-51页
     ·红色滤光膜对实生苗叶片中生物碱含量的影响第51-52页
   ·讨论第52-54页
   ·本章小结第54-55页
4 长春花PEG6000模拟干旱体系的建立第55-64页
   ·前言第55-57页
   ·实验材料,试剂与仪器第57页
     ·长春花培养第57页
     ·主要仪器设备第57页
     ·试剂及药品第57页
   ·实验方法第57-59页
     ·脯氨酸(Proline,Pro)含量测定第57-59页
     ·叶片相对含水量的测定第59页
   ·结果与分析第59-62页
     ·不同浓度PGE处理对长春花叶片中脯氨酸含量的影响第59-60页
     ·PEG渗透胁迫对长春花叶片相对含水量(RWC)的影响第60-61页
     ·PEG6000渗透胁迫下脯氨酸含量和叶片相对含水量的差异分析第61-62页
   ·讨论第62-63页
   ·本章小结第63-64页
5 PEG模拟干旱对长春花叶片生物碱含量、POD酶和相关基因表达的影响第64-75页
   ·前言第64-65页
   ·实验材料和方法第65-68页
     ·植物材料第65页
     ·长春花叶片中过氧化物酶(POD)活性的测定第65-67页
     ·PEG胁迫下长春花叶片中生物碱含量测定方法第67页
     ·总RNA的抽提和半定量RT-PCR第67-68页
   ·结果与分析第68-73页
     ·35%PEG6000模拟干旱对长春花幼苗叶片中POD酶活性影响第68-69页
     ·35%PEG6000模拟干旱对长春花幼苗叶片中3种生物碱含量的影响第69-70页
     ·35%PEG6000模拟干旱对长春花幼苗叶片中重要合成基因(Tdc、Str和Dat)的表达影响第70-73页
   ·讨论第73-74页
   ·本章小结第74-75页
6 PEG胁迫下长春花PME基因的克隆和表达第75-86页
   ·前沿第75-78页
     ·果胶甲基酯酶与细胞壁的关系第75-76页
     ·果胶甲基酯酶调节植物果实的成熟第76页
     ·果胶甲基酯酶在植物花粉管发育中的作用第76-77页
     ·4果胶甲基酯酶的表达与边缘细胞产生以及抗逆境胁迫的作用第77页
     ·结论和展望第77-78页
   ·实验方法第78-81页
     ·RNA的提取第78页
     ·cDNA的制备第78页
     ·RT-PCR扩增基因第78-79页
     ·PCR产物的回收第79页
     ·基因的克隆第79-80页
     ·测序第80页
     ·渗透胁迫下Pme基因的半定量RT-PCR第80-81页
   ·结果与分析第81-84页
     ·长春花Pme基因的RT-PCR扩增结果及分析第81-82页
     ·长春花Pme基因的RT-PCR扩增结果及分析第82-83页
     ·Pme基因在长春花组织中的表达第83-84页
     ·渗透胁迫对长春花Pme基因表达的影响第84页
   ·讨论第84-85页
   ·本章小结第85-86页
结论第86-88页
参考文献第88-99页
附录第99-102页
攻读学位期间发表的学术论文第102-103页
致谢第103-104页
个人简历第104-105页

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