| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 缩略语说明 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-32页 |
| 第一节 serpin蛋白超家族的研究与进展 | 第15-26页 |
| 1. 简介 | 第15页 |
| 2. serpin的种类及分布 | 第15-16页 |
| 3. serpin的功能分化 | 第16-17页 |
| ·具有抑制蛋白酶活性的serpin | 第16-17页 |
| ·无抑制蛋白酶活性的serpin | 第17页 |
| 4. serpin的结构特点 | 第17-18页 |
| 5. serpin抑制靶酶的分子机理 | 第18-20页 |
| 6. 影响serpin靶酶特异性的因素 | 第20-21页 |
| ·RCL结构域决定serpin的主要靶酶特异性 | 第20页 |
| ·外识别位点精确调节serpin的靶酶特异性 | 第20-21页 |
| 7. serpin使用辅因子调节对靶酶的抑制活性 | 第21-24页 |
| 8. serpin的自身聚合 | 第24-25页 |
| 9. serpin与人类疾病的关系 | 第25-26页 |
| 第二节 serpin在昆虫先天免疫系统中的调节作用 | 第26-32页 |
| 1. 使用昆虫模型研究先天免疫机理的优势 | 第26页 |
| 2. 昆虫先天免疫应答的种类和特点 | 第26页 |
| 3. 诱导抗菌肽表达的相关信号通路 | 第26-28页 |
| 4. 酚氧化酶(PO)级联介导的昆虫黑化反应 | 第28-29页 |
| 5. 果蝇免疫系统相关serpin的研究进展 | 第29-30页 |
| 6. 黄粉虫先天免疫机理的研究进展 | 第30-31页 |
| 7. 本课题研究的目的与意义 | 第31-32页 |
| 第二章 三种新型serpin的分离纯化 | 第32-54页 |
| 1 实验材料 | 第32-37页 |
| ·黄粉虫的饲养及血淋巴的采集 | 第32页 |
| ·仪器设备 | 第32-33页 |
| ·主要试剂与缓冲液 | 第33-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-43页 |
| ·利用活性丝氨酸蛋白酶检测目的serpin的方法 | 第37页 |
| ·SPN40、SPN55和SPN48的分离纯化 | 第37-39页 |
| ·目的蛋白的N-端序列测定 | 第39-40页 |
| ·三种serpin的内部氨基酸部分序列测定 | 第40页 |
| ·三种serpin的cDNA克隆 | 第40-43页 |
| 3 实验结果 | 第43-52页 |
| ·使用丝氨酸蛋白酶(SP)及其抗体从血淋巴中探测和纯化未知serpin(以aSAE为例) | 第43-44页 |
| ·从黄粉虫血淋巴中纯化三种新型serpin | 第44-45页 |
| ·对纯化得到的serpin进行部分氨基酸序列分析 | 第45-47页 |
| ·三种新型serpin的cDNA克隆结果 | 第47-50页 |
| ·对新型serpin的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| ·鉴定与Toll途径负调控相关serpin的生物学意义 | 第52页 |
| ·使用Heparin-Toyopearl作为纯化初始柱的优势 | 第52页 |
| ·分析新型serpin与靶酶在黄粉虫体内的空间关系 | 第52-53页 |
| 5. 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 新型serpin的生物学功能研究 | 第54-71页 |
| 1. 实验材料 | 第54-56页 |
| ·仪器设备 | 第54页 |
| ·主要试剂与缓冲液 | 第54-56页 |
| 2. 实验方法 | 第56-59页 |
| ·抗体的制备 | 第56-57页 |
| ·用于分析小分子量蛋白或多肽的Tricine SDS-PAGE | 第57页 |
| ·测定靶酶在serpin RCL结构域上的特异酶切位点 | 第57页 |
| ·大黄粉虫幼虫的微量注射 | 第57-58页 |
| ·考察serpin对Toll途径中SP级联的调控作用 | 第58页 |
| ·考察serpin对黑色素合成影响的相关实验 | 第58-59页 |
| 3. 实验结果 | 第59-67页 |
| ·验证三种新型serpin的靶酶特异性 | 第59-60页 |
| ·考察靶酶在serpin的RCL结构域上特异的酶切位点 | 第60-62页 |
| ·对serpin的RCL结构域进行多序列比对 | 第62-63页 |
| ·体外三种serpin对SP级联活性以及对pro-Spatzle活化的影响 | 第63-64页 |
| ·免疫系统激活前后serpin表达量的分析 | 第64-65页 |
| ·三种serpin对β-1,3葡聚糖诱导的黑化反应的影响 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| ·对serpin靶酶特异性的研究与讨论 | 第67-68页 |
| ·serpin通过负反馈机理对Toll途径中SP级联进行调节 | 第68-69页 |
| ·对新型serpin生物学功能与研究意义的讨论 | 第69-70页 |
| 5 小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 黄粉虫中Toll信号通路和黑化反应的信号传导与负调控模型 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 发表文章 | 第80-87页 |
