| 中文摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-40页 |
| 第一节 水飞蓟宾的药理学研究进展 | 第15-16页 |
| 1. 保肝作用 | 第15页 |
| 2. 对心肌细胞的保护作用 | 第15-16页 |
| 3. 抗血小板聚集作用 | 第16页 |
| 4. 抗氧化作用 | 第16页 |
| 5. 抗肿瘤作用 | 第16页 |
| 第二节 吴茱萸碱的药理学研究进展 | 第16-18页 |
| 1. 对心血管系统的作用 | 第17页 |
| ·保护心脏的作用 | 第17页 |
| ·降血压、舒张血管的作用 | 第17页 |
| 2. 抗炎、镇痛作用 | 第17-18页 |
| 3. 对内分泌系统的作用 | 第18页 |
| 4. 抗肿瘤作用 | 第18页 |
| 第三节 细胞自噬的研究进展 | 第18-22页 |
| 1. 自噬的分类 | 第18-19页 |
| ·大自噬 | 第19页 |
| ·小自噬 | 第19页 |
| ·分子伴侣介导的自噬 | 第19页 |
| 2. 自噬的主要调控因素 | 第19-22页 |
| ·mTOR | 第20页 |
| ·MAP-LC3 | 第20-21页 |
| ·PI3K | 第21页 |
| ·G蛋白及氨基酸 | 第21-22页 |
| 第四节 细胞凋亡的研究进展 | 第22-31页 |
| 1. 细胞凋亡的形态学变化 | 第22页 |
| 2. 细胞凋亡的主要调控因素 | 第22-31页 |
| ·Caspase家族蛋白 | 第22-23页 |
| ·Bcl-2家族蛋白与线粒体途径 | 第23-25页 |
| ·MAPK家族蛋白 | 第25-27页 |
| ·NF-κB家族蛋白 | 第27-28页 |
| ·p53蛋白 | 第28-29页 |
| ·PI3K/Akt途径 | 第29-30页 |
| ·活性氧 | 第30-31页 |
| ·Sirt1 | 第31页 |
| 第五节 细胞周期阻滞的研究进展 | 第31-33页 |
| 1. 细胞周期的调控分子 | 第31-32页 |
| 2. 细胞周期的检查点 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-40页 |
| 第二章 水飞蓟宾诱导HT1080细胞自噬与凋亡的机制研究 | 第40-83页 |
| 第一节 水飞蓟宾诱导HT1080细胞自噬与凋亡 | 第40-52页 |
| 一、实验材料与方法 | 第40-46页 |
| 1. 实验材料 | 第40-41页 |
| 2. 实验方法 | 第41-46页 |
| 二、实验结果 | 第46-51页 |
| 1. 水飞蓟宾在有血清与无血清条件下抑制HT1080细胞生长的作用及对比 | 第46页 |
| 2. 水飞蓟宾在有血清与无血清条件下诱导HT1080细胞自噬 | 第46-49页 |
| ·水飞蓟宾诱导细胞自噬的形态学观察 | 第46-47页 |
| ·流式细胞术分析水飞蓟宾诱导细胞自噬 | 第47-48页 |
| ·蛋白免疫印迹法分析水飞蓟宾诱导细胞自噬 | 第48-49页 |
| 3. 水飞蓟宾在有血清与无血清条件下诱导HT1080细胞凋亡 | 第49-50页 |
| ·水飞蓟宾诱导细胞凋亡的形态学观察 | 第49-50页 |
| ·水飞蓟宾诱导细胞内caspase-3活化 | 第50页 |
| 4. 水飞蓟宾诱导HT1080细胞自噬促进凋亡 | 第50-51页 |
| 三、讨论 | 第51-52页 |
| 四、小结 | 第52页 |
| 第二节 水飞蓟宾通过产生活性氧诱导HT1080细胞自噬性死亡 | 第52-58页 |
| 一、实验材料与方法 | 第52-54页 |
| 1. 实验材料 | 第52-53页 |
| 2. 实验方法 | 第53-54页 |
| 二、实验结果 | 第54-57页 |
| 1. 水飞蓟宾诱导HT1080细胞内产生活性氧 | 第54页 |
| 2. 活性氧清除剂NAC抑制水飞蓟宾诱导的HT1080细胞自噬及凋亡性死亡 | 第54-56页 |
| 3. 过氧化氢和超氧阴离子是水飞蓟宾诱导的活性氧的主要形式 | 第56-57页 |
| 三、讨论 | 第57-58页 |
| 四、小结 | 第58页 |
| 第三节 p38、JNK MAPKs，p53以及NF-κB参与水飞蓟宾诱导的自噬性死亡 | 第58-74页 |
| 一、实验材料与方法 | 第58-59页 |
| 1. 实验材料 | 第58-59页 |
| 2. 实验方法 | 第59页 |
| 二、实验结果 | 第59-72页 |
| 1. 较大剂量水飞蓟宾在无血清的条件下短时间内诱导HT1080细胞产生活性氧 | 第59-60页 |
| ·水飞蓟宾诱导细胞产生活性氧 | 第59-60页 |
| ·活性氧清除剂抑制水飞蓟宾诱导的细胞内活性氧的产生 | 第60页 |
| 2. 较大剂量水飞蓟宾在无血清条件下短时间内诱导HT1080细胞自噬性死亡 | 第60-62页 |
| ·水飞蓟宾诱导细胞自噬 | 第60-61页 |
| ·自噬抑制剂3-MA抑制水飞蓟宾诱导的自噬 | 第61-62页 |
| ·3-MA抑制水飞蓟宾诱导的细胞生长抑制，而雷帕霉素促进这一作用 | 第62页 |
| 3. 活性氧清除剂抑制水飞蓟宾短时间内无血清条件下诱导的细胞自噬性死亡 | 第62-64页 |
| ·活性氧清除剂抑制水飞蓟宾诱导的细胞自噬 | 第62-63页 |
| ·活性氧清除剂抑制较大剂量水飞蓟宾诱导的细胞生长抑制 | 第63-64页 |
| 4. p38、JNK MAPKs，p53以及NF-κB参与水飞蓟宾诱导的细胞生长抑制 | 第64-67页 |
| ·p38参与水飞蓟宾诱导的细胞生长抑制 | 第64页 |
| ·NF-κB参与水飞蓟宾诱导细胞生长抑制 | 第64-65页 |
| ·p53参与水飞蓟宾诱导的细胞生长抑制 | 第65-66页 |
| ·JNK参与水飞蓟宾诱导的细胞生长抑制 | 第66-67页 |
| 5. 活性氧-p38-NF-κB正反馈途径参与水飞蓟宾诱导的HT1080细胞自噬 | 第67-69页 |
| ·p38与NF-κB促进水飞蓟宾诱导的细胞自噬 | 第67页 |
| ·水飞蓟宾通过p38-NF-κB途径诱导细胞自噬 | 第67-68页 |
| ·水飞蓟宾通过活性氧-p38-NF-κB途径诱导细胞自噬 | 第68页 |
| ·活性氧-p38-NF-κB存在正反馈机制 | 第68-69页 |
| 6. 水飞蓟宾通过活性氧-p38-p53途径诱导HT1080细胞发生自噬性死亡 | 第69-71页 |
| ·p53促进水飞蓟宾诱导的细胞自噬与凋亡 | 第69-70页 |
| ·水飞蓟宾通过p38-p53途径诱导细胞自噬 | 第70页 |
| ·水飞蓟宾通过活性氧-p38-p53途径诱导胞自噬 | 第70-71页 |
| 7. 水飞蓟宾通过JNK-p53途径诱导细胞自噬性死亡，活性氧不参与这一过程 | 第71-72页 |
| ·JNK促进水飞蓟宾诱导的细胞自噬 | 第71页 |
| ·水飞蓟宾通过JNK-p53途径诱导HT1080细胞发生自噬 | 第71-72页 |
| ·活性氧不参与水飞蓟宾诱导的JNK途径的活化 | 第72页 |
| 三、讨论 | 第72-74页 |
| 四、小结 | 第74页 |
| 第四节 JNK-p53通过抑制MEK/ERK和PI3K/Akt功能参与水飞蓟宾诱导细胞死亡 | 第74-79页 |
| 一、实验材料与方法 | 第74-75页 |
| 1. 实验材料 | 第74-75页 |
| 2. 实验方法 | 第75页 |
| 二、实验结果 | 第75-78页 |
| 1. MEK/ERK抑制水飞蓟宾诱导的HT1080细胞凋亡，而非自噬 | 第75-76页 |
| 2. 水飞蓟宾可能通过JNK-p53抑制MEK/ERK的功能而诱导细胞死亡 | 第76页 |
| 3. PI3K/Akt抑制水飞蓟宾诱导的HT1080细胞自噬性死亡 | 第76-77页 |
| 4. 水飞蓟宾可能通过JNK-p53抑制PI3K/Akt的功能而诱导细胞死亡 | 第77页 |
| 5. 抑制p53、JNK、MEK/ERK、PI3K/Akt的功能对自噬相关蛋白表达的影响 | 第77-78页 |
| 三、讨论 | 第78页 |
| 四、小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 第三章 吴茱萸碱诱导HT1080细胞死亡的机制研究 | 第83-105页 |
| 第一节 吴茱萸碱诱导HT1080细胞自噬与凋亡 | 第83-89页 |
| 一、实验材料与方法 | 第83-84页 |
| 1. 实验材料 | 第83-84页 |
| 2. 实验方法 | 第84页 |
| 二、实验结果 | 第84-88页 |
| 1. 吴茱萸碱在有血清与无血清条件下抑制HT1080细胞生长的作用及对比 | 第84-85页 |
| 2. 吴茱萸碱在有血清与无血清条件下诱导HT1080细胞自噬 | 第85-86页 |
| 3. 吴茱萸碱在有血清与无血清条件下诱导HT1080细胞凋亡 | 第86-87页 |
| ·吴茱萸碱诱导细胞凋亡的形态学观察 | 第86页 |
| ·吴茱萸碱增加细胞亚二倍体峰比率 | 第86-87页 |
| 4. 吴茱萸碱诱导HT1080细胞自噬抑制凋亡 | 第87-88页 |
| ·3-MA促进吴茱萸碱诱导的细胞死亡 | 第87-88页 |
| ·3-MA促进吴茱萸碱诱导细胞内caspase-3活化 | 第88页 |
| 三、讨论 | 第88-89页 |
| 四、小结 | 第89页 |
| 第二节 吴茱萸碱诱导HT1080细胞死亡的分子机制 | 第89-98页 |
| 一、实验材料与方法 | 第89-90页 |
| 1. 实验材料 | 第89-90页 |
| 2. 实验方法 | 第90页 |
| 二、实验结果 | 第90-97页 |
| 1. 吴茱萸碱诱导HT1080细胞凋亡通过线粒体途径 | 第90-93页 |
| ·吴茱萸碱降低细胞内线粒体膜电位 | 第90-91页 |
| ·吴茱萸碱增加细胞色素c的释放，并且上调Bax/Bcl-2的比率 | 第91-92页 |
| ·吴茱萸碱诱导caspase-9活化 | 第92页 |
| ·吴茱萸碱促进凋亡诱导因子AIF从线粒体释放到胞浆 | 第92页 |
| ·吴茱萸碱下调细胞内sirt1蛋白的表达 | 第92-93页 |
| 2. MAPKs家族蛋白在吴茱萸碱诱导的HT1080细胞死亡过程中的作用 | 第93-95页 |
| ·p38促进吴茱萸碱诱导的细胞生长抑制 | 第93页 |
| ·JNK抑制吴茱萸碱诱导的细胞生长抑制 | 第93-94页 |
| ·ERK促进吴茱萸碱诱导的细胞生长抑制 | 第94-95页 |
| 3. PI3K/Akt抑制吴茱萸碱诱导的HT1080细胞生长抑制 | 第95-96页 |
| 4. NF-κB促进吴茱萸碱诱导的HT1080细胞生长抑制 | 第96-97页 |
| 三、讨论 | 第97-98页 |
| 四、小结 | 第98页 |
| 第三节 吴茱萸碱诱导HT1080细胞周期阻滞 | 第98-102页 |
| 一、实验材料与方法 | 第98-99页 |
| 1. 实验材料 | 第98-99页 |
| 2. 实验方法 | 第99页 |
| 二、实验结果 | 第99-101页 |
| 1. 吴茱萸碱诱导HT1080细胞G2/M期周期阻滞 | 第99-100页 |
| 2. 吴茱萸碱调节G_2/M周期阻滞的重要效应分子的表达 | 第100-101页 |
| ·吴茱萸碱上调p21的表达，但是并未上调p16的表达 | 第100页 |
| ·吴茱萸碱下调cyclin B1/Cdc2的表达 | 第100-101页 |
| ·吴茱萸碱上调p-Cdc25C的表达 | 第101页 |
| 三、讨论 | 第101页 |
| 四、小结 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-105页 |
| 缩略语说明 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 附录 | 第108-117页 |
