中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
前言 | 第9-11页 |
1. 材料、试剂和仪器 | 第11-16页 |
·细胞培养 | 第11页 |
·主要试剂 | 第11-12页 |
·主要试剂配制 | 第12-14页 |
·仪器 | 第14-16页 |
2. 实验方法与步骤 | 第16-26页 |
·MTT 法测定药物对SMMC-7721 细胞增殖的影响 | 第16-17页 |
·流式细胞术测SMMC-7721 细胞周期的变化 | 第17页 |
·HOECHST 33258/PI 双染色法观察细胞凋亡形态变化 | 第17页 |
·TUNEL 法测定细胞的凋亡率 | 第17-18页 |
·琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡的梯状DNA 条带 | 第18页 |
·PBR322 DNA 转化、扩增及提取 | 第18-19页 |
·电泳法检测拓扑异构酶Ⅱ的活性 | 第19页 |
·高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位变化 | 第19页 |
·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因的表达 | 第19-22页 |
·Trizol 法提取细胞总RNA | 第19-20页 |
·细胞总RNA 鉴定 | 第20页 |
·逆转录合成cDNA 第一链 | 第20-21页 |
·聚合酶链反应检测细胞p53, Bcl-2 和Bax 基因表达水平的改变 | 第21-22页 |
·WESTERN BLOTTING 检测相关蛋白表达变化 | 第22-25页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第22-23页 |
·考马斯亮蓝G250 法定量细胞总蛋白 | 第23页 |
·蛋白质凝胶电泳 | 第23-24页 |
·蛋白质转印 | 第24页 |
·Western blotting 检测Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,Bcl-2,Bax,β-actin 蛋白量 | 第24-25页 |
·统计学分析 | 第25-26页 |
3. 实验结果 | 第26-40页 |
·19 种喹诺酮类衍生物对SMMC-7721 细胞增殖作用的影响 | 第26-31页 |
·FQ16 对SMMC-7721 细胞增殖的抑制作用 | 第31页 |
·FQ16 对SMMC-7721 细胞周期的影响 | 第31-32页 |
·HOECHST 33258/PI 染色观察凋亡细胞形态改变 | 第32-33页 |
·TUNEL 法测定细胞凋亡率 | 第33-35页 |
·DNA 电泳法测定细胞凋亡的梯状DNA 条带 | 第35页 |
·FQ16 对 DNA 拓扑异构酶II 的活性的影响 | 第35-36页 |
·FQ16 对线粒体膜电位的影响 | 第36-37页 |
·RT-PCR 检测细胞P53、BCL-2 和BAX MRNA 表达的影响 | 第37-38页 |
·WESTERN-BLOTTING 检测凋亡相关蛋白表达量的变化 | 第38-40页 |
4. 讨论 | 第40-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
文献综述 | 第45-59页 |
附录 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-62页 |