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喹诺酮类衍生物诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
前言第9-11页
1. 材料、试剂和仪器第11-16页
   ·细胞培养第11页
   ·主要试剂第11-12页
   ·主要试剂配制第12-14页
   ·仪器第14-16页
2. 实验方法与步骤第16-26页
   ·MTT 法测定药物对SMMC-7721 细胞增殖的影响第16-17页
   ·流式细胞术测SMMC-7721 细胞周期的变化第17页
   ·HOECHST 33258/PI 双染色法观察细胞凋亡形态变化第17页
   ·TUNEL 法测定细胞的凋亡率第17-18页
   ·琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡的梯状DNA 条带第18页
   ·PBR322 DNA 转化、扩增及提取第18-19页
   ·电泳法检测拓扑异构酶Ⅱ的活性第19页
   ·高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位变化第19页
   ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因的表达第19-22页
     ·Trizol 法提取细胞总RNA第19-20页
     ·细胞总RNA 鉴定第20页
     ·逆转录合成cDNA 第一链第20-21页
     ·聚合酶链反应检测细胞p53, Bcl-2 和Bax 基因表达水平的改变第21-22页
   ·WESTERN BLOTTING 检测相关蛋白表达变化第22-25页
     ·细胞总蛋白的提取第22-23页
     ·考马斯亮蓝G250 法定量细胞总蛋白第23页
     ·蛋白质凝胶电泳第23-24页
     ·蛋白质转印第24页
     ·Western blotting 检测Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,Bcl-2,Bax,β-actin 蛋白量第24-25页
   ·统计学分析第25-26页
3. 实验结果第26-40页
   ·19 种喹诺酮类衍生物对SMMC-7721 细胞增殖作用的影响第26-31页
   ·FQ16 对SMMC-7721 细胞增殖的抑制作用第31页
   ·FQ16 对SMMC-7721 细胞周期的影响第31-32页
   ·HOECHST 33258/PI 染色观察凋亡细胞形态改变第32-33页
   ·TUNEL 法测定细胞凋亡率第33-35页
   ·DNA 电泳法测定细胞凋亡的梯状DNA 条带第35页
   ·FQ16 对 DNA 拓扑异构酶II 的活性的影响第35-36页
   ·FQ16 对线粒体膜电位的影响第36-37页
   ·RT-PCR 检测细胞P53、BCL-2 和BAX MRNA 表达的影响第37-38页
   ·WESTERN-BLOTTING 检测凋亡相关蛋白表达量的变化第38-40页
4. 讨论第40-42页
结论第42-43页
参考文献第43-45页
文献综述第45-59页
附录第59-61页
致谢第61-62页

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