| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1 细胞自噬的研究背景 | 第11-14页 |
| 1.1 细胞自噬的定义 | 第11-12页 |
| 1.2 细胞自噬的发生与分子机制 | 第12-14页 |
| 2 植物细胞自噬的生理功能 | 第14-15页 |
| 2.1 植物细胞内成分稳态的维持 | 第14-15页 |
| 2.2 自噬参与植物发育和抗衰老的调控 | 第15页 |
| 3 植物细胞自噬在胁迫响应中的研究 | 第15-16页 |
| 4 小立碗藓的研究背景 | 第16-18页 |
| 5 小立碗藓细胞自噬与逆境胁迫关系的研究意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-35页 |
| 1 材料 | 第19-21页 |
| 1.1 小立碗藓 | 第19页 |
| 1.2 大肠杆菌 | 第19页 |
| 1.3 质粒 | 第19页 |
| 1.4 培养基 | 第19-20页 |
| 1.5 主要试剂及配制方法 | 第20-21页 |
| 1.6 重要的实验仪器和设备 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-35页 |
| 2.1 菌种保存和活化 | 第21页 |
| 2.2 小立碗藓的培养与储存 | 第21-23页 |
| 2.3 小立碗藓的取材与处理方法 | 第23页 |
| 2.4 小立碗藓中细胞自噬相关基因的鉴定与收集 | 第23-24页 |
| 2.5 植物总DNA的提取--CTAB法 | 第24页 |
| 2.6 植物总RNA的提取--Trizol法 | 第24-25页 |
| 2.7 核酸琼脂糖凝胶电泳--DNA和RNA | 第25页 |
| 2.8 单链cDNA的合成 | 第25-26页 |
| 2.9 基因扩增--PCR反应 | 第26-28页 |
| 2.10 质粒构建 | 第28-29页 |
| 2.11 质粒提取 | 第29-30页 |
| 2.12 实时荧光定量PCR对基因表达水平的检测 | 第30-31页 |
| 2.13 小立碗藓原生质体的制备与表达转化实验 | 第31-34页 |
| 2.14 自噬诱导剂--雷帕霉素处理小立碗藓的方法 | 第34页 |
| 2.15 主要分析工具和软件 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-50页 |
| 第一部分 小立碗藓ATG基因的全基因组鉴定和特征分析 | 第35-43页 |
| 3.1.1 小立碗藓中ATG的鉴定和分类 | 第35-37页 |
| 3.1.2 小立碗藓中ATG的染色体定位和基因复制分析 | 第37-39页 |
| 3.1.3 小立碗藓中ATG蛋白的系统进化和亚细胞定位预测分析 | 第39-41页 |
| 3.1.4 小立碗藓中ATG的结构多样性分析 | 第41-43页 |
| 第二部分 小立碗藓ATG基因响应胁迫的差异表达 | 第43-47页 |
| 3.2.1 原丝体中ATG基因的表达分析 | 第44-45页 |
| 3.2.2 配子体中ATG基因的表达分析 | 第45-47页 |
| 第三部分 小立碗藓细胞自噬功能的初步分析 | 第47-50页 |
| 3.3.1 自噬诱导剂--雷帕霉素对小立碗藓干旱的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.2 小立碗藓原生质体中细胞自噬的观察 | 第48页 |
| 3.3.3 小立碗藓PpATG3同源基因重组敲除及表型观察 | 第48-50页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第50-52页 |
| 附录 | 第52-57页 |
| 1 小立碗藓PpATG3同源基因结构和pTN182载体 | 第52页 |
| 2 小立碗藓各生长阶段所用培养基配制 | 第52-54页 |
| 3 本研究中使用的RT-qPCR引物 | 第54-55页 |
| 4 小立碗藓、莱茵衣藻和拟南芥自噬相关基因的亚细胞定位预测 | 第55-56页 |
| 5 小立碗藓和烟草自噬相关基因在胁迫下的表达概况 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
