| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第11-24页 |
| 第1部分 引言 | 第24-35页 |
| 1 肝癌及RNA干扰 | 第24-25页 |
| 2 siRNA类药物用于肝癌治疗所面临的挑战 | 第25-29页 |
| 2.1 递送载体的高效肿瘤靶向性 | 第27-28页 |
| 2.2 高效地促细胞摄取及突破内涵体-溶酶体屏障 | 第28-29页 |
| 3. 国内外研究进展 | 第29-33页 |
| 3.1 克服纳米载体的系统清除的问题 | 第29-30页 |
| 3.2 增加肿瘤细胞对纳米载体的摄取 | 第30-31页 |
| 3.3 实现高效内涵体逃逸 | 第31-32页 |
| 3.4 递送载体与siRNA分离 | 第32-33页 |
| 4 本课题的提出 | 第33-35页 |
| 第2部分 肿瘤细胞内高效转染的siRNA脂质纳米载体设计 | 第35-96页 |
| 第1章 脂质液晶纳米粒的制备与表征 | 第37-59页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第38-40页 |
| 1.1 实验原料 | 第38-39页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-45页 |
| 2.1 新型类磷脂材料的合成与表征 | 第40-41页 |
| 2.2 脂质液晶纳米载体及对照组的制备 | 第41-42页 |
| 2.3 粒径随超声时间变化测定 | 第42页 |
| 2.4 纳米粒的相变性能表征 | 第42-43页 |
| 2.5 纳米粒的载药比测定及处方筛选 | 第43-44页 |
| 2.6 载药纳米粒的稳定性研究 | 第44页 |
| 2.7 纳米粒的安全性研究 | 第44-45页 |
| 3 结果与讨论 | 第45-57页 |
| 3.1 类磷脂材料DC的核磁共振氢谱表征 | 第45-47页 |
| 3.2 脂质液晶纳米载体及对照组的制备 | 第47-48页 |
| 3.3 脂质液晶纳米粒的粒径随超声时间变化 | 第48页 |
| 3.4 纳米粒的相变性能表征 | 第48-53页 |
| 3.5 纳米粒的载药比测定及处方筛选 | 第53页 |
| 3.6 载药纳米粒的稳定性研究 | 第53-55页 |
| 3.7 细胞水平安全性研究 | 第55-57页 |
| 4 本章小结 | 第57-59页 |
| 第2章 脂质液晶纳米粒的胞内递送过程及其分子机制 | 第59-77页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第59-61页 |
| 1.1 实验原料 | 第59-60页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61-64页 |
| 2.1 纳米粒的促细胞摄取研究 | 第61页 |
| 2.2 药物分布状态的考察 | 第61页 |
| 2.3 纳米粒的促药物递送能力研究 | 第61-62页 |
| 2.4 纳米粒克服胞内递药屏障过程的实时监测 | 第62-63页 |
| 2.5 膜融合度检测 | 第63页 |
| 2.6 纳米粒克服内涵体屏障的模拟实验 | 第63-64页 |
| 2.7 计算机建模及能量计算 | 第64页 |
| 3 结果与讨论 | 第64-75页 |
| 3.1 纳米粒的促细胞摄取研究 | 第64-65页 |
| 3.2 药物分布状态的考察 | 第65-66页 |
| 3.3 纳米粒的促药物递送能力研究 | 第66-68页 |
| 3.4 纳米粒克服胞内递药屏障的过程 | 第68-72页 |
| 3.5 膜融合度检测 | 第72-74页 |
| 3.6 纳米粒克服内涵体屏障的模拟实验 | 第74页 |
| 3.7 计算机建模及能量计算 | 第74-75页 |
| 4 本章小结 | 第75-77页 |
| 第3章 脂质液晶纳米粒的细胞水平转染效率及抗肿瘤活性评价 | 第77-86页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第78-79页 |
| 1.1 实验原料 | 第78-79页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第79页 |
| 2 实验方法 | 第79-81页 |
| 2.1 细胞水平给药 | 第79-80页 |
| 2.2 基因沉默效率考察 | 第80-81页 |
| 2.3 细胞周期检测 | 第81页 |
| 2.4 细胞凋亡率检测 | 第81页 |
| 2.5 细胞活力检测 | 第81页 |
| 3 结果与讨论 | 第81-85页 |
| 3.1 基因沉默效率考察 | 第81-82页 |
| 3.2 细胞周期检测 | 第82-83页 |
| 3.3 细胞凋亡率检测 | 第83-84页 |
| 3.4 细胞活力检测 | 第84-85页 |
| 4 本章小结 | 第85-86页 |
| 第4章 脂质液晶纳米粒的体内抗肿瘤药效学评价 | 第86-96页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第86-88页 |
| 1.1 实验原料 | 第86-87页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第87-88页 |
| 1.3 实验动物 | 第88页 |
| 2 实验方法 | 第88-90页 |
| 2.1 荷瘤裸鼠模型建立及肿瘤体积计算 | 第88页 |
| 2.2 实验分组及给药剂量 | 第88页 |
| 2.3 肿瘤基因沉默效率研究 | 第88-89页 |
| 2.4 抗肿瘤生长药效评估 | 第89页 |
| 2.5 肿瘤形态及病理切片评估 | 第89页 |
| 2.6 纳米粒的免疫原性研究 | 第89页 |
| 2.7 药物在肿瘤组织内的分布情况研究 | 第89-90页 |
| 3 结果与讨论 | 第90-94页 |
| 3.1 肿瘤基因沉默效率 | 第90页 |
| 3.2 抗肿瘤生长药效评估 | 第90-91页 |
| 3.3 肿瘤形态及病理切片评估 | 第91-92页 |
| 3.4 纳米粒的免疫原性研究 | 第92-93页 |
| 3.5 药物在肿瘤组织内的分布情况研究 | 第93-94页 |
| 4 本章小结 | 第94-96页 |
| 第3部分 肿瘤组织归巢靶向的siRNA脂质纳米载体设计 | 第96-147页 |
| 第5章 脂质杂合型外泌体囊泡的制备及表征 | 第98-110页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第98-100页 |
| 1.1 实验原料 | 第98-99页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第99-100页 |
| 2 实验方法 | 第100-103页 |
| 2.1 脂质杂合型外泌体囊泡及对照组的制备 | 第100-101页 |
| 2.2 处方比例摸索 | 第101-102页 |
| 2.3 膜融合情况考察 | 第102页 |
| 2.4 外泌体蛋白易位情况考察 | 第102页 |
| 2.5 粒径、电位表征 | 第102页 |
| 2.6 形貌表征 | 第102-103页 |
| 2.7 脂质杂合型外泌体囊泡的稳定性考察 | 第103页 |
| 2.8 脂质杂合型外泌体囊泡的安全性考察 | 第103页 |
| 3 结果与讨论 | 第103-109页 |
| 3.1 脂质杂合型外泌体囊泡的示意图 | 第103-104页 |
| 3.2 处方比例摸索 | 第104-105页 |
| 3.3 膜融合情况考察 | 第105页 |
| 3.4 外泌体蛋白复制情况考察 | 第105-107页 |
| 3.5 脂质杂合型外泌体囊泡的粒径、电位表征 | 第107页 |
| 3.6 脂质杂合型外泌体囊泡的形貌表征 | 第107-108页 |
| 3.7 脂质杂合型外泌体囊泡的稳定性考察 | 第108页 |
| 3.8 脂质杂合型外泌体囊泡的安全性考察 | 第108-109页 |
| 4 本章小结 | 第109-110页 |
| 第6章 脂质杂合型外泌体囊泡的载药性能考察 | 第110-117页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第110-111页 |
| 1.1 实验原料 | 第110-111页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第111页 |
| 2 实验方法 | 第111-113页 |
| 2.1 脂质杂合型外泌体囊泡的载药 | 第111页 |
| 2.2 载药比的测定 | 第111-112页 |
| 2.3 载药前后粒径、电位的表征 | 第112页 |
| 2.4 不同生理环境下的药物释放 | 第112页 |
| 2.5 药物抗核酸酶降解能力考察 | 第112-113页 |
| 3 结果与讨论 | 第113-116页 |
| 3.1 载药比的测定 | 第113页 |
| 3.2 载药前后粒径、电位的变化 | 第113-114页 |
| 3.3 药物释放量考察 | 第114-115页 |
| 3.4 药物抗核酸酶降解能力考察 | 第115-116页 |
| 4 本章小结 | 第116-117页 |
| 第7章 脂质杂合型外泌体囊泡生物体内高效递送的机制研究 | 第117-131页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第117-119页 |
| 1.1 实验原料 | 第117-118页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第118-119页 |
| 1.3 实验动物 | 第119页 |
| 2 实验方法 | 第119-122页 |
| 2.1 细胞培养 | 第119页 |
| 2.2 各制剂的荧光标记 | 第119-120页 |
| 2.3 脂质杂合型外泌体囊泡的生物相容性考察 | 第120页 |
| 2.4 脂质杂合型外泌体囊泡的归巢靶向性考察 | 第120-121页 |
| 2.5 脂质杂合型外泌体囊泡的转染机制研究 | 第121-122页 |
| 3 结果与讨论 | 第122-129页 |
| 3.1 单核巨噬细胞对脂质杂合型外泌体囊泡的摄取 | 第122-123页 |
| 3.2 脂质杂合型外泌体囊泡的归巢靶向性 | 第123-125页 |
| 3.3 脂质杂合型外泌体囊泡的转染机制 | 第125-129页 |
| 4 本章小结 | 第129-131页 |
| 第8章 脂质杂合型外泌体囊泡的体内外抗肿瘤药效学研究 | 第131-147页 |
| 1 实验原料与仪器 | 第131-133页 |
| 1.1 实验原料 | 第131-132页 |
| 1.2 实验仪器与设备 | 第132-133页 |
| 1.3 实验动物 | 第133页 |
| 2 实验方法 | 第133-136页 |
| 2.1 细胞水平基因沉默效率考察 | 第133-134页 |
| 2.2 细胞凋亡率考察 | 第134页 |
| 2.3 细胞活力考察 | 第134页 |
| 2.4 荷瘤裸鼠模型建立及肿瘤体积计算 | 第134页 |
| 2.5 实验分组及给药剂量 | 第134-135页 |
| 2.6 动物水平基因沉默效率考察 | 第135页 |
| 2.7 脂质杂合型外泌体囊泡的抗肿瘤药效评估 | 第135页 |
| 2.8 主要器官及肿瘤的病理学切片考察 | 第135页 |
| 2.9 体内免疫原性考察 | 第135-136页 |
| 2.10 肝功能检测 | 第136页 |
| 3 结果与讨论 | 第136-146页 |
| 3.1 细胞水平基因沉默效率 | 第136-137页 |
| 3.2 细胞凋亡率 | 第137-138页 |
| 3.3 细胞活力变化 | 第138-139页 |
| 3.4 动物水平基因沉默效率 | 第139-140页 |
| 3.5 肿瘤生长抑制 | 第140-141页 |
| 3.6 荷瘤裸鼠生存曲线 | 第141-142页 |
| 3.7 荷瘤裸鼠体重变化曲线 | 第142-143页 |
| 3.8 主要器官及肿瘤的病理学切片结果 | 第143-145页 |
| 3.10 肝功能检测 | 第145-146页 |
| 4 本章小结 | 第146-147页 |
| 总结与展望 | 第147-150页 |
| 参考文献 | 第150-164页 |
| 致谢 | 第164-166页 |
| 作者简介及攻读博士学位期间发表论文与研究成果 | 第166-167页 |
