| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第16-20页 |
| 第1章 引言 | 第20-36页 |
| 1.1 血管生成 | 第20-30页 |
| 1.1.1 肿瘤血管生成的方式 | 第21-23页 |
| 1.1.2 调控肿瘤血管生成的分子机制 | 第23-27页 |
| 1.1.3 调控肿瘤血管生成的细胞机制 | 第27-28页 |
| 1.1.4 提高靶向肿瘤治疗的策略 | 第28-30页 |
| 1.2 血管生成抑制剂 | 第30-31页 |
| 1.2.1 直接血管生成抑制剂 | 第30页 |
| 1.2.2 间接血管生成抑制剂 | 第30-31页 |
| 1.3 微管抑制剂 | 第31-33页 |
| 1.3.1 微管抑制剂的抗血管生成机制 | 第31-32页 |
| 1.3.2 微管抑制剂MT189 | 第32-33页 |
| 1.4 存在问题与研究意义 | 第33-34页 |
| 1.5 研究思路与方案 | 第34-36页 |
| 1.5.1 MT189的新生血管抑制作用 | 第34页 |
| 1.5.2 MT189抑制血管新生的分子机制 | 第34-36页 |
| 第2章 MT189新生血管生成抑制作用 | 第36-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.1 药品与试剂 | 第37页 |
| 2.1.2 耗材与仪器 | 第37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第37-38页 |
| 2.2.2 SRB法 | 第38页 |
| 2.2.3 Cell Counting Kit（CCK-8）法 | 第38页 |
| 2.2.4 细胞迁移试验 | 第38-39页 |
| 2.2.5 细胞管腔形成试验 | 第39页 |
| 2.2.6 大鼠动脉环试验 | 第39页 |
| 2.2.7 鸡胚脲囊膜血管生成实验 | 第39-40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-46页 |
| 2.3.1 MT189对内皮细胞增殖抑制作用 | 第40页 |
| 2.3.2 MT189对内皮细胞增殖抑制作用的时效和量效关系 | 第40-42页 |
| 2.3.3 MT189抑制内皮细胞迁移 | 第42-43页 |
| 2.3.4 MT189抑制血管内皮细胞管腔形成 | 第43-44页 |
| 2.3.5 MT189抑制大鼠动脉环微血管生成 | 第44-45页 |
| 2.3.6 MT189抑制鸡胚脲囊膜血管生成 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第3章 MT189抑制VEGF刺激的血管生成和VEGF的转录与分泌 | 第48-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 3.1.1 药品与试剂 | 第48-49页 |
| 3.1.2 耗材与仪器 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-54页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第49-50页 |
| 3.2.2 SRB法 | 第50页 |
| 3.2.3 细胞迁移试验 | 第50页 |
| 3.2.4 细胞管腔形成试验 | 第50-51页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR（Real-time PCR） | 第51-52页 |
| 3.2.6 ELISA法测定VEGF分泌 | 第52页 |
| 3.2.7 Western blot实验 | 第52-54页 |
| 3.3 实验结果 | 第54-60页 |
| 3.3.1 MT189抑制VEGF刺激的血管内皮细胞增殖 | 第54-55页 |
| 3.3.2 MT189抑制VEGF刺激的血管内皮细胞迁移 | 第55-56页 |
| 3.3.3 MT189抑制VEGF刺激的血管内皮细胞管腔形成 | 第56页 |
| 3.3.4 MT189抑制缺氧条件下肿瘤细胞VEGF的转录和分泌 | 第56-57页 |
| 3.3.5 MT189抑制缺氧诱导的HIF-1α蛋白水平 | 第57-58页 |
| 3.3.6 MT189抑制常氧条件下肿瘤细胞VEGF的转录和分泌 | 第58-59页 |
| 3.3.7 MT189抑制内皮细胞VEGF的转录和分泌 | 第59页 |
| 3.3.8 MT189对VEGF受体及磷酸化水平的影响 | 第59-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第4章 MT189增强血管内皮细胞间连接的稳定性 | 第62-72页 |
| 4.1 实验材料 | 第63页 |
| 4.1.1 药品与试剂 | 第63页 |
| 4.1.2 耗材与仪器 | 第63页 |
| 4.2 实验方法 | 第63-65页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第63-64页 |
| 4.2.2 Western blot实验 | 第64页 |
| 4.2.3 免疫荧光共聚焦实验 | 第64-65页 |
| 4.3 实验结果 | 第65-70页 |
| 4.3.1 MT189对HUVEC细胞骨架蛋白和胞间连接蛋白的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.2 MT189处理导致细胞骨架微丝发生重构 | 第66-67页 |
| 4.3.3 MT189引起Vinculin蛋白在细胞中分布的变化 | 第67页 |
| 4.3.4 MT189对 β-Catenin蛋白的影响 | 第67-68页 |
| 4.3.5 MT189增强VE-Cadherin与Vinculin及 β-Catenin蛋白的共定位 | 第68-69页 |
| 4.3.6 MT189对肿瘤细胞骨架蛋白和胞间连接蛋白的影响 | 第69-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-72页 |
| 第5章 MT189抑制黏着斑重塑 | 第72-80页 |
| 5.1 实验材料 | 第72-73页 |
| 5.1.1 药品与试剂 | 第72-73页 |
| 5.1.2 耗材与仪器 | 第73页 |
| 5.2 实验方法 | 第73-75页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第73页 |
| 5.2.2 Western blot实验 | 第73-74页 |
| 5.2.3 免疫荧光共聚焦实验 | 第74-75页 |
| 5.3 实验结果 | 第75-79页 |
| 5.3.1 MT189对FAK和Paxillin蛋白量的影响 | 第75-76页 |
| 5.3.2 MT189对Paxillin蛋白分布的影响 | 第76-77页 |
| 5.3.3 MT189促进Vinculin与Paxillin的结合 | 第77-78页 |
| 5.3.4 MT189抑制肿瘤细胞中Src、FAK及Paxillin蛋白的磷酸化 | 第78页 |
| 5.3.5 MT189抑制缺氧诱导肿瘤细胞中Src及FAK蛋白的磷酸化 | 第78-79页 |
| 5.4 讨论 | 第79-80页 |
| 第6章 MT189经由JNK-VEGF通路抑制血管新生 | 第80-93页 |
| 6.1 实验材料 | 第80-81页 |
| 6.1.1 药品与试剂 | 第80-81页 |
| 6.1.2 耗材与仪器 | 第81页 |
| 6.2 实验方法 | 第81-84页 |
| 6.2.1 细胞培养 | 第81-82页 |
| 6.2.2 细胞迁移实验 | 第82页 |
| 6.2.3 细胞管腔形成实验 | 第82页 |
| 6.2.4 Western blot实验 | 第82-83页 |
| 6.2.5 荧光定量PCR | 第83-84页 |
| 6.2.6 ELISA法测定VEGF分泌 | 第84页 |
| 6.3 实验结果 | 第84-91页 |
| 6.3.1 JNK抑制剂减弱MT189对HUVEC细胞迁移抑制作用 | 第84-85页 |
| 6.3.2 JNK抑制剂逆转MT189对HUVEC细胞分泌VEGF的抑制作用 | 第85-86页 |
| 6.3.3 JNK抑制剂逆转MT189对肿瘤细胞分泌VEGF的抑制作用 | 第86页 |
| 6.3.4 SP600125部分逆转MT189引起的JNK、c-Jun、Src及FAK变化 | 第86-87页 |
| 6.3.5 MT189在缺氧条件下激活JNK通路及转录因子c-Jun | 第87-88页 |
| 6.3.6 MT189在缺氧条件下抑制Src和FAK的磷酸化 | 第88页 |
| 6.3.7 JNK抑制剂减弱MT189对HUVEC细胞管腔形成的抑制作用 | 第88-89页 |
| 6.3.8 JNK抑制剂减弱MT189抑制肿瘤细胞VEGF转录作用 | 第89-90页 |
| 6.3.9 JNK抑制剂部分逆转MT189增加JNK和c-Jun磷酸化的作用 | 第90-91页 |
| 6.4 讨论 | 第91-93页 |
| 第7章 总结与展望 | 第93-96页 |
| 参考文献 | 第96-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 附录Ⅰ 作者简历及研究生在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第107-108页 |
| 附录Ⅱ 发表论文全文或首页 | 第108-112页 |
| 附录Ⅲ 研究生在学期间参加的学术会议 | 第112页 |
