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莱茵衣藻KCN11钾离子通道的鉴定及功能研究

摘要第3-4页
abstract第4页
主要英文缩略词对照表第8-10页
第1章 前言第10-37页
    1.1 伸缩泡复合体的结构与功能第11-22页
        1.1.1 伸缩泡复合体的形态结构第11-14页
        1.1.2 伸缩泡复合体的运动形式第14-15页
        1.1.3 伸缩泡复合体的组成第15-17页
        1.1.4 伸缩泡复合体的功能第17-21页
        1.1.5 莱茵衣藻的伸缩泡第21-22页
    1.2 钾离子通道第22-27页
        1.2.1 钾离子通道的研究历史第22页
        1.2.2 钾离子通道的结构第22-25页
        1.2.3 动物和植物中的钾离子通道第25-27页
    1.3 钾离子与植物代谢第27-29页
    1.4 衣藻中的氮代谢第29-30页
    1.5 衣藻对缺氮的响应及适应第30-34页
    1.6 衣藻的油脂组成及TAG合成途径第34-36页
        1.6.1 衣藻的油脂组成第34-35页
        1.6.2 衣藻的TAG合成途径第35-36页
    1.7 本论文的研究内容与意义第36-37页
第2章 实验材料与方法第37-56页
    2.1 实验材料第37-38页
        2.1.1 细胞株第37页
        2.1.2 细菌菌株及质粒载体第37页
        2.1.3 常用试剂及抗体第37-38页
    2.2 实验仪器第38页
    2.3 常用溶液及配制方法第38-40页
    2.4 实验方法第40-56页
        2.4.1 质粒提取第40页
        2.4.2 琼脂糖凝胶回收第40-41页
        2.4.3 PCR产物纯化第41页
        2.4.4 感受态细胞制备第41页
        2.4.5 大肠杆菌转化第41-42页
        2.4.6 菌落PCR第42-43页
        2.4.7 Atg8蛋白原核表达第43页
        2.4.8 衣藻细胞培养第43页
        2.4.9 血球计数板计数第43页
        2.4.10 HEK293细胞的培养与传代第43-44页
        2.4.11 衣藻转化第44-45页
        2.4.12 HEK293细胞转染第45页
        2.4.13 膜片钳电流记录第45-46页
        2.4.14 衣藻细胞缺氮处理及四分体分析第46页
        2.4.15 衣藻突变体的筛选第46页
        2.4.16 衣藻基因组DNA的提取第46-47页
        2.4.17 RESDA-PCR法鉴定突变基因第47-48页
        2.4.18 衣藻RNA提取及荧光定量PCR(qRT-PCR)第48-49页
        2.4.19 SDS-PAGE凝胶电泳及免疫印迹第49-51页
        2.4.20 衣藻细胞免疫荧光第51页
        2.4.21 透射及免疫电镜第51-52页
        2.4.22 尼龙红(NileRed)以及荧光素二乙酸酯(FDA)染色第52-53页
        2.4.23 衣藻伸缩泡伸缩显微拍摄第53页
        2.4.24 叶绿素提取方法第53页
        2.4.25 衣藻油脂提取第53页
        2.4.26 薄层层析(TLC)法测定TAG含量第53-54页
        2.4.27 代谢物提取方法第54页
        2.4.28 高效液相色谱分析第54-55页
        2.4.29 质谱分析第55-56页
第3章 KCN11参与衣藻渗透调节第56-75页
    3.1 本章背景第56-57页
    3.2 实验结果与分析第57-74页
        3.2.1 衣藻基因组中钾离子通道的鉴定第57-62页
        3.2.2 kcn11突变体的鉴定第62-63页
        3.2.3 KCN11编码一个真正的钾离子通道第63-65页
        3.2.4 KCN11定位在衣藻伸缩泡的膜上第65-70页
        3.2.5 KCN11调控衣藻伸缩泡的伸缩周期第70-72页
        3.2.6 KCN11调控细胞在低渗环境下的生存第72-74页
    3.3 本章总结第74-75页
第4章 KCN11参与衣藻对缺氮胁迫的响应第75-93页
    4.1 本章背景第75-76页
    4.2 实验结果与分析第76-92页
        4.2.1 缺氮可诱导KCN11蛋白表达量升高第76页
        4.2.2 KCN11参与细胞渗透调节过程对缺氮的响应第76-79页
        4.2.3 KCN11参与细胞多种其他生理过程对缺氮胁迫的响应第79-84页
        4.2.4 KCN11调控细胞对缺氮的生理响应与其渗透调节功能紧密相关第84-88页
        4.2.5 KCN11调控缺氮胁迫下TAG积累过程的机制探索第88-92页
    4.3 本章总结第92-93页
第5章 总结与展望第93-101页
    5.1 论文总结第93-96页
        5.1.1 KCN11蛋白参与衣藻渗透调节第93-94页
        5.1.2 KCN11蛋白参与衣藻对缺氮胁迫的响应第94-96页
    5.2 讨论与展望第96-101页
        5.2.1 伸缩泡渗透调节机制第96-98页
        5.2.2 生物能源及衣藻的缺氮代谢第98-101页
参考文献第101-116页
致谢第116-118页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第118页

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