摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4页 |
主要英文缩略词对照表 | 第8-10页 |
第1章 前言 | 第10-37页 |
1.1 伸缩泡复合体的结构与功能 | 第11-22页 |
1.1.1 伸缩泡复合体的形态结构 | 第11-14页 |
1.1.2 伸缩泡复合体的运动形式 | 第14-15页 |
1.1.3 伸缩泡复合体的组成 | 第15-17页 |
1.1.4 伸缩泡复合体的功能 | 第17-21页 |
1.1.5 莱茵衣藻的伸缩泡 | 第21-22页 |
1.2 钾离子通道 | 第22-27页 |
1.2.1 钾离子通道的研究历史 | 第22页 |
1.2.2 钾离子通道的结构 | 第22-25页 |
1.2.3 动物和植物中的钾离子通道 | 第25-27页 |
1.3 钾离子与植物代谢 | 第27-29页 |
1.4 衣藻中的氮代谢 | 第29-30页 |
1.5 衣藻对缺氮的响应及适应 | 第30-34页 |
1.6 衣藻的油脂组成及TAG合成途径 | 第34-36页 |
1.6.1 衣藻的油脂组成 | 第34-35页 |
1.6.2 衣藻的TAG合成途径 | 第35-36页 |
1.7 本论文的研究内容与意义 | 第36-37页 |
第2章 实验材料与方法 | 第37-56页 |
2.1 实验材料 | 第37-38页 |
2.1.1 细胞株 | 第37页 |
2.1.2 细菌菌株及质粒载体 | 第37页 |
2.1.3 常用试剂及抗体 | 第37-38页 |
2.2 实验仪器 | 第38页 |
2.3 常用溶液及配制方法 | 第38-40页 |
2.4 实验方法 | 第40-56页 |
2.4.1 质粒提取 | 第40页 |
2.4.2 琼脂糖凝胶回收 | 第40-41页 |
2.4.3 PCR产物纯化 | 第41页 |
2.4.4 感受态细胞制备 | 第41页 |
2.4.5 大肠杆菌转化 | 第41-42页 |
2.4.6 菌落PCR | 第42-43页 |
2.4.7 Atg8蛋白原核表达 | 第43页 |
2.4.8 衣藻细胞培养 | 第43页 |
2.4.9 血球计数板计数 | 第43页 |
2.4.10 HEK293细胞的培养与传代 | 第43-44页 |
2.4.11 衣藻转化 | 第44-45页 |
2.4.12 HEK293细胞转染 | 第45页 |
2.4.13 膜片钳电流记录 | 第45-46页 |
2.4.14 衣藻细胞缺氮处理及四分体分析 | 第46页 |
2.4.15 衣藻突变体的筛选 | 第46页 |
2.4.16 衣藻基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
2.4.17 RESDA-PCR法鉴定突变基因 | 第47-48页 |
2.4.18 衣藻RNA提取及荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第48-49页 |
2.4.19 SDS-PAGE凝胶电泳及免疫印迹 | 第49-51页 |
2.4.20 衣藻细胞免疫荧光 | 第51页 |
2.4.21 透射及免疫电镜 | 第51-52页 |
2.4.22 尼龙红(NileRed)以及荧光素二乙酸酯(FDA)染色 | 第52-53页 |
2.4.23 衣藻伸缩泡伸缩显微拍摄 | 第53页 |
2.4.24 叶绿素提取方法 | 第53页 |
2.4.25 衣藻油脂提取 | 第53页 |
2.4.26 薄层层析(TLC)法测定TAG含量 | 第53-54页 |
2.4.27 代谢物提取方法 | 第54页 |
2.4.28 高效液相色谱分析 | 第54-55页 |
2.4.29 质谱分析 | 第55-56页 |
第3章 KCN11参与衣藻渗透调节 | 第56-75页 |
3.1 本章背景 | 第56-57页 |
3.2 实验结果与分析 | 第57-74页 |
3.2.1 衣藻基因组中钾离子通道的鉴定 | 第57-62页 |
3.2.2 kcn11突变体的鉴定 | 第62-63页 |
3.2.3 KCN11编码一个真正的钾离子通道 | 第63-65页 |
3.2.4 KCN11定位在衣藻伸缩泡的膜上 | 第65-70页 |
3.2.5 KCN11调控衣藻伸缩泡的伸缩周期 | 第70-72页 |
3.2.6 KCN11调控细胞在低渗环境下的生存 | 第72-74页 |
3.3 本章总结 | 第74-75页 |
第4章 KCN11参与衣藻对缺氮胁迫的响应 | 第75-93页 |
4.1 本章背景 | 第75-76页 |
4.2 实验结果与分析 | 第76-92页 |
4.2.1 缺氮可诱导KCN11蛋白表达量升高 | 第76页 |
4.2.2 KCN11参与细胞渗透调节过程对缺氮的响应 | 第76-79页 |
4.2.3 KCN11参与细胞多种其他生理过程对缺氮胁迫的响应 | 第79-84页 |
4.2.4 KCN11调控细胞对缺氮的生理响应与其渗透调节功能紧密相关 | 第84-88页 |
4.2.5 KCN11调控缺氮胁迫下TAG积累过程的机制探索 | 第88-92页 |
4.3 本章总结 | 第92-93页 |
第5章 总结与展望 | 第93-101页 |
5.1 论文总结 | 第93-96页 |
5.1.1 KCN11蛋白参与衣藻渗透调节 | 第93-94页 |
5.1.2 KCN11蛋白参与衣藻对缺氮胁迫的响应 | 第94-96页 |
5.2 讨论与展望 | 第96-101页 |
5.2.1 伸缩泡渗透调节机制 | 第96-98页 |
5.2.2 生物能源及衣藻的缺氮代谢 | 第98-101页 |
参考文献 | 第101-116页 |
致谢 | 第116-118页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第118页 |