| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-27页 |
| 1.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第12-16页 |
| 1.1.1 植物抗旱性生理生化指标 | 第13-15页 |
| 1.1.2 植物抗旱分子机理研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 植物耐热研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.1 热胁迫对植物的影响 | 第17-18页 |
| 1.2.2 植物抵抗热胁迫的分子机理 | 第18-19页 |
| 1.3 E3泛素连接酶调控植物抗旱抗热的研究进展 | 第19-27页 |
| 1.3.1 E3泛素连接酶的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.2 E3泛素连接酶基因参与调控植物响应干旱胁迫 | 第21-25页 |
| 1.3.3 E3泛素连接酶参与调控植物的温度胁迫 | 第25-27页 |
| 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-36页 |
| 2.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.2 利用荧光定量PCR鉴定转基因拷贝数 | 第28-29页 |
| 2.2.1 CTAB法提取DNA | 第28页 |
| 2.2.2 定量PCR反应体系和反应条件 | 第28-29页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR引物 | 第29页 |
| 2.3 抗旱性鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.1 拟南芥种子的消毒 | 第29页 |
| 2.3.2 拟南芥培养 | 第29-30页 |
| 2.4 抗热性鉴定 | 第30页 |
| 2.4.1 MS培养基的配置 | 第30页 |
| 2.4.2 耐热性鉴定方法 | 第30页 |
| 2.5 测量植株的净光合值以及蒸腾速率 | 第30页 |
| 2.6 测量植物的地上部分以及地下部分的相对含水量(RWC) | 第30页 |
| 2.7 测量气孔的相关指数 | 第30-31页 |
| 2.8 基因表达量的检测 | 第31-33页 |
| 2.8.1 Trizo1法提取拟南芥总RNA | 第31页 |
| 2.8.2 DNaseI消化去除总RNA中DNA污染 | 第31-32页 |
| 2.8.3 反转录反应 | 第32页 |
| 2.8.4 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 2.8.5 与干旱相关的基因 | 第33页 |
| 2.9 蛋白质组学分析 | 第33-36页 |
| 2.9.1 蛋白质样品的制备方法 | 第33-34页 |
| 2.9.2 双向电泳 | 第34页 |
| 2.9.3 染色 | 第34页 |
| 2.9.4 图像的采集和分析 | 第34-35页 |
| 2.9.5 胶内酶解 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-62页 |
| 3.1 GhMAC3的生物信息学分析 | 第36-39页 |
| 3.1.1 GhMAC3的顺式作用元件分析 | 第36-37页 |
| 3.1.2 GhMAC3结构域分析 | 第37-39页 |
| 3.2 GhMAC3在过表达拟南芥中的拷贝数分析 | 第39-42页 |
| 3.2.1 CTAB法提取拟南芥总DNA的质量检测 | 第39-40页 |
| 3.2.2 GhMAC3标准品以及内参基因UBQ10标准曲线的建立 | 第40页 |
| 3.2.3 棉花GhMAC3在各过表达拟南芥株系中的拷贝数计算 | 第40-41页 |
| 3.2.4 利用荧光定量PCR的方法计算拷贝数中引物特异性分析 | 第41-42页 |
| 3.3 GhMAC3在过表达拟南芥中的表达量分析 | 第42-43页 |
| 3.3.1 RNA提取及质量检测 | 第42-43页 |
| 3.3.2 干旱胁迫时GhMAC3在野生型和过表达拟南芥中的表达量分析 | 第43页 |
| 3.4 GhMAC3过表达拟南芥的抗旱性鉴定 | 第43-46页 |
| 3.5 地上部分和地下部分相对含水量分析 | 第46-48页 |
| 3.6 光合作用相关指标分析 | 第48-51页 |
| 3.7 气孔开度以及密度分析 | 第51-52页 |
| 3.8 干旱相关基因在过表达拟南芥株系中的表达量分析 | 第52-55页 |
| 3.9 利用双向电泳技术寻找GhMAC3过表达拟南芥中的差异蛋白 | 第55-58页 |
| 3.10 GhMAC3过表达拟南芥的抗热性鉴定 | 第58-62页 |
| 4 讨论 | 第62-68页 |
| 4.1 GhMAC3与ABA信号途径的关系 | 第62-63页 |
| 4.2 泛素连接酶GhMAC3的在植物中的功能 | 第63-65页 |
| 4.3 qRT-PCR引物设计 | 第65页 |
| 4.4 提高作物抗旱性的途径 | 第65-68页 |
| 5 全文结论 | 第68-70页 |
| 本研究创新之处 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
