| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第12-39页 |
| 第一章 植物病原卵菌外泌蛋白研究进展 | 第13-31页 |
| 1 卵菌胞内效应分子研究进展 | 第14-21页 |
| 1.1 RXLR效应分子的结构和功能研究进展 | 第15-17页 |
| 1.1.1 RXLR效应分子的结构分析 | 第15-17页 |
| 1.2 RXLR效应分子及其靶标的功能分析 | 第17-19页 |
| 1.2.1 大豆疫霉效应分子Avr3b | 第18页 |
| 1.2.2 大豆疫霉效应分子Avh238 | 第18-19页 |
| 1.2.3 大豆疫霉效应分子PSR2 | 第19页 |
| 1.3 CRN家族效应分子的功能研究进展 | 第19-20页 |
| 1.3.1 CRN家族效应分子的结构研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 CRN家族效应分子的毒性功能研究 | 第20-21页 |
| 1.4.1 CRN效应分子可以作用于寄主细胞核 | 第20-21页 |
| 1.4.2 CRN效应分子的毒性功能 | 第21页 |
| 1.4.3 CRN效应分子能够通过结合和修饰靶标来促进侵染 | 第21页 |
| 2 卵菌胞间效应分子研究进展 | 第21-23页 |
| 2.1 酶抑制子 | 第21-22页 |
| 2.2 Elicitin蛋白 | 第22页 |
| 2.3 NLP家族 | 第22-23页 |
| 2.4 其他类的胞间蛋白 | 第23页 |
| 3 研究展望 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-31页 |
| 第二章 转录共激活因子SAGA复合体的研究进展 | 第31-39页 |
| 1 组蛋白乙酰化模块功能分析 | 第31-32页 |
| 2 SAGA复合体行使不同功能时需要的亚基 | 第32-33页 |
| 2.1 共激活构架模块 | 第32-33页 |
| 2.2 去泛素化功能模块 | 第33页 |
| 3 SAGA复合体在非生物胁迫下调控基因表达 | 第33-34页 |
| 4 研究展望 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 下篇 研究内容 | 第39-85页 |
| 第一章 大豆疫霉OG5_154821新型外泌蛋白家族功能鉴定 | 第41-67页 |
| 1 材料与方法 | 第42-53页 |
| 1.1 试验用本氏烟的培养 | 第42页 |
| 1.2 试验用菌株的培养和保存 | 第42-43页 |
| 1.2.1 辣椒疫霉的接种方法 | 第43页 |
| 1.3 利用快速克隆技术进行目的基因克隆和载体的构建 | 第43-44页 |
| 1.3.1 供试克隆载体的线性化 | 第43页 |
| 1.3.2 供试片段的引物设计 | 第43-44页 |
| 1.3.3 特异性重组片段和线性化载体的重组反应 | 第44页 |
| 1.4 大肠杆菌菌株JM109和BL21的感受态制作及转化方法 | 第44-45页 |
| 1.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备方法 | 第44-45页 |
| 1.4.2 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第45页 |
| 1.5 农杆菌GV3101感受态细胞的制备和转化方法 | 第45-47页 |
| 1.5.1 农杆菌电击感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
| 1.5.2 农杆菌电击感受态细胞的转化方法 | 第46-47页 |
| 1.6 利用酵母系统验证信号肽的功能 | 第47-48页 |
| 1.6.1 重组质粒的构建 | 第47页 |
| 1.6.2 酵母转化和信号肽功能预测 | 第47-48页 |
| 1.7 植物RNA的提取和cDNA的制备 | 第48-50页 |
| 1.7.1 植物RNA的提取(OMEGARNA提取试剂盒) | 第48-49页 |
| 1.7.2 RNA逆转录 | 第49-50页 |
| 1.8 菌丝RNA的提取 | 第50-51页 |
| 1.9 crispr/cas9重组质粒的构建 | 第51-53页 |
| 1.9.1 hSpCas9表达载体 | 第51-52页 |
| 1.9.2 sgRNA的克隆 | 第52-53页 |
| 1.10 CTAB-SDS法提取转化子基因组 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-67页 |
| 2.1 OG5_154821外泌家族的鉴定 | 第53-54页 |
| 2.2 OG5-154821外泌家族中基因的克隆和功能分析 | 第54-58页 |
| 2.2.1 OG5_154821外泌家族基因的克隆 | 第54页 |
| 2.2.2 OG5_154821外泌家族的功能分析 | 第54-58页 |
| 2.3 候选效应分子Ps_128701能够引起细胞坏死 | 第58-59页 |
| 2.4 候选效应分子Ps_128701的信号肽具有功能 | 第59-60页 |
| 2.5 候选效应分子Ps_128701在不同侵染时期的转录模式 | 第60页 |
| 2.6 候选效应分子Ps_128701基因的敲除和功能分析 | 第60-66页 |
| 2.6.1 Ps_128701基因中sgRNA序列的筛选分析 | 第60-63页 |
| 2.6.2 候选效应分子Ps_128701转化子的获得 | 第63-64页 |
| 2.6.3 候选效应分子Ps_128701转化子的致病性 | 第64-65页 |
| 2.6.4 候选效应分子Ps_128701转化子不影响大豆疫霉的生长 | 第65-66页 |
| 2.7 讨论 | 第66-67页 |
| 第二章 ADA2在植物免疫过程中的作用 | 第67-85页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| 1.1 Western blot技术 | 第68-71页 |
| 1.1.1 原核表达载体的构建 | 第68页 |
| 1.1.2 目的基因的诱导表达 | 第68页 |
| 1.1.3 目的基因在烟草叶片上表达 | 第68-69页 |
| 1.1.4 植物蛋白的提取 | 第69页 |
| 1.1.5 蛋白质SDS-PAGE电泳 | 第69-70页 |
| 1.1.6 Western Blot | 第70-71页 |
| 1.2 酵母双杂交技术 | 第71-72页 |
| 1.3 植物体内免疫共沉淀技术(Co-IP) | 第72-73页 |
| 1.3.1 植物表达载体的构建 | 第72页 |
| 1.3.2 目的基因在烟草叶片上表达 | 第72页 |
| 1.3.3 植物蛋白的提取 | 第72-73页 |
| 1.3.4 Co-IP(GFP-tag) | 第73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-83页 |
| 2.1 PsAvh23能够和拟南芥中ADA2蛋白互作 | 第73-75页 |
| 2.2 PsAvh23的二级结构突变体仍然能够和GmADA2-1互作 | 第75-78页 |
| 2.3 过表达GmADA2-1能够抑制辣椒疫霉的侵染 | 第78页 |
| 2.4 沉默烟草中ADA2的同源基因能够促进辣椒疫霉的侵染 | 第78-80页 |
| 2.5 讨论 | 第80-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 攻读硕士期间发表的研究论文 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
