| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第12-39页 |
| 第一章 异源三聚体G蛋白信号途径的研究进展 | 第13-27页 |
| 1 异三聚体G蛋白信号途径概述 | 第13-15页 |
| 2 G蛋白调控因子(RGS)的研究进展 | 第15-21页 |
| 2.1 RGS蛋白的蛋白质性质和结构特征 | 第15-16页 |
| 2.2 RGS蛋白的分类 | 第16-17页 |
| 2.3 RGS蛋白的调控机制 | 第17-18页 |
| 2.4 RGS蛋白在真菌中的研究进展 | 第18-21页 |
| 参考文献 | 第21-27页 |
| 第二章 Dynamin蛋白的功能研究 | 第27-39页 |
| 1 Dynamin蛋白的生物学意义 | 第27-28页 |
| 2 Dynamin蛋白的结构 | 第28-31页 |
| 3 Dynamin在内吞作用中的作用 | 第31-34页 |
| 3.1 组装和聚合 | 第32-33页 |
| 3.2 构象变化和水解 | 第33页 |
| 3.3 胞吞 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-39页 |
| 下篇 研究内容 | 第39-86页 |
| 第一章 稻瘟病菌RGS家族蛋白RGS结构域的功能解析 | 第40-66页 |
| 1 材料与方法 | 第42-47页 |
| 1.1 供试菌株的培养与保存 | 第42页 |
| 1.2 氨基酸序列分析和结构域预测 | 第42页 |
| 1.3 稻瘟病菌菌丝体DNA和RNA的提取 | 第42-43页 |
| 1.4 供试cDNA的制备 | 第43页 |
| 1.5 结构域嵌合质粒载体构建和验证 | 第43-44页 |
| 1.5.1 结构域嵌合质粒载体构建 | 第43页 |
| 1.5.2 western blot验证 | 第43-44页 |
| 1.6 结构域嵌合菌株的基本表型测定 | 第44-45页 |
| 1.6.1 结构域嵌合菌株在不同培养基上的生长测定 | 第44页 |
| 1.6.2 结构域嵌合菌株菌丝自溶 | 第44-45页 |
| 1.6.3 结构域嵌合菌株产孢量统计 | 第45页 |
| 1.7 结构域嵌合菌株分生孢子萌发、附着胞形成情况 | 第45页 |
| 1.8 结构域嵌合菌株附着胞形态观察 | 第45页 |
| 1.9 结构域嵌合菌株胞内cAMP测定 | 第45-46页 |
| 1.10 结构域嵌合菌株菌丝疏水性分析 | 第46页 |
| 1.11 实时定量PCR分析 | 第46页 |
| 1.12 结构域嵌合菌株水稻喷雾接种致病性测定 | 第46-47页 |
| 1.13 离体大麦叶片致病性测定 | 第47页 |
| 1.14 结构域嵌合菌株亚细胞定位观察 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-61页 |
| 2.1 稻瘟病菌MoRgs1、MoRgs3、MoRgs4、MoRgs7结构域及系统进化树分析 | 第47-48页 |
| 2.2 结构域嵌合质粒载体构建和菌株的获得 | 第48-50页 |
| 2.2.1 结构域嵌合质粒载体构建 | 第48-50页 |
| 2.2.2 结构域嵌合菌株的获得 | 第50页 |
| 2.3 RGS7结构域在调控稻瘟病菌菌丝生长过程中与RGS1结构域有相似作用 | 第50-52页 |
| 2.4 RGS7结构域在调控稻瘟病菌细胞壁完整性过程与RGS1结构域有相似作用 | 第52-53页 |
| 2.5 RGS7结构域在调控稻瘟病菌菌丝疏水性过程与RGS1结构域有相似作用 | 第53-54页 |
| 2.6 胞内CAMP水平测定 | 第54-55页 |
| 2.7 结构域嵌合菌株产孢量统计 | 第55-56页 |
| 2.8 RGS结构域在表面信号识别过程中具有相似性 | 第56-57页 |
| 2.9 结构域嵌合菌株附着胞形成分析 | 第57-58页 |
| 2.10 各RGS结构域特异性调控稻瘟病菌的致病过程 | 第58-59页 |
| 2.11 结构域嵌合菌株的亚细胞定位 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 第二章 Dynamin家族蛋白MoDnm2和MoDnm3在稻瘟病菌中的功能研究 | 第66-86页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| 1.1 供试菌株的培养与保存 | 第68页 |
| 1.2 稻瘟病菌DNA、RNA的提取及cDNA的制备 | 第68-69页 |
| 1.2.1 稻瘟病菌菌丝体DNA和RNA的提取 | 第68页 |
| 1.2.2 供试cDNA的制备 | 第68-69页 |
| 1.3 MoDnm2和MoDnm3氨基酸序列分析及系统发育分析 | 第69页 |
| 1.3.1 MoDnm2和MoDnm3的氨基酸序列分析 | 第69页 |
| 1.3.2 MoDnm2和MoDnm3系统发育分析 | 第69页 |
| 1.4 稻瘟病菌MoDNM2和MoDNM3基因的敲除与互补 | 第69-71页 |
| 1.4.1 MoDNM2和MoDNM3敲除载体的构建 | 第69-70页 |
| 1.4.2 MoDNM2和MoDNM3敲除突变体的筛选及验证 | 第70-71页 |
| 1.4.3 MoDNM2和MoDNM3敲除突变体的基因互补 | 第71页 |
| 1.5 MoDNM2和MoDNM3敲除突变体的基本表型测定 | 第71-72页 |
| 1.5.1 敲除突变体在不同培养基上的生长测定 | 第71页 |
| 1.5.2 MoDNM2和MoDNM3敲除突变体产孢量统计 | 第71-72页 |
| 1.6 突变体分生孢子萌发、附着胞形成情况 | 第72页 |
| 1.7 MoDNM2和MoDNM3敲除突变体水稻喷雾接种致病性测定 | 第72页 |
| 1.8 MoDNM2和MoDNM3敲除突变体的胁迫试验 | 第72-73页 |
| 1.8.1 突变体盐胁迫敏感性分析 | 第72页 |
| 1.8.2 突变体细胞壁完整性分析 | 第72-73页 |
| 1.8.3 突变体对H_2O_2耐受性分析 | 第73页 |
| 2 结果分析 | 第73-81页 |
| 2.1 MoDnm2和MoDnm3的氨基酸序列分析及系统发育树分析 | 第73-74页 |
| 2.2 MoDNM2和MoDNM3敲除突变体及互补转化子的筛选 | 第74-75页 |
| 2.3 MoDNM2基因参与调控稻瘟病菌的营养生长 | 第75页 |
| 2.4 MoDNM2、MoDNM3基因不参与调控分生孢子的产生 | 第75-76页 |
| 2.5 MoDNM3基因参与调控附着胞的形成 | 第76-77页 |
| 2.6 MoDNM2和MoDNM3基因不参与调控稻瘟病菌的致病过程 | 第77页 |
| 2.7 突变体对高渗离子的反应 | 第77-79页 |
| 2.8 △Modnm2、△Modnm3突变体对过氧化氢的敏感性增强 | 第79-80页 |
| 2.9 MoDNM2和MoDNM3基因参与调控稻瘟病菌的细胞壁完整性 | 第80-81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 附录1 试验常用的培养基 | 第86-89页 |
| 附录2 试验所用引物 | 第89-92页 |
| 攻读硕士期间发表的研究论文 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
