| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 研究背景 | 第15-24页 |
| 1.1 水稻细菌性褐条病研究进展 | 第15页 |
| 1.2 噬菌体 | 第15-16页 |
| 1.3 噬菌体的裂解系统 | 第16-23页 |
| 1.3.1 穿孔素 | 第17-18页 |
| 1.3.2 抗穿孔素 | 第18-19页 |
| 1.3.3 裂解素 | 第19-20页 |
| 1.3.4 依赖于穿孔素的裂解系统 | 第20-21页 |
| 1.3.5 不依赖穿孔素的裂解系统 | 第21-23页 |
| 1.4 本论文研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株、噬菌体与质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 培养基及溶液配制 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 常规实验方法 | 第26-28页 |
| 2.2.1 常规PCR | 第26-27页 |
| 2.2.2 酶切及连接反应 | 第27-28页 |
| 2.3 噬菌体AP1穿孔素HolAP和裂解素LysAP生物信息学分析 | 第28页 |
| 2.3.1 HolAP和LysAP编码基因的定位 | 第28页 |
| 2.3.2 HolAP和LysAP理化性质分析 | 第28页 |
| 2.3.3 HolAP和LysAP保守功能域分析 | 第28页 |
| 2.3.4 HolAP和LysAP二级结构预测 | 第28页 |
| 2.4 穿孔素HolAP的功能鉴定 | 第28-34页 |
| 2.4.1 噬菌体AP1基因组的提取 | 第28-30页 |
| 2.4.2 表达质粒pETDuet-HolAP的构建 | 第30-31页 |
| 2.4.3 HolAP表达对细菌生长的影响 | 第31-32页 |
| 2.4.4 HolAP表达对细胞膜通透性的影响 | 第32-33页 |
| 2.4.5 HolAP蛋白的亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 2.5 裂解素LysAP的功能鉴定 | 第34-37页 |
| 2.5.1. 表达质粒pETDuet-LysAP的构建 | 第34-37页 |
| 2.5.2 LysAP表达对细菌生长的影响 | 第35页 |
| 2.5.3 LysAP表达对细菌细胞膜透性的影响 | 第35-36页 |
| 2.5.4 LysAP C-端跨膜结构域的缺失分析 | 第36-37页 |
| 2.6 穿孔素HolAP和裂解素LysAP的蛋白互作分析 | 第37-38页 |
| 2.6.1 pCH-HolAP和pKNT-LysAP质粒的构建 | 第37-38页 |
| 2.6.2 HolAP与LysAP蛋白互作验证 | 第38页 |
| 2.7 穿孔素HolAP和裂解素LysAP共表达对细菌的影响 | 第38-41页 |
| 2.7.1 共表达质粒pETDuet-HolAP-LysAP的构建 | 第38-39页 |
| 2.7.2 HolAP和LysAP共表达对细菌生长的影响 | 第39页 |
| 2.7.3 HolAP和LysAP共表达对细胞膜通透性的影响 | 第39-41页 |
| 3 结果与讨论 | 第41-64页 |
| 3.1 噬菌体AP1穿孔素HolAP和裂解素LysAP的生信分析 | 第41-47页 |
| 3.1.1 HolAP和LysAP编码基因的定位 | 第41页 |
| 3.1.2 HolAP和LysAP理化性质分析 | 第41-43页 |
| 3.1.3 HolAP和LysAP保守功能域分析 | 第43-45页 |
| 3.1.4 HolAP和LysAP二级结构预测 | 第45-47页 |
| 3.2 穿孔素HolAP的功能鉴定 | 第47-51页 |
| 3.2.1 噬菌体AP1基因组的提取 | 第47页 |
| 3.2.2 表达质粒pETDuet-HolAP的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.3 HolAP表达对细菌生长的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.4 HolAP表达对细胞膜通透性的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.5 HolAP蛋白的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| 3.3 裂解素LysAP的功能鉴定 | 第51-57页 |
| 3.3.1 表达质粒pETDuet-LysAP的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.2 LysAP表达对细菌生长的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.3 LysAP表达对细胞膜通透性的影响 | 第53-55页 |
| 3.3.4 裂解素LysAP C-端跨膜结构域缺失分析 | 第55-57页 |
| 3.4 穿孔素HolAP和裂解素LysAP的蛋白互作分析 | 第57-58页 |
| 3.4.1 pCH-HolAP和pKNT-LysAP质粒的构建 | 第57页 |
| 3.4.2 HolAP与LysAP蛋白互作验证 | 第57-58页 |
| 3.5 穿孔素HolAP和裂解素LysAP共表达对细菌的影响 | 第58-61页 |
| 3.5.1 共表达质粒pETDuet-HolAP-LysAP的构建 | 第58页 |
| 3.5.2 HolAP和LysAP共表达对细菌生长的影响 | 第58-60页 |
| 3.5.3 HolAP和LysAP共表达对细胞膜通透性的影响 | 第60-61页 |
| 3.6 讨论 | 第61-64页 |
| 3.6.1 噬菌体AP1穿孔素HolAP和裂解素LysAP的生信分析 | 第61-62页 |
| 3.6.2 穿孔素HolAP的功能鉴定 | 第62页 |
| 3.6.3 裂解素LysAP的功能鉴定 | 第62-63页 |
| 3.6.4 穿孔素HoLAP和裂解素LysAP共表达的功能鉴定 | 第63-64页 |
| 4 全文小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70页 |
