致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号和缩用语 | 第9-12页 |
1 综述 | 第12-24页 |
1.1 烟草花叶病毒属病毒 | 第12-13页 |
1.1.1 烟草花叶病毒属病毒的生物学特性 | 第12页 |
1.1.2 Tobamovirus病毒的基因组结构及编码蛋白的功能 | 第12-13页 |
1.2 NMD作用蛋白和识别机制研究进展 | 第13-21页 |
1.2.1 NMD途径中关键蛋白 | 第14-18页 |
1.2.2 NMD识别模式 | 第18-21页 |
1.3 NMD途径与病毒的关系 | 第21-24页 |
1.3.2 NMD作用的植物正义链RNA病毒 | 第23-24页 |
2 引言 | 第24-25页 |
3 材料与方法 | 第25-39页 |
3.1 试验材料 | 第25-26页 |
3.1.1 供试植株及种植 | 第25页 |
3.1.2 菌株及克隆载体 | 第25页 |
3.1.3 试剂 | 第25页 |
3.1.4 仪器设备 | 第25-26页 |
3.2 试验方法 | 第26-39页 |
3.2.1 RNAi载体及VIGS载体构建 | 第26-27页 |
3.2.2 农杆菌浸润本氏烟 | 第27页 |
3.2.3 本氏烟植株病毒接种 | 第27-28页 |
3.2.4 荧光倒置显微镜观察荧光斑点 | 第28页 |
3.2.5 总RNA提取 | 第28-29页 |
3.2.6 cDNA的合成 | 第29页 |
3.2.7 实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
3.2.8 Northernblot | 第30-32页 |
3.2.9 Westernblot检测 | 第32-34页 |
3.2.10 表达载体的构建 | 第34-39页 |
4 结果 | 第39-57页 |
4.1 Upf1沉默可能促进TMV侵染 | 第39-46页 |
4.1.1 局部沉默Upf1可能促进TMV-GFP侵染 | 第39-42页 |
4.1.2 系统沉默Upf1不会引起本氏烟植株的表型改变 | 第42-43页 |
4.1.3 系统沉默Upf1可能促进TMV侵染 | 第43-46页 |
4.2 沉默Upf基因可能促进PMMoV侵染 | 第46-57页 |
4.2.1 局部沉默Upf基因可能促进PMMoV-GFP的侵染 | 第46-49页 |
4.2.2 系统沉默Upf1可能促进PMMoV-GFP的侵染 | 第49-51页 |
4.2.3 系统沉默Upf2、Upf3可能促进PMMoV-GFP的侵染 | 第51-53页 |
4.2.4 Upf基因沉默后可能依赖于sgRNA-CP促进PMMoV的侵染.. | 第53-57页 |
5 讨论 | 第57-59页 |
5.1 系统沉默Upf基因不会对本氏烟植株造成明显的表型缺陷 | 第57页 |
5.2 沉默Upf1基因促进TMV-GFP的侵染 | 第57页 |
5.3 沉默Upf基因促进PMMoV-GFP的侵染 | 第57-58页 |
5.4 Upf基因沉默后依赖于sgRNA-CP促进PMMoV的侵染 | 第58-59页 |
6 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
附录Ⅰ培养基及试剂的配制方法 | 第69-72页 |
作者简介 | 第72页 |