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罗伯茨绿僵菌cAMP依赖的蛋白激酶A(Mrpka)基因的敲除及功能分析

致谢第5-6页
摘要第6-8页
abstract第8-9页
1 文献综述第13-18页
    1.1 农林病虫害现状第13页
    1.2 昆虫病原真菌用于生物防治前景广阔第13-14页
    1.3 绿僵菌的致病机制第14-15页
    1.4 蛋白激酶及cAMP信号途径第15-16页
    1.5 cAMP信号途径及PKA在丝状真菌中的研究第16-18页
2 引言第18-19页
3 材料与方法第19-35页
    3.1 材料第19-24页
        3.1.1 实验材料第19页
        3.1.2 实验仪器第19-20页
        3.1.3 实验试剂第20页
        3.1.4 实验常用溶液配方第20-21页
        3.1.5 培养基第21-24页
    3.2 实验方法第24-35页
        3.2.1 罗伯茨绿僵菌DNA的提取第24页
        3.2.2 罗伯茨绿僵菌中cAMP依赖的蛋白激酶A基因的鉴定第24页
        3.2.3 构建敲除质粒第24-29页
        3.2.4 敲除质粒转化农杆菌第29-30页
        3.2.5 Mrpka基因敲除突变株的筛选第30-32页
        3.2.6 回补菌株的获得第32页
        3.2.7 生物学性状测定第32-35页
4 结果与分析第35-48页
    4.1 罗伯茨绿僵菌中cAMP依赖的蛋白激酶A基因的鉴定第35-36页
    4.2 Mrpka敲除株和回补株的获得第36-39页
        4.2.1 重组质粒PCR鉴定第36-37页
        4.2.2 Mrpka敲除株的PCR验证第37-38页
        4.2.3 回补质粒PCR鉴定第38页
        4.2.4 回补株PCR鉴定第38-39页
    4.3 生物学性状测定分析第39-48页
        4.3.1 菌落颜色,形态的观察第39-40页
        4.3.2 生长速率的测定第40页
        4.3.3 产孢能力的测定第40-41页
        4.3.4 对化学药品的耐受能力测定第41-45页
        4.3.5 对紫外辐射的耐受测定第45-46页
        4.3.6 对热激的耐受测定第46-48页
5 讨论第48-49页
6 结论第49-50页
参考文献第50-55页
作者简介第55页

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